一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5,8过氧化物中的应用制造技术

本发明专利技术提出了一种利用烟草内生真菌制备麦角甾醇5,8过氧化物的制备方法：无菌条件下将TE‑3菌丝体转接于内装有已灭菌的液体PDB培养基中；静置发酵，过滤分离发酵液与菌丝体；发酵液以乙酸乙酯萃取3次，合并减压浓缩得浓缩液A；菌丝体丙酮超声提取3次，减压浓缩后以乙酸乙酯萃取3次，合并后得浓缩液B；合并A和B，得发酵物浸膏；加入硅胶拌样，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1进行硅胶柱层析；采用凝胶柱层析分离得到麦角甾醇5，8过氧化物的纯品，该菌株TE‑3为芦竹节菱孢Arthrinium arundinis TE‑3。该制备方法适宜于工业大规模培养，并且产率高，易于分离纯化；发酵培养基成本低，制备简单，可实现工业规模生产，为角甾醇5，8过氧化物的研究应用、工业化生产提供了药源。

A Tobacco Endophytic Fungus and its application in the preparation of ergosterol 5,8 peroxide

【技术实现步骤摘要】
一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5,8过氧化物中的应用
本专利技术涉及一种烟草内生真菌及其在制备麦角甾醇5，8过氧化物中的应用，属于微生物

技术介绍
麦角甾醇(ergosterol)，又称麦角固醇，大量存在于酵母菌、霉菌等真菌和某些植物中，是一种重要的植物甾醇，具有重要的生理作用，可以增强人体抵抗疾病的能力，是重要的脂溶性维生素D2源，具有显著的抗菌、抗肿瘤功效。麦角甾醇也是一种食品、饲料及医药等工业中常用的化工原料，可用于可的松、激素黄体酮等药物的生产。麦角甾醇5，8过氧化物是麦角甾醇的C5、C8位发生氧化形成过氧桥的衍生物，是一类较少见的甾醇，多见于一些海洋低等生物中，少见于一些真菌类生物，偶见于高等植物。该化合物是近年来发现的一个热点分子，文献报道该化合物具有促进肿瘤细胞凋亡、抗炎、抗氧化、抑菌等广泛药理作用。特别是在抗肿瘤活性方面，已被证实能诱导人卵巢癌SKOV3、肝癌HepG2等细胞凋亡并对耐药性癌细胞表现出抑制活性。因此，该化合物具有成为新型抗肿瘤药物先导化合物的潜力，具有较高的研究价值和应用价值。目前，麦角甾醇5，8过氧化物的市场价格约为30万元/克，随着研本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种应用于制备麦角甾醇5，8过氧化物的烟草内生真菌，其特征在于：所述烟草内生真菌分类命名为芦竹节菱孢(Arthrinium arundinis TE‑3)，已于2017年10月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC No.14792。

【技术特征摘要】
1.一种应用于制备麦角甾醇5，8过氧化物的烟草内生真菌，其特征在于：所述烟草内生真菌分类命名为芦竹节菱孢(ArthriniumarundinisTE-3)，已于2017年10月31日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCCNo.14792。2.一种利用权利要求1所述烟草内生真菌制备麦角甾醇5，8过氧化物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)无菌条件下，挑取适量斜面培养3天的所述菌株TE-3；(2)无菌条件下，将该TE-3菌丝体转接于事先内装有已灭菌的300mL液体PDB培养基的1000mL三角烧瓶中；(3)将三角烧瓶于28℃下静置发酵培养30天，发酵完毕后过滤使发酵液与菌丝体分离；发酵液连续用等体积乙酸乙酯萃取3次，合并3次萃取液，减压浓缩得浓缩液A；菌丝体连续以3倍量80％丙酮超声提取3次，合并3次丙酮提取液...

【专利技术属性】
技术研发人员：张鹏，袁晓龙，李盼盼，张忠锋，杜咏梅，刘新民，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37