一种平菇固体液化菌种的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种固体培养料，其原料组成为：木屑粉1％～20％，玉米芯粉1％～30％，淀粉40～80％，玉米粉10～30％；料水比为1：0.8～1.5。本发明专利技术还公开了一种平菇固体液化菌种的制备方法，包括将经匀浆处理的平菇母种加入到固体培养料中进行培养，得固体菌种；然后将固体菌种用无菌水进行匀浆处理，再用无菌水稀释20‑30倍，即得平菇固体液化菌种。本发明专利技术固体培养料以易被菌丝分解的淀粉和玉米粉为主，无需过滤，适于制备固体液化菌种；用本发明专利技术方法制种时间短；菌液渗透性好且生长均匀；菌丝活性高且生长速度快；菌种污染率低，可长途运输；本发明专利技术菌种制备只需三角瓶、玻璃瓶等设备，操作简单且成本低，无需专门培训。

Preparation of a solid liquefaction strain of Pleurotus ostreatus

【技术实现步骤摘要】
一种平菇固体液化菌种的制备方法
本专利技术属于食用菌栽培领域，具体涉及一种用于制备平菇固体液化菌种的固体培养料；还涉及一种平菇固体液化菌种的制备方法。
技术介绍
平菇曾是我国年产量第一的食用菌，但是由于销售价格和耐贮性等不如香菇和黑木耳，故近几年平菇的年产量下滑至第三位。我国消费者要求平菇子实体盖大、柄短，而要满足这一需求，必须在出菇时二氧化碳浓度低，即环境通风好，而工厂化栽培很难满足这一要求，因此，我国的平菇栽培几乎全部是农业式栽培。我国的平菇栽培以固体菌种为主，但是用固体菌种存在生产周期长、菌龄不一致、出菇不整齐、管理不便和生产成本高等缺点，因此，亟待用其他菌种取代固体菌种。利用发酵罐生产的液体菌种由于具有生产周期短、菌丝生长快、菌龄一致、出菇整齐等优点等受到越来越多的重视，但是液体菌种存在如下缺点：(1)一次性投入大，对设备要求高；(2)操作难度较高，需要专门培训；(3)在液体中透气性差，菌丝易因缺氧而衰老，故液体菌种保存期短；(4)液体培养基营养丰富，易受到杂菌污染，污染率高；(5)液体菌种运输不便，因此只能在当地生产，当时使用；(6)液体菌种质量检测难，需要一定的检测设备；(7)生产规模要大，只适于集约化、工厂化大规模生产；(8)一个发酵罐每次只能培养一个品种，如果同时栽培多品种，则要多投入发酵罐，或者错时生产；(9)生产成本高。上述缺点限制了液体菌种在平菇农业式栽培上的应用。针对发酵罐制作液体菌种时存在的缺点，日本起源生物技术株式会社等开发出“还原型液体菌种”，即将发酵罐培养的菌丝体浓缩后装入无菌保鲜盒，在无菌条件下打碎纯菌丝体，再用无菌水稀释而成，稀释后即刻使用，不需要进行培养。但是此种方法存在如下缺点：发酵罐培养的菌丝体，分泌的酶通常为胞外酶，存在于培养液中，菌丝体经过浓缩后，胞外酶绝大部分丢失；另外菌丝体菌种被打碎后，菌丝受伤，打碎后直接接种，料面菌丝萌发的时间要比发酵罐菌种慢至少2-3天，这样对培养室环境就有很高的要求；另外，纯菌丝体菌种必需从专业的食用菌公司购买。这些缺点对液体菌种在平菇农业式栽培上的应用仍然构成较大的限制。专利《食用菌固体液化菌种的制作方法》(CN104718996A)公开了一种制备制备固体液化菌种的方法，但是其存在如下缺点：(1)该专利技术固体培养料中锯末为60-70％，锯末的质地硬且比例比较高，不能被菌丝彻底分解，粉碎后会产生大量不可溶解的残渣，稀释后只能采取逐个倒入菌包的方法进行接种，这样接种效率会非常低；(2)固体菌种粉碎过程中会产生热量，菌种会因被烧死造成损失；而且固体菌丝含水量超过60％，也不能粉碎太细；(3)粉碎后用100目筛过滤，100目的孔径为0.15mm，这种孔径下菌丝是很难过滤的；(4)由于锯末的吸附效应，大量菌丝会吸附在过滤的残渣上而被丢掉造成损失；(5)食用菌菌丝很难利用培养料中的锯末，导致这种固体液化菌种制作时间长达20-30天，菌龄长的菌种老化厉害，且菌种上下不均匀。
