一种增强干细胞血液适应能力的方法技术

一种增强干细胞血液适应能力的方法，本发明专利技术涉及一种增强干细胞血液适应能力的方法。本发明专利技术的目的是为了解决现有干细胞血液适应能力差，导致进入血液后成活率低的问题，本发明专利技术将培养的干细胞置于封闭的培养体系中，调整培养体系的压力，尤其是模拟人体血液的压力变化，使干细胞地培养过程中就经历血液血压训练，保证只有适应血液压力变化的干细胞生长，从而保证干细胞进入血液后活性。干细胞培养体系的压力可以通过气体媒介完成，也可以通过液体媒介完成，与无压力培养相比，加压培养后干细胞入血液后的成活率提高5‑15％。本发明专利技术应用于干细胞领域。

A Method to Enhance Blood Adaptation of Stem Cells

【技术实现步骤摘要】
一种增强干细胞血液适应能力的方法
本专利技术涉及一种增强干细胞血液适应能力的方法。
技术介绍
近年来，国际、国内干细胞市场发展迅速，干细胞临床治疗被大众认可与接受，干细胞需求不断提升。干细胞应用是通过血液输送完成，由血液携带干细胞进入到人体靶点。干细胞进入患者血液后的存活数量与最终活性对干细胞应用效果影响很大。血管中血液有收缩压与舒张压变化，按人脉搏60次/分钟计算，进入血液的干细胞每秒就要受到一次收缩压与舒张压胁迫，在培养瓶或培养皿中培养的干细胞没有经过抗压训练，很难适应血液环境，很难有效保证干细胞应用效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有干细胞血液适应能力差，导致进入血液后成活率低的问题，提供了一种增强干细胞血液适应能力的方法。本专利技术一种增强干细胞血液适应能力的方法，按以下步骤进行：一、把干细胞包裹到培养载体中或吸附在载体表面，然后置于封闭容器中；二、向步骤一的封闭容器中输入压力介质，使封闭容器内压力上升；三、释放部分压力介质，使封闭容器内压力下降；四、重复步骤二和步骤三的操作1-10000次，然后回收干细胞，即完成增强干细胞血液适应能力的方法。本专利技术将干细胞置于一个压力环境中培养，使干细胞在培养过程中经历压力训练，提高进入血液后对血压的适应能力，可以有效增加干细胞进入血液后的活细胞数。与无压力培养相比，加压培养后干细胞进入血液后的成活率提高5-15％。附图说明图1为实施例1培养箱的结构示意图；图2为实施例2培养管的结构示意图。具体实施方式具体实施方式一：本实施方式一种增强干细胞血液适应能力的方法，按以下步骤进行：一、把干细胞包裹到培养载体中或吸附在载体表面，然后置于封闭容器中；二、向步骤一的封闭容器中输入压力介质，使封闭容器内压力上升；三、释放部分压力介质，使封闭容器内压力下降；四、重复步骤二和步骤三的操作1-10000次，然后回收干细胞，即完成增强干细胞血液适应能力的方法。本实施方式将干细胞置于一个压力环境中培养，使干细胞在培养过程中经历压力训练，提高进入血液后对血压的适应能力，可以有效增加干细胞进入血液后的活细胞数。与无压力培养相比，加压培养后干细胞入血液后的成活率提高5-15％。具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：压力介质为空气和二氧化碳的混合气体或干细胞培养液。其他与具体实施方式一相同。本实施方式中干细胞培养液为市售产品。本实施方式中压力介质为混合气体时，具体实施方式一步骤一中的载体为平皿；压力介质为干细胞培养液时，具体实施方式一步骤一中的载体为细胞悬浮培养微载体小球或细胞悬浮培养微载体圆片。具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：当压力介质为空气和二氧化碳的混合气体时，把干细胞接种到培养平板中并保证干细胞吸附在平皿内表面，把已经吸附在平皿内表面的干细胞放置在密封培养箱内；培养箱带有进气口和排气口，进气口与泵连通，排气口带有阀门。其他与具体实施方式一或二相同。具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：当压力介质为干细胞培养液时，干细胞吸附在载体表面的具体方法为：把细胞悬浮培养微载体小球或细胞悬浮培养微载体圆片放在平皿中，添加干细胞悬浮液使干细胞吸附在微载体表面，再转移到封闭的培养管中培养；培养管有管体与盖子两部分，两者通过螺旋密封连接，管体与盖子各有一个开孔用于干细胞培养液进出，用泵从进液口输入干细胞培养液，出液口设有阀门；细胞悬浮培养微载体小球或圆片由聚酯材料或聚醚材料制成。其他与具体实施方式一至三之一相同。具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是：当压力介质为干细胞培养液时，干细胞包裹到培养载体的方法为：采用琼脂糖凝胶或海藻酸钙凝胶包裹干细胞。其他与具体实施方式一至四之一相同。具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是：压力介质中二氧化碳的体积百分含量为5-20％。其他与具体实施方式一至五之一相同。具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一不同的是：压力介质中二氧化碳的体积百分含量为10％。其他与具体实施方式一至六之一相同。具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一不同的是：步骤二中封闭容器中压力升至100-180mmHg。其他与具体实施方式一至七之一相同。具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同的是：步骤三中封闭容器中压力降至60-100mmHg。其他与具体实施方式一至八之一相同。具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同的是：利用胰酶消化法分离回收干细胞。其他与具体实施方式一至八之一相同。采用以下实施例验证本专利技术的有益效果：实施例1：一、把干细胞接种到培养平板中并保证干细胞吸附在平皿内表面，把干细胞连同平皿一起置于培养箱中；培养箱带有进气口和排气口，进气口与泵连通，排气口带有阀门；二、向培养箱中注入空气与二氧化碳混合气体，二氧化碳体积终浓度为5％，使容器内压力达到120mmHg；三、通过调节阀门使容器释放部分气体，使容器内压力下降到80mmHg，相当于正常人体的舒张压；四、反复进行封闭容器内压力变化调节10000次，达到模拟人体的脉搏变化的效果；五、将耐压训练后的干细胞回收。本实施例培养箱的结构示意图如图1所示，其中1为阀门，2为泵，3为培养箱。测试本实施例干细胞进入血液后的成活率为45％，未经过耐压训练的干细胞进入血液后的成活率为30％，成活率提高15％。实施例2一、把细胞悬浮培养微载体小球放在平皿中，添加干细胞悬浮液使干细胞吸附在微载体表面，再转移到封闭的培养管中培养；培养管有管体与盖子两部分，两者通过螺旋密封连接，管体上开有出液口，出液口设有阀门，盖子上开有进液口，进液口与泵连通。二、向培养管中注入细胞培养液，使容器内压力达到120mmHg，相当于正常人体的收缩压，具体压力可以设定调整；三、通过调节阀门使容器释放部分液体，使容器内压力下降到80mmHg，相当于正常人体的舒张压，具体压力可以设定调整；四、反复进行封闭容器内压力变化调节10000次，达到模拟人体的脉搏变化的效果；五、将耐压训练后的干细胞回收。本实施例细胞悬浮培养微载体小球由聚醚材料制成。本实施例培养管的结构示意图如图2所示，其中1为阀门，2为泵，4为培养管的盖子，5为培养管管体。测试本实施例干细胞进入血液后的成活率为40％，未经过耐压训练的干细胞进入血液后的成活率为30％，成活率提高10％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种增强干细胞血液适应能力的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、把干细胞包裹到培养载体中或吸附在载体表面，然后置于封闭容器中；二、向步骤一的封闭容器中输入压力介质，使封闭容器内压力上升；三、释放部分压力介质，使封闭容器内压力下降；四、重复步骤二和步骤三的操作1‑10000次，然后回收干细胞，即完成增强干细胞血液适应能力的方法。

