一种用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维的制备方法，包括：水热法制备Fe3O4@PEI，通过静电纺丝制备Fe3O4@PEI/PVA磁性纳米纤维膜，均质处理得到Fe3O4@PEI/PVA磁性纳米短纤维，短纤维表面修饰DNA适配体作为靶向分子，用于癌细胞的高效捕获和磁分离。本发明专利技术制备工艺简单，原料廉价易得，可以简单、快速实现癌细胞的高效捕获和无损释放，在细胞分选领域具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维的制备方法
本专利技术属于细胞分选领域，特别涉及一种用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维的制备方法。
技术介绍
循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells,CTCs)是指从原发灶实体瘤上脱落进入血液循环系统的癌细胞。研究表明，CTCs与癌症的转移和复发密切相关，且癌症病人外周血中CTCs的数量与癌症的分期密切相关，还可以反映癌症的治疗效果。检测和分析CTCs对于癌症的早期诊断、疗效评估、预后判断和个体化治疗具有极其重要的意义。但是血液中CTCs数目极少，每毫升血液中的血细胞超过109个，而CTCs只有几个到几百个，因此采用常规手段难以实现CTCs的捕获和分离。目前，针对CTCs的捕获和分离的方法主要有基于细胞尺寸差异的过滤分离方法、密度梯度离心法、磁分离技术、电化学分选、微流控技术以及基于各种纳米基底的免疫识别分离方法。其中，细胞磁分离技术一般是通过表面连接有靶向配体的磁性材料与含有靶细胞的细胞悬液共同孵育一段时间，然后利用外部磁场分离出靶细胞的方法。该方法可以在几分钟内从复杂的细胞混合物中分离出目标细胞，简便、快速实现目标细胞的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维的制备方法，包括：(1)通过一步水热合成法，合成外部包裹聚乙烯亚胺PEI的磁性四氧化三铁纳米颗粒Fe3O4@PEI；将Fe3O4@PEI加入到PEI/PVA纺丝液中，搅拌得到Fe3O4@PEI/PVA混合纺丝液，通过静电纺丝得到Fe3O4@PEI/PVA复合纳米纤维膜，最后进行交联；(2)将交联后的Fe3O4@PEI/PVA复合纳米纤维膜浸泡在聚乙烯醇溶液中进行均质，经过后处理得到Fe3O4@PEI/PVA磁性纳米短纤维；(3)将Fe3O4@PEI/PVA磁性纳米短纤维分散于二甲基亚砜DMSO中，加入3‑马来酰亚胺基丙酸(N‑羟基琥珀酰亚胺)酯NHS...

【技术特征摘要】
1.一种用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维的制备方法，包括：(1)通过一步水热合成法，合成外部包裹聚乙烯亚胺PEI的磁性四氧化三铁纳米颗粒Fe3O4@PEI；将Fe3O4@PEI加入到PEI/PVA纺丝液中，搅拌得到Fe3O4@PEI/PVA混合纺丝液，通过静电纺丝得到Fe3O4@PEI/PVA复合纳米纤维膜，最后进行交联；(2)将交联后的Fe3O4@PEI/PVA复合纳米纤维膜浸泡在聚乙烯醇溶液中进行均质，经过后处理得到Fe3O4@PEI/PVA磁性纳米短纤维；(3)将Fe3O4@PEI/PVA磁性纳米短纤维分散于二甲基亚砜DMSO中，加入3-马来酰亚胺基丙酸(N-羟基琥珀酰亚胺)酯NHS-Mal，以三乙胺作为催化剂，室温条件下反应；将产物重分散于超纯水中，以三(2-羧乙基)膦TCEP作为催化剂和还原剂，加入DNA适配体水溶液，室温搅拌反应，最后经过磁分离、水洗，得到用于分离循环肿瘤细胞的磁性纳米短纤维Fe3O4@PEI/PVA-aptamer。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的Fe3O4@PEI和PEI/PVA的质量比为1～3:20；其中，PEI与PVA的质...

【专利技术属性】
技术研发人员：史向阳，肖云超，
申请(专利权)人：东华大学，
类型：发明
国别省市：上海,31