微生物侦测试片与使用其之侦测方法技术

一种微生物侦测试片，包括：一多孔性基底，其表面具有一第一颜色；以及一微生物侦测组成物，其至少粘附于该多孔性基底之表面之一部分或至少粘附于该多孔性基底之表面与内部之一部分。该微生物侦测组成物包括：复数个有色颗粒，其具有与第一颜色不同之一第二颜色；以及复数条特异性肽，其系固定于该复数个有色颗粒之表面上，其中该复数条特异性肽使该复数个有色颗粒互相连结，进而使该复数个有色颗粒聚集而遮盖该多孔性基底之表面之该部分，并呈现该第二颜色于该多孔性基底之表面之该部分上。此外，特异性肽系针对一特定微生物所设计，而该特定微生物具有切断该特异性肽之能力。

Microbial Detection Test Film and Its Detection Method

【技术实现步骤摘要】
微生物侦测试片与使用其之侦测方法
本专利技术系关于微生物之侦测，特别是关于微生物侦测试片与微生物侦测方法。
技术介绍
传统的微生物检测方式多需利用培养、生化检测、镜检等方式来进行，耗时费力，加以检验样品一般需要前处理步骤，而繁琐的操作步骤不容易达到随时监控环境中微生物的状态。特别是，为了控管食品品质，现下已发展出如生物感测器等仪器设备，以进行食品微生物的即时监控与检测，然而在多数情况下，仪器设备之应用只能采抽检的方式进行，并无法全面顾及所有产品的品质，加以设备成本高，致使仪器设备之实际应用无法普及化。因此，极需发展一简易、有效、且低成本的微生物检测法。
技术实现思路
本专利技术提供一种微生物侦测试片，包括：一多孔性基底，其表面具有一第一颜色；以及一微生物侦测组成物，其至少粘附于该多孔性基底之表面之一部分或至少粘附于该多孔性基底之表面与内部之一部分。该微生物侦测组成物包括：复数个有色颗粒，其具有与该第一颜色不同之一第二颜色；以及复数条特异性肽，其系固定于该复数个有色颗粒之表面上，其中该复数条特异性肽使该复数个有色颗粒互相连结，进而使该复数个有色颗粒聚集而遮盖该多孔性基底之表面之该部分并呈现该第二颜色于该多孔性基底之表面之该部分上。此外，特异性肽系针对一特定微生物所设计，而该特定微生物具有切断该特异性肽之能力。本专利技术也提供一种微生物侦测方法，包括：将一待测样本与上述之微生物侦测试片接触；于该待测样本与该微生物侦测试片接触完成后，确认该微生物侦测试片之颜色变化。当该待测样本包含该特定微生物时，该特定微生物会切断该特异性肽而使该复数个有色颗粒不再聚集，进而使该复数个有色颗粒所聚集呈现之第二颜色变淡及/或使该多孔性基底之表面之该部分露出而呈现该第一颜色。为了让本专利技术之上述和其他目的、特征、和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合所附图示，作详细说明如下：附图说明第1A图显示，本专利技术之微生物侦测试片100的上视图。第1B图显示，在一实施例中本专利技术之微生物侦测试片100之结构的剖面图。第1C图显示，在另一实施例中本专利技术之微生物侦测试片100之结构的剖面图。第2图显示，于微生物侦测组成物中，复数个有色颗粒藉由复数条特异性肽而相互连结的示意图。第3图系第1B图所示之本专利技术之微生物侦测试片100之一形成方式的一实施例的示意图。第4A-4C图系第1C图所示之本专利技术之微生物侦测试片100之形成方式之不同实施例的示意图。第5图显示，以本专利技术之微生物侦测方法检测待测样本中之特定微生物的示意图。第6图显示，将影印纸、滤纸、硝化纤维薄膜与PVDF薄膜分别滴上磁珠悬浮液的结果。第7图显示，以实施例3所记载之两种方法所分别获得之试片的扫描式电子显微镜(scanningelectronmicroscope,SEM)分析的结果。第8A图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K(proteinaseK)处理之包含固定有α1-23员肽之磁珠之试片的照片。第8B图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之包含固定有未经修饰之α1-23员肽之磁珠之试片的肽分解程度(digestionlevel)。第9A图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶(trypsin)处理之包含固定有β2-23员肽之磁珠之试片的照片。第9B图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之包含固定有β2-23员肽之磁珠之试片的肽分解程度。第10A图显示，于乳酸菌试验中，以不同乳酸菌处理之包含固定有α1-23员肽之磁珠之试片的照片。第10B图显示，于乳酸菌试验中，以不同乳酸菌处理之包含固定有未经修饰之α1-23员肽之磁珠之试片的脱附程度。第11A图显示，于乳酸菌试验中，以不同乳酸菌处理之包含固定有β2-23员肽之磁珠之试片的照片。第11B图显示，于乳酸菌试验中，以不同乳酸菌处理之包含固定有未经修饰之β2-23员肽之磁珠之试片的脱附程度。第12A图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第12B图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的肽分解程度。第12C图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的磁珠覆盖处之面积变化。第12D图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的脱附程度。第13A图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第13B图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的肽分解程度。第13C图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的磁珠覆盖处之面积变化。第13D图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的脱附程度。第14图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法B中所制备之包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第15图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之以实施例3之方法B中所制备之包含固定有β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第16A图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有α1-35员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第16B图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有α1-35员-NH2肽之磁珠之试片的脱附程度。第17A图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之胰蛋白酶处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有β2-35员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第17B图显示，于酵素分解试验中，以不同稀释倍率之蛋白酶K处理之以实施例3之方法A中之3.1.2所制备之包含固定有β2-35员-NH2肽之磁珠之试片的脱附程度。第18A图显示，于低温下的乳酸菌试验中，包含固定有α1-23员-NH2肽或β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第18B图显示，于低温下的乳酸菌试验中，包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的脱附程度。第18C图显示，于低温下的乳酸菌试验中，包含固定有β2-23员-NH2肽之磁珠之试片的脱附程度。第19A图显示，于试片之胚芽乳酸杆菌(Lactobacillusplantarum)之最低可侦测菌量的确认测试中，包含固定有α1-23员-NH2肽之磁珠之试片的照片。第19B图显示，于试片之胚芽乳酸杆菌之最低可侦测菌量的确认测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生物侦测试片，包括：多孔性基底，其表面具有第一颜色；以及微生物侦测组成物，其至少粘附于该多孔性基底之表面之一部分或至少粘附于该多孔性基底之表面与内部之一部分，包括：复数个有色颗粒，其具有与该第一颜色不同之第二颜色；以及复数条特异性肽，其系固定于该复数个有色颗粒之表面上，其中该复数条特异性肽使该复数个有色颗粒互相连结，进而使该复数个有色颗粒聚集而遮盖该多孔性基底之表面之该部分，并呈现该第二颜色于该多孔性基底之表面之该部分上；其中，该特异性肽系针对特定微生物所设计，而该特定微生物具有切断该特异性肽之能力。

