重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组酶介导等温扩增‑侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测橡树疫霉的具体方法为：1)提取待测样本DNA；2)以DNA为模板，进行RPA扩增；3)应用LFD进行扩增产物检测；当试纸条出现两条棕色条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有橡树疫霉；当试纸条只有质控区出现一条棕色条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有橡树疫霉。本发明专利技术所使用的引物及探针组合用于RPA‑LFD特异性强，灵敏度高，为橡树疫霉的检测提供了新的技术平台。

Recombinant Enzyme-mediated Isothermal Amplification-Side Flow Chromatography for Detection of Phytophthora Oak Primers and Probes and Their Applications

【技术实现步骤摘要】
重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及重组酶介导等温扩增-侧流层析技术(RPA-LFD)检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用。
技术介绍
橡树疫霉(Phytophthoraramorum)引起的橡树猝死病曾经引起美国西海岸橡树的成片猝死，其寄主广泛在加利福尼亚一些沿海地区，80％以上的栎属植物感病死亡，该病可在几周内将成材树危害致死。目前对该病害还没有有效的防治措施，加强检疫，防止病原菌的传播扩散是控制该病的最有效措施。南朝鲜、加拿大等国已禁止从美国加利福尼亚州、德国、荷兰等疫区进口各种栎属、石栎属、杜鹃花属、越桔属等的苗木、树皮、带皮原木、林地覆盖物、木屑、橡子、薪材、纸浆原材、果实等繁殖和非繁殖材料。该病原菌的研究处于起步阶段，为此应加强疫情监测，建立快速检测方法，为病害的风险及研究决策提供依据，从而有利于降低橡树疫病引起的损失。目前橡树疫霉(P.ramorum)检测的主要方法有：发病组织病原菌的分离、PCR检测法、Real-timePCR检测法、杂交阵列技术(DNAmicroarrayandmacroarray本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组酶介导等温扩增‑侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合，其特征在于，其正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示，探针序列如SEQ ID No.3所示。

【技术特征摘要】
1.一种重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合，其特征在于，其正向引物序列如SEQIDNo.1所示，反向引物序列如SEQIDNo.2所示，探针序列如SEQIDNo.3所示。2.权利要求1所述的引物和探针组合在检测橡树疫霉中的应用。3.权利要求1所述的引物和探针组合在制备橡树疫霉的检测试剂或试剂盒中的应用。4.一种重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的试剂盒，其特征在于，至少包括1次用量以上的引物和探针组合，所述引物和探针组合，其正向引物序列如SEQIDNo.1所示，反向引物序列如SEQIDNo.2所示，探针序列如SEQIDNo.3所示。5.权利要求4所述检测橡树疫霉的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：装有冻干酶粉的...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴婷婷，焦彬彬，徐月，胡涛，廖婷婷，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32