一种荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法及提取方法技术

本发明专利技术公开了一种荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法及提取方法，该方法综合分析了超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比对多糖提取的影响，并通过响应面模型对提取条件进行优化，得到一种新的提取工艺，能够高效地提取荷仙菇中的多糖。与现有提取工艺相比，本发明专利技术的提取工艺科学合理，提取率高，成本低。

An Optimum Method and Extraction Method for Polysaccharide Extraction from Lentinus edodes

【技术实现步骤摘要】
一种荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法及提取方法
本专利技术属于天然提取物
，具体涉及一种基于响应面法优化荷仙菇多糖提取工艺参数的方法及荷仙菇多糖提取方法。
技术介绍
荷仙菇属于多孔菌目、荷仙菇科、荷仙菇属。其分布很广，在澳大利亚、加拿大、中国、芬兰、法国、德国、日本、瑞士、泰国以及英国和美国均有其存在。夏秋季在云杉、冷杉或松林及混交林中分散生长，柄基部似根状并与树根相连。荷仙菇又名花瓣菇，它是一种药食两用的真菌，含有丰富的蛋白质、维生素和矿物质等多种营养物质，此外还有丰富的活性多糖。多糖除了可以为人体的生长提供能量，还具有抵抗肿瘤、降血脂、降血糖、抗感染和免疫调节的活性作用，因此，荷仙菇多糖物质的含量可作为内在品质的评价指标。目前，有关荷仙菇多糖的报道较少，而且其提取工艺参数不完善，已有的提取方法，相比其丰富的含量来说，提取率较低，能耗较高，成本高。
技术实现思路
为克服荷仙菇多糖提取率较低的问题，本专利技术的专利技术人经尝试探索试验，提出一种基于响应面优化荷仙菇多糖提取工艺参数的方法，该方法以荷仙菇为材料，以提高多糖的提取率为目的，采用超声波辅助酶法提取，在单因素试验的基础上，利用响应面优化提取工艺，为荷仙菇多糖的提取提供技术支持，为荷仙菇资源的综合利用以及提高附加值提供理论依据。为了实现上述目的，本专利技术创造采用的技术方案为：一种基于响应面法优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征包括以下步骤：S1：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末备用；S2：用超声波辅助酶法提取荷仙菇中的多糖，测定提取液中多糖的含量；S3：选择超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比进行单因素试验；S4：在单因素试验的基础上，选取影响最大的三个因素，以酶活力、pH和超声时间为自变量，以多糖的提取率为响应值，建立多元二次方程；S5：对多元二次方程进行响应面分析，取多糖提取率为最大值，对荷仙菇多糖的提取工艺进行优化，得到提取工艺参数。S6：利用S5中得到的提取工艺参数再进行荷仙菇多糖最佳提取参数的确定和实验验证。所述的S2中测定提取液中多糖含量的具体方法为按照苯酚-硫酸法，再根据线性回归方程换算成样品中的多糖含量，其荷仙菇多糖的提取率计算公式如下：式中：C：根据标准曲线得到的稀释后的样品浓度mg/mL；K：稀释倍数；V：提取液体积mL；m：样品质量g。所述的S3中进行单因素试验时，分析各因素对多糖提取率的影响，选取超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比依次进行单因素试验，其中超声时间为：10、20、30、40、50min；pH为：3.5、4.0、4.5、5.0、5.5；酶活力为：60、120、180、240、300U/g；酶解温度为：30、40、50、60、70℃；酶解时间为：1、1.5、2、2.5、3h；液料比为：20、30、40、50、60mL/g。所述的S4中建立多元二次方程时，选择对提取率影响大的三个因素，酶活力、pH和超声时间，根据实验数据进行多元回归拟合，获得荷仙菇中多糖提取率对自变量三个因素，酶活力、pH和超声时间的二次多项方程，根据实验结果建立数学模型，建立数学模型后，对荷仙菇中多糖提取的数学模型进行显著性差异检验。在S5中，选取最佳工艺参数时，在选取的三个因素范围内，多糖提取率选最大，根据回归模型，通过软件分析得出荷仙菇多糖最佳提取工艺参数。一种荷仙菇多糖提取方法，其步骤为：1)：确定提取过程中所需的超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比；2)：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末备用；3)：将S2中得到的黄荷仙菇粉末加入水中，并采用超声辅助酶法提取荷仙菇多糖，得到提取液，该步中超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比为S1中的确认值。所述的步骤1)中，超声时间为10～50min；pH为3.5～5.5；酶活力为60～300U/g；酶解温度为30～70℃；酶解时间为1～3h；液料比为20～60mL/g。所述的超声时间为21min；pH为4.9；酶活力为185U/g；酶解温度为60℃；酶解时间为2h；液料比为50mL/g。本专利技术创造的有益效果为：本专利技术提供的一种荷仙菇多糖的提取工艺参数优化方法，是在综合考虑了超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比等因素对多糖提取的影响，并通过响应面模型对提取条件进行优化，得到新的提取工艺參数，能够高效、准确的提取荷仙菇中的多糖。采用本方法优化后的工艺与现有工艺相比，本专利技术的提取工艺科学合理，总多糖提取率高。附图说明图1是绘制的标准曲线。图2是超声时间对多糖提取率的影响曲线图。图3是pH对多糖提取率的影响曲线图。图4是酶活力对多糖提取率的影响曲线图。图5是酶解温度对多糖提取率的影响曲线图。图6是酶解时间对多糖提取率的影响曲线图。图7是液料比对多糖提取率的影响曲线图。图8是Box-Behnken响应面分析实验因素与水平表。图9是响应面分析方案及实验结果表。图10是回归方差分析表。图11是酶活力和pH交互作用响应面图。图12是酶活力和超声时间交互作用响应面图。图13是pH进而超声时间交互作用响应面图。具体实施方式一种基于响应面法优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征包括以下步骤：S1：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末备用。S2：用超声波辅助酶法提取荷仙菇中的多糖，测定提取液中多糖的含量。所述的S2中测定提取液中多糖含量的具体方法为按照苯酚-硫酸法，再根据线性回归方程换算成样品中的多糖含量，其荷仙菇多糖的提取率计算公式如下：式中：C：根据标准曲线得到的稀释后的样品浓度mg/mL；K：稀释倍数；V：提取液体积mL；m：样品质量g。S3：选择超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比进行单因素试验。所述的S3中进行单因素试验时，分析各因素对多糖提取率的影响，选取超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比依次进行单因素试验，其中超声时间为：10、20、30、40、50min；pH为：3.5、4.0、4.5、5.0、5.5；酶活力为：60、120、180、240、300U/g；酶解温度为：30、40、50、60、70℃；酶解时间为：1、1.5、2、2.5、3h；液料比为：20、30、40、50、60mL/g。S4：在单因素试验的基础上，选取影响最大的三个因素，以酶活力、pH和超声时间为自变量，以多糖的提取率为响应值，建立多元二次方程。所述的S4中建立多元二次方程时，选择对提取率影响大的三个因素，酶活力、pH和超声时间，根据实验数据进行多元回归拟合，获得荷仙菇中多糖提取率对自变量三个因素，酶活力、pH和超声时间的二次多项方程，根据实验结果建立数学模型，建立数学模型后，对荷仙菇中多糖提取的数学模型进行显著性差异检验。S5：对多元二次方程进行响应面分析，取多糖提取率为最大值，对荷仙菇多糖的提取工艺进行优化，得到提取工艺参数。在S5中，选取最佳工艺参数时，在选取的三个因素范围内，多糖提取率选最大，根据回归模型，通过软件分析得出荷仙菇多糖最佳提取工艺参数。S6：利用S5中得到的提取工艺参数再进行荷仙菇多糖最佳提取参数的确定和实验验证。一种荷仙菇多糖提取方法，其步骤为：1)：确定提取过程中所需的超声时间、pH、酶活力、酶解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于响应面法优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征包括以下步骤：S1：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末备用；S2：用超声波辅助酶法提取荷仙菇中的多糖，测定提取液中多糖的含量；S3：选择超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比进行单因素试验；S4：在单因素试验的基础上，选取影响最大的三个因素，以酶活力、pH和超声时间为自变量，以多糖的提取率为响应值，建立多元二次方程；S5：对多元二次方程进行响应面分析，取多糖提取率为最大值，对荷仙菇多糖的提取工艺进行优化，得到提取工艺参数。