【技术特征摘要】
2017.12.20 US 62/608,1771.一种微生物侦测试片，包括：多孔性基底，其表面具有第一颜色；以及微生物侦测组成物，其至少粘附于该多孔性基底之表面之一部分或至少粘附于该多孔性基底之表面与内部之一部分，包括：复数个有色颗粒，其具有与该第一颜色不同之第二颜色；以及复数条特异性肽，其系固定于该复数个有色颗粒之表面上，其中该复数条特异性肽使该复数个有色颗粒互相连结，进而使该复数个有色颗粒聚集而遮盖该多孔性基底之表面之该部分，并呈现该第二颜色于该多孔性基底之表面之该部分上；其中，该特异性肽系针对特定微生物所设计，而该特定微生物具有切断该特异性肽之能力。2.如权利要求1所述之微生物侦测试片，其中该多孔性基底之材料包括天然纤维材料或人造纤维材料。3.如权利要求2所述之微生物侦测试片，其中该天然纤维材料包括纸、棉、麻或丝。4.如权利要求2所述之微生物侦测试片，其中该人造纤维材料包括硝化纤维(nitrocellulose)、醋酸纤维(celluloseacetate)、聚酯纤维(polyester)或前述之组合。5.如权利要求1所述之微生物侦测试片，其中该有色颗粒的材料包括磁性物质、玻璃、高分子材料、塑胶、纳米粒子或前述之组合。6.如权利要求1所述之微生物侦测试片，其中该有色颗粒之表面修饰有至少一官能基。7.如权利要求6所述之微生物侦测试片，其中该至少一官能基包括-COOH、-NH2或-SH。8.如权利要求1所述之微生物侦测试片，其中该特异性肽的长度为10-200个氨基酸。9.如权利要求1所述之微生物侦测试片，其中该特异性肽之N端与C端分别修饰有第一官能基与第二官能基，其中该第一官能基与该第二官能基系为同质性官能基。10.如权利要求9所述之微生物侦测试片，其中该第一官能基与该第二官能基独立地包括-NH2、-COOH、生物素(biotin)或-SH。11.如权利要求1所述之微生物侦测试片，其中该特定微生物包括细菌或真菌。12.如权利要求11所述之微生物侦测试片，其中该细菌包括乳酸菌、大肠杆菌(Escherichiacoli)、沙门氏菌属(Salmonella)之细菌、金黄葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、李斯特菌属(Listeria)之细菌、志贺氏杆菌(Shigella)属之细菌。13.如权利要求12所述之微生物侦测试片，其中该乳酸菌包括洛德因乳酸杆菌(Lactobacillusreuteri)、戊糖乳酸杆菌(Lactobacilluspentos...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘振凰，唐嘉英，江佩馨，
申请(专利权)人：财团法人工业技术研究院，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71