粪肠球菌、其培养基及牛奶中抗生素残留的检测方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种粪肠球菌，于2016年2月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12088。并公开了其在筛检牛奶中残留四环素、红霉素、青霉素、庆大霉素、万古霉素、氯霉素的所用的培养基，并公开了具体的检测方法。本发明专利技术方法的筛检方法操作简单，可直接通过观察培养基凝固或指示剂变色判读结果，不需特殊精密仪器，可同时检测多种抗生素残留，适合食品中抗生素残留筛查，实用性强。

Detection and application of antibiotic residues in Enterococcus faecalis, its culture medium and milk

【技术实现步骤摘要】
粪肠球菌、其培养基及牛奶中抗生素残留的检测方法及应用
本专利技术属于于生命科学和食品安全领域，更具体的涉及一种粪肠球菌及利用该菌株快速检测牛奶中残留抗生素的方法。
技术介绍
牛奶中抗生素残留是牛奶安全的一个重要问题。随着畜牧养殖业的迅速发展，奶产量大幅度提高。为预防和治疗乳房炎等疾病，抗生素类兽药在畜牧业的应用日益广泛，在应用抗生素治疗奶牛疾病在取得效果的同时，不规范使用抗生素，如加大使用剂量、延长治疗期，甚至给泌乳期奶牛长期应用抗生素预防疾病的行为，使得牛奶中往往残留有较高含量的抗生素。我国许多乳制品不符合需进口国家和地区的要求，其中抗生素残留超标是重要限制因素。牛奶中抗生素残留不仅给牛奶生产及相关产业带来损失，同时也对消费者的身体健康带来诸多潜在的危害。随着人民生活水平的提高和对生物安全和食品安全的重视，抗生素残留已成为牛奶食品安全关注的重点。为适应国内外日益严格的食品质量要求，满足市场和进出口快速通关的需要，建立一种简单、快速、有效检测牛奶中多种抗生素残留的方法具有重要意义。有关文献或方法中多种抗生素药物残留的检测方法基本上是对每一类药物进行分别检测，分析方法包括色谱法、色/质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种粪肠球菌，于2016年2月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12088。

【技术特征摘要】
1.一种粪肠球菌，于2016年2月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.12088。2.权利要求1所述的粪肠球菌在筛检牛奶中残留四环素、红霉素、青霉素、庆大霉素、万古霉素、氯霉素中的应用。3.权利要求1所述的粪肠球菌在筛检牛奶中残留四环素、红霉素、青霉素、庆大霉素、万古霉素、氯霉素中的培养基配方，其配制步骤为：配制配方1：蛋白胨30g，酵母提取物30g，牛肉浸膏10g，可溶性淀粉1.0g，葡萄糖40g，氯化钠10g，K2HPO46g，KH2PO46g，用1000mL蒸馏水溶解，调节pH至7.0-7.5，包装后121℃高压灭菌20-30分钟，冷却后置4℃保存、备用；配制配方2：称取优质黄豆粉200g，溶解于1000mL蒸馏水中，加热煮沸30分钟后，用多层纱布及定性滤纸过滤；配制配方3：取150mL按配方2配制的滤液，加入50mL按配方1配制的液体，调节pH至7.0-7.2，121℃高压灭菌20-30分钟，冷却后置4℃保存、备用。4.一种牛奶中残留四环素、红霉素、青霉素、庆大霉素、万古霉素、氯霉素中的检测方法，包括以下步骤：(1)菌株活化：将权利要求1所述的粪肠球菌菌株接种于LB固体培养基，40℃-42℃培养18-24h；(2)菌悬液制备：取步骤(1)所得的粪肠球菌单个菌落，用无菌生理盐水，调节OD600nm为0.10-0.12的菌悬液；吸取0.1ml菌悬液加入到按配方3配制的9.9ml培养基中，42℃培养过夜，过夜培养物置于4℃保存；(3)取过夜培养物，用无菌生理盐水配制成1:10的工作用菌悬液，临用新配；(4)标准管制备：取四环素、红霉素、青霉素、庆大霉素、万古霉素、氯霉素标准储备液，用pH8.0磷酸盐缓冲液稀释配制成不同浓度的抗生素标准工作液；四环素300μg/L、200μg/L、100μg/L、50μg...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜季梅，刘佳明，楼永良，叶盛，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33