一种用于检测HIV新发感染的重组抗原及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测HIV新发感染的重组抗原及其应用，涉及抗原制备技术领域，重组抗原包括B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、BC变异序列、AE变异序列、亲水性氨基酸核心序列以及抗原两端添加的赖氨酸序列，B氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，E氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，D氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，亲水性氨基酸核心序列如SEQ ID No.4所示，BC变异序列如SEQ ID No.5所示，AE变异序列如SEQ ID No.6所示。该重组抗原的可溶性高，易于纯化，易于标记，能避免或减少HIV检测新发感染时的假阳性反应和亚型遗漏引起的误判，提高检测的准确性。

A Recombinant Antigen for Detecting New HIV Infection and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测HIV新发感染的重组抗原及其应用
本专利技术涉及抗原制备
，具体而言，涉及一种用于检测HIV新发感染的重组抗原及其应用。
技术介绍
艾滋病(Humanimmunodeficiencyvirus，HIV)严重威胁人类健康，是全世界共同面临的重大公共卫生问题。联合国艾滋病规划署发布的《艾滋病疫情报告》显示，全球存活的艾滋病病毒感染者和病人已达3400万人，每年新发感染250万人，死亡170万人，艾滋病防治形势依然严峻。目前，艾滋病的感染人群呈多样化，性传播已经成为艾滋病传播的主要途径，同时静脉吸毒共用注射器，暗娼人群安全套使用率较低以及男同性行为等危险因素广泛存在，使得艾滋病防控工作仍面临巨大挑战。艾滋病病毒新发感染检测是艾滋病监测工作的重要内容，对于及时了解HIV传播动态，发现高危人群，评估防控效果具有重要意义。近年来，随着生物技术的发展，使得利用实验室方法判断新近感染，进而估算发病率成为研究热点。但目前用于艾滋病病毒新发感染检测的抗原研究的很少，假阳率高。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种用于检测HIV新发感染的重组抗原，该重组抗原的可溶性高，易于纯化，能够避免或减少HIV新发感染检测时出现的假阳性反应，提高检测的灵敏度和准确性。本专利技术的第二目的在于提供一种用于编码检测HIV新发感染的重组抗原的核酸分子，其能够编码一种适用于检测艾滋病病毒新发感染检测的重组抗原，且该重组抗原具有检测准确率高的优点。本专利技术的第三目的在于提供一种表达载体，其包括上述编码用于检测艾滋病病毒新发感染检测的重组抗原的核酸分子。本专利技术的第四目的在于提供一种表达菌株，其包括有上述用于检测艾滋病病毒新发感染检测的重组抗原的表达载体。本专利技术的第五目的在于提供一种用于检测HIV新发感染的检测试剂盒，该检测试剂盒能够精确检测艾滋病病毒新发感染。本专利技术是这样实现的：本专利技术实施例提供了一种用于检测HIV新发感染的重组抗原，其包括B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、BC变异序列、AE变异序列以及亲水性氨基酸核心序列，所述亲水性氨基酸核心序列设置于B、E、D氨基酸序列、BC以及AE变异序列之间；所述B氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，所述E氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，所述D氨基酸序列如SEQIDNo.3所示，所述亲水性氨基酸核心序列如SEQIDNo.4所示，所述BC变异序列如SEQIDNo.5所示，所述AE变异序列如SEQIDNo.6所示。本专利技术实施例还提供了一种用于编码上述用于检测HIV新发感染的重组抗原的核酸分子，该核酸分子包括有B核酸分子、E核酸分子、D核酸分子、BC核酸分子、AE核酸分子以及亲水核苷酸序列；所述B核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNo.8所示，E核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNo.9所示，D核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNo.10所示，亲水核苷酸序列如SEQIDNo.11所示，所述BC核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNo.12所示，所述AE核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNo.13所示。本专利技术实施例还提供了一种表达载体，其包括有上述核酸分子；优选地，所述表达载体为pET28a。本专利技术实施例还提供了一种表达菌株，其包括有上述表达载体；优选地，所述表达菌株为大肠杆菌表达菌株；优选地，所述表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3)。一种用于检测HIV新发感染的检测试剂盒，其包括上述的重组抗原或上述核酸分子。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术实施例提供了一种用于检测HIV新发感染的重组抗原，该重组抗原B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、BC变异序列、AE变异序列以及亲水性氨基酸核心序列，亲水性氨基酸核心序列设置于B、E、D氨基酸序列、BC以及AE变异序列之间；B氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，E氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，D氨基酸序列如SEQIDNo.3所示，亲水性氨基酸核心序列如SEQIDNo.4所示，BC变异序列如SEQIDNo.5所示，所述AE变异序列如SEQIDNo.6所示。