【技术特征摘要】
1.一种基于响应面法优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征包括以下步骤：S1：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末备用；S2：用超声波辅助酶法提取荷仙菇中的多糖，测定提取液中多糖的含量；S3：选择超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比进行单因素试验；S4：在单因素试验的基础上，选取影响最大的三个因素，以酶活力、pH和超声时间为自变量，以多糖的提取率为响应值，建立多元二次方程；S5：对多元二次方程进行响应面分析，取多糖提取率为最大值，对荷仙菇多糖的提取工艺进行优化，得到提取工艺参数。2.根据权利要求1所述的一种基于响应面优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征在于，所述的步骤S5后，进行以下步骤：S6：利用S5中得到的提取工艺参数再进行荷仙菇多糖最佳提取参数的确定和实验验证。3.根据权利要求1所述的一种基于响应面优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征在于：所述的S2中测定提取液中多糖含量的具体方法为按照苯酚-硫酸法，再根据线性回归方程换算成样品中的多糖含量，其荷仙菇多糖的提取率计算公式如下：式中：C：根据标准曲线得到的稀释后的样品浓度mg/mL；K：稀释倍数；V：提取液体积mL；m：样品质量g。4.根据权利要求1所述的一种基于响应面优化荷仙菇多糖提取工艺参数优化方法，其特征在于：所述的S3中进行单因素试验时，分析各因素对多糖提取率的影响，选取超声时间、pH、酶活力、酶解温度、酶解时间和液料比依次进行单因素试验，其中超声时间为：10、20、30、40、50min；pH为：3.5、4.0、4.5、5.0、5.5；酶活力为：60、120、180、240、300U/g；酶解温度为：30、40、50、60、70℃；酶解时间...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺音，程野，耿广军，曹向宇，蔡天革，陈丽娜，张慧娇，
申请(专利权)人：辽宁大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21