技术实现思路
针对用液体菌种栽培平菇时存在的资金投入高、操作复杂、易污染等问题，本专利技术目的在于提供一种用于制备平菇固体液化菌种的固体培养料。本专利技术另一目的在于提供上述固体培养料的制备方法。本专利技术第三目的在于提供一种平菇固体液化菌种的制备方法。为了达到如上目的，本专利技术采取如下技术方案：本专利技术一种用于制备平菇固体液化菌种的固体培养料，其原料组成成分及其重量百分比为：木屑粉1％～20％，玉米芯粉1％～30％，淀粉40～80％，玉米粉10～30％；料水比为1：0.8～1.5。上述固体培养料，其原料组成成分及其重量百分比优选为：木屑粉1％～5％，玉米芯粉1％～5％，淀粉60％～80％，玉米粉20％～30％；料水比为1：0.8～0，9。上述固体培养料，其原料组成成分及其重量百分比优选为：木屑粉1％，玉米芯粉1％，淀粉78％，玉米粉20％；料水比为1：0.8。上述固体培养料的制备方法，包括按照比例将木屑粉、玉米芯粉、淀粉和玉米粉混合均匀，然后按照料水比加水，并混合均匀；再在126℃下灭菌30min，即得固体培养料。本专利技术还提供了一种平菇固体液化菌种的制备方法，包括如下步骤：(1)固体培养料的制备：按照如下重量百分比比例称取木屑粉1％～20％，玉米芯粉1％～30％，淀粉40～80％，玉米粉10～30％，然后将它们混合均匀；再按照料水比为1：0.8～1.5的比例加入水，混合均匀，得固体培养料；取固体培养料200～300g，装入规格为1L的三角瓶中，用硅胶塞封口；将三角瓶在126℃下灭菌30min，然后在洁净处趁热摇散，冷却至室温；(2)在无菌条件下，取一个直径为9cm的平菇母种平板，将平板上的全部菌丝和琼脂块转入规格为250ml的三角瓶中，加入无菌水90～110g，匀浆处理，得匀浆液；(3)在无菌条件下，按照每千克培养料加入匀浆液100～150ml的比例将步骤(2)中所得匀浆液加入步骤(1)的三角瓶中，摇匀；然后在23～28℃、黑暗条件下培养8～10天，得固体菌种；(4)在无菌条件下，向步骤(3)的装有固体菌种的三角瓶中加入无菌水，加入无菌水的量为高出固体菌种表面2～3cm；将固体菌种进行匀浆，得菌种浆液；(5)对所得菌种浆液进行细菌污染检测，检测结果呈现菌液澄清透明的，即为没有被细菌污染的合格的菌种浆液；(6)无菌条件下，将细菌检测合格的步骤(4)的菌种浆液加入到装有无菌水的容器中，用无菌水稀释20～50倍，并在容器中加入1-2个磁力搅拌子，然后在121℃下灭菌30min，冷却；同时用磁力搅拌器搅拌菌液，以使菌液均匀，即得平菇固体液化菌种。上述制备方法，其步骤(1)中所述固体培养料的原料组成成分及其重量百分比优选为：木屑粉1％～5％，玉米芯粉1％～5％，淀粉60％～80％，玉米粉20％～30％；料水比为1：0.8～0，9。上述制备方法，其步骤(1)中所述固体培养料的原料组成成分及其重量百分比优选为：木屑粉1％，玉米芯粉1％，淀粉78％，玉米粉20％；料水比为1：0.8。上述制备方法步骤(5)中所述的细菌污染检测，按照如下方法进行：取菌种浆液1～2ml接种至100ml细菌检测培养基中，在37℃下培养24h；检测结果呈现菌液澄清透明的，即为没有被细菌污染的合格的菌种浆液。