一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用，所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗包括铁蛋白纳米颗粒载体蛋白、表面抗原和内腔抗原，所述表面抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的表面，内腔抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的内部空腔。本发明专利技术所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗结构模拟了流感病毒的天然空间构象，呈现了多种流感病毒抗原，能同时发挥多种流感病毒抗原的免疫原性，激发更全面的免疫效应，提供更广谱的抗流感病毒的免疫保护效果。同时，本发明专利技术所述铁蛋白载体在人及哺乳动物等生物机体内广泛存在，用作疫苗载体理论上具有很好的安全性，有在老人及小孩中适用的可能性。

【技术实现步骤摘要】
一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药
，涉及一种流感疫苗及其制备方法和应用，尤其涉及一种多抗原仿生流感疫苗及其制备方法和应用，主要涉及一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗及其制备方法和应用，具体涉及一种将衍生自流感病毒的抗原蛋白分别负载于铁蛋白纳米颗粒的外表面和装载于铁蛋白纳米颗粒中空腔室内部，模拟流感病毒天然结构的流感疫苗及其制备方法和应用。
技术介绍
作为最严重的传染病之一，流感的预防却一直是困扰人类的一大难题。目前，防治流感最为有效的措施仍然是接种流感疫苗。市场上现行的多价流感疫苗，均是针对流感病毒的两种表面抗原血凝集素(hemagglutinin，HA)和神经氨酸酶(neuraminidase，NA)，具有很好的安全性及抗原性，但有效性却受到极大限制。这是由于流感病毒的HA及NA抗原极易发生抗原漂变，使得流感病毒极易发生变异，给每年流感流行毒株的预测和流感疫苗的研制带来极大困难。因此，研发和制备具有广谱抗性的对多种不同的流行毒株均具有有效抗性的通用流感疫苗则尤为迫切。利用各毒株间的保守肽或优势表位，通过强免疫原性载体的免疫增强作用，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗包括铁蛋白纳米颗粒载体蛋白、表面抗原和内腔抗原，所述表面抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的表面，内腔抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的内部空腔。

【技术特征摘要】
1.一种基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述基于铁蛋白的多抗原通用流感疫苗包括铁蛋白纳米颗粒载体蛋白、表面抗原和内腔抗原，所述表面抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的表面，内腔抗原分布于铁蛋白纳米颗粒的内部空腔。2.根据权利要求1所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述铁蛋白为去铁铁蛋白；优选地，所述铁蛋白纳米颗粒载体蛋白包括全长或部分截短的铁蛋白，优选为全长铁蛋白纳米颗粒；优选地，所述部分截短的铁蛋白纳米颗粒为从N端第5个氨基酸起163个氨基酸的铁蛋白截短体。3.根据权利要求1或2所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述铁蛋白纳米颗粒载体蛋白包括哺乳动物来源的铁蛋白、两栖类动物来源的铁蛋白、细菌来源的铁蛋白或植物来源的铁蛋白中的任意一种或至少两种的组合，优选为哺乳动物来源的铁蛋白或细菌来源的铁蛋白；优选地，所述哺乳动物来源的铁蛋白包括人源性铁蛋白、鼠源性铁蛋白或马脾脏铁蛋白中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述细菌来源的铁蛋白包括幽门螺杆菌铁蛋白或大肠杆菌铁蛋白；优选地，所述铁蛋白纳米颗粒载体蛋白的来源包括天然提取产物、人工合成产物或基因工程技术产物中的任一种或至少两种的组合；优选地，所述铁蛋白包括突变氨基酸序列；优选地，所述表面抗原包括HA抗原、M2e抗原或NA抗原中的任一种或至少两种的组合，优选为HA抗原或M2e抗原中的任一种或两种的组合，进一步优选为HA和M2e的组合。4.根据权利要求1-3任一项所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述内腔抗原包括基质蛋白M1抗原、M2e抗原或核蛋白NP抗原中的任一种或至少两种的组合，优选为NP抗原；优选地，所述表面抗原为一种或两种抗原的组合，内腔抗原为区别于表面抗原的另一种抗原；优选地，所述多抗原通用流感疫苗的表面抗原为HA抗原或M2e抗原，内腔抗原为NP抗原；优选地，所述多抗原通用流感疫苗的表面抗原为HA抗原和M2e抗原的组合，内腔抗原为NP抗原。5.根据权利要求1-4任一项所述的多抗原通用流感疫苗，其特征在于，所述表面抗原通过基因融合表达或化学偶联法分布于铁蛋白纳米颗粒载体蛋白表面；优选地，所述化学偶联法的化学交联剂包括琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(SMCC)、磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(Sulfo-SMCC)、琥珀酰亚胺基-马来酰亚胺多聚乙二醇(NHS-PEGn-Mal)、N-ε-马来酰亚胺己酸琥珀酰亚胺酯(EMCS)、N-ε-马来酰亚胺己酸磺基琥珀酰亚胺酯(Sulfo-EMCS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基硫代琥珀酰亚胺(Sulfo-NHS)、羧基-氨基多聚乙二醇(COOH-PEGn-NH2)、双琥珀酰亚胺辛二酸酯(DSS)、双磺基琥珀酰亚胺辛二酸酯(Sulfo-DSS)、磺基双琥珀酰亚胺酯多聚乙二醇(NHS-PEGn-NHS)等中的任一种或至少两种的组合，优选为Sulfo-SMCC或NHS-PEGn-Mal交联剂；其中，所述PEGn中的n为聚乙二醇中乙二醇单体的个数，所述聚乙二醇的分子量范围为2k-10k。6.根据权利要求1-5任一项所述的多抗原仿生流感疫苗，其特征在于，所述表面抗原包括人源性流感病毒抗原蛋白、禽源性流感病毒抗原蛋白或猪源性流感病毒抗原蛋白中的任一种或至少两种的组合；优选地，所述内腔抗原包括人源性流感病毒抗原蛋白、禽源性流感病毒抗原蛋白或猪源性流感病毒抗原蛋白中的任一种或至少两种的组合；优选地，所述表面抗原包括突变氨基酸序列；优选地，所述内腔抗原包括突变氨基酸序列。7.一种基于铁蛋白的双抗原通用流感疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将一种表面抗原装载到铁蛋白纳米颗粒载体蛋白的表面，将另一种内腔抗原装载到铁蛋白纳米颗粒的内部空腔，得到基于铁蛋白的双抗原通用流感疫苗；优选地，所述双抗原通用流感疫苗的制备方法包括如下步骤：(1)将内腔抗原装载到铁蛋白纳米颗粒的内部空...

【专利技术属性】
技术研发人员：张松平，苏志国，魏江雪，李正军，杨延丽，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11