该重组抗原的可溶性高，易于提纯，能够避免或减少HIV新发感染检测时的假阳性反应，提高检测的灵敏度和准确性。本专利技术实施例还包括有一种包括有上述用于检测HIV新发感染的重组抗原的核酸分子、包括该核酸分子的表达载体、包括该表达载体的表达菌株以及包括上述重组抗原或核酸分子的用于检测HIV新发感染的检测试剂盒，该检测试剂盒具有检测准确性高的优点。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例2中的HIV-Ag11表达菌株超声破碎后SDS-PAGE电泳图；图2为本专利技术实施例3中HIV-Ag11纯化后SDS-PAGE电泳图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例中的用于检测HIV新发感染的重组抗原及其应用进行具体说明。新发感染的实验室检测方法，根据检测的标志物不同可以分为多种方法。血清学阳转前的方法主要有病毒核酸(Ribonucleicacid,RNA)检测和p24抗原检测；血清学阳转后，根据检测原理不同，大致分为6类：抗体滴度检测、抗体亲和力检测、特异性抗体占总抗体的比例检测、p24抗原免疫球蛋白3抗体(ImmunoglobulinG3，IgG3)抗体检测、线性免疫印迹检测、抗特异性免疫抗原性反应检测。其中，按HIVgp41特异性抗体占总抗体比例的原理开发的HIV-1BED捕获EIA法(BED-CEIA)，简称BED法。现有用于BED法的成熟抗原为人工化学合成的多肽，具体为人工化学分别合成的B、E、D多肽，再用化学偶联法将3个多肽连接在一起，该多肽的制备工艺复杂、抗原得率低、成本高，且工艺不稳定、重复相差、批间差大，为抗原的应用推广带来了极大的困难。基因工程重组的BED抗原则溶解性差、标记困难、假阳率高，无法用于BED法试剂盒的开发。本专利技术实施例提供了一种用于检测HIV新发感染的重组抗原，其包括有B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、BC变异序列、AE变异序列以及亲水性氨基酸核心序列，所述亲水性氨基酸核心序列设置于B、E、D氨基酸序列、BC以及AE变异序列之间。B氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，所述E氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，所述D氨基酸序列如SEQIDNo.3所示，所述亲水性氨基酸核心序列如SEQIDNo.4所示，所述BC变异序列如SEQIDNo.5所示，所述AE变异序列如SEQIDNo.6所示。该重组抗原具有可溶性高，检测HIV新发感染假阳率低，易于提纯，加入了AE变异序列和BC变异序列的重组抗原适用于我国HIV新发感染的检测，具有检测准确性高的优点。进一步地，用于检测HIV新发感染的重组抗原序列的N端和C端均添加有用于提高抗原可标记本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测HIV新发感染的重组抗原，其特征在于，其包括B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、BC变异序列、AE变异序列以及亲水性氨基酸核心序列，所述亲水性氨基酸核心序列设置于B、E、D氨基酸序列、BC以及AE变异序列之间；所述B氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述E氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述D氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，所述亲水性氨基酸核心序列如SEQ ID No.4所示，所述BC变异序列如SEQ ID No.5所示，所述AE变异序列如SEQ ID No.6所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测HIV新发感染的重组抗原，其特征在于，其包括B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、BC变异序列、AE变异序列以及亲水性氨基酸核心序列，所述亲水性氨基酸核心序列设置于B、E、D氨基酸序列、BC以及AE变异序列之间；所述B氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，所述E氨基酸序列如SEQIDNo.2所示，所述D氨基酸序列如SEQIDNo.3所示，所述亲水性氨基酸核心序列如SEQIDNo.4所示，所述BC变异序列如SEQIDNo.5所示，所述AE变异序列如SEQIDNo.6所示。2.根据权利要求1所述的用于检测HIV新发感染的重组抗原，其特征在于，所述用于检测HIV新发感染的重组抗原序列的N端和C端均添加有用于提高抗原可标记性的赖氨酸序列。3.根据权利要求1所述的用于检测HIV新发感染的重组抗原，其特征在于，在所述重组抗原的序列中，所述B氨基酸序列、E氨基酸序列、D氨基酸序列、所述BC变异序列和AE变异序列依次从重组抗原的N端到C端依次排列。4.根据权利要求2所述的用于检测HIV新发感染的重组抗原，其特征在于，所述重组抗原的序列如SEQIDNo.7所示。5.一种用于编码权利要求1～4任一项所述的用于检测HIV...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兴旺，孟婷婷，
申请(专利权)人：北京新创生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11