所述的细菌检测培养基的组成成分及其比例为：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000ml。所述的细菌检测培养基按照常规方法制备。上述制备方法步骤(6)中所述的容器是指小口带盖的不锈钢桶或玻璃瓶。与现有技术相比，本专利技术具有的优点和有益效果：(1)本专利技术固体培养料以淀粉和玉米粉为主，它们能够短时间内被菌丝彻底分解而无残留，适合用于制备固体液化菌种；而现有的固体培养料多以锯末和玉米芯粉等木质纤维素多的材料为主，不易被菌丝分解，会产生大量残渣，不适于用于制备固体液化菌种。另外，本专利技术固体培养料中有少量木屑粉和玉米芯粉，它们能诱导菌丝分泌分解木质纤维素所需要的酶类(如漆酶)，木屑粉和玉米芯粉量少而且细，所得菌种浆液不需要过滤，直接用无菌水稀释即可。(2)采用固体培养时透气性好，菌丝活性比用发酵罐液体培养时高。(3)本专利技术液化菌种直接由固体菌种液化而来，固体培养基中的酶活性保持较好，匀浆处理后渗透性好，萌发点多，故接种后菌种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于制备平菇固体液化菌种的固体培养料，其特征在于其原料组成成分及其重量百分比为：木屑粉1％～20％，玉米芯粉1％～30％，淀粉40～80％，玉米粉10～30％；料水比为1：0.8～1.5。

【技术特征摘要】
1.一种用于制备平菇固体液化菌种的固体培养料，其特征在于其原料组成成分及其重量百分比为：木屑粉1％～20％，玉米芯粉1％～30％，淀粉40～80％，玉米粉10～30％；料水比为1：0.8～1.5。2.根据权利要求1所述的固体培养料，其特征在于其原料组成成分及其重量百分比为：木屑粉1％～5％，玉米芯粉1％～5％，淀粉60％～80％，玉米粉20％～30％；料水比为1：0.8～0，9。3.根据权利要求1所述的固体培养料，其特征在于其原料组成成分及其重量百分比为：木屑粉1％，玉米芯粉1％，淀粉78％，玉米粉20％；料水比为1：0.8。4.权利要求1-3所述的固体培养料的制备方法，其特征在于包括按照比例将木屑粉、玉米芯粉、淀粉和玉米粉混合均匀，然后按照料水比加水，并混合均匀；再在126℃下灭菌30min，即得固体培养料。5.一种平菇固体液化菌种的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)固体培养料的制备：按照如下重量百分比比例称取木屑粉1％～20％，玉米芯粉1％～30％，淀粉40～80％，玉米粉10～30％，然后将它们混合均匀；再按照料水比为1：0.8～1.5的比例加入水，混合均匀，得固体培养料；取固体培养料200～300g，装入规格为1L的三角瓶中，用硅胶塞封口；将三角瓶在126℃下灭菌30min，然后在洁净处趁热摇散，冷却至室温；(2)在无菌条件下，取一个直径为9cm的平菇母种平板，将平板上的全部菌丝和琼脂块转入规格为250ml的三角瓶中，加入无菌水90～110g，匀浆处理，得匀浆液；(3)在无菌条件下，按照每千克培养料加入匀浆液100～150ml的比例将步骤(2)中所得匀浆液加入步骤(1)的三角瓶中...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹亚杰，努尔孜亚，陈强，黄晨阳，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11