【技术特征摘要】
1.一种增强干细胞血液适应能力的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、把干细胞包裹到培养载体中或吸附在载体表面，然后置于封闭容器中；二、向步骤一的封闭容器中输入压力介质，使封闭容器内压力上升；三、释放部分压力介质，使封闭容器内压力下降；四、重复步骤二和步骤三的操作1-10000次，然后回收干细胞，即完成增强干细胞血液适应能力的方法。2.根据权利要求1所述的一种增强干细胞血液适应能力的方法，其特征在于压力介质为空气和二氧化碳的混合气体或干细胞培养液。3.根据权利要求2所述的一种增强干细胞血液适应能力的方法，其特征在于当压力介质为空气和二氧化碳的混合气体时，把干细胞接种到培养平板中并保证干细胞吸附在平皿内表面，把已经吸附在平皿内表面的干细胞放置在密封培养箱内；培养箱带有进气口和排气口，进气口与泵连通，排气口带有阀门。4.根据权利要求2所述的一种增强干细胞血液适应能力的方法，其特征在于当压力介质为干细胞培养液时，干细胞吸附在载体表面的具体方法为：把细胞悬浮培养微载体小球或细胞悬浮培养微载体圆片放在平皿中，添加干细胞悬浮液使干细胞吸附在微载...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子昂，刘宝全，竹添，张建，王姣，佟明斯，
申请(专利权)人：刘宝全，
类型：发明
国别省市：辽宁,21