一种黄皮果挥发油香水的制备方法技术

本发明专利技术属于原材料研究技术领域，公开了一种黄皮果挥发油香水的制备方法。所述制备方法为提取黄皮果挥发油；挥发油的确定；香水的制备：用8％的精油和92％的95度乙醇混合，乳化，4℃下离心去除不溶杂质，得澄清液即为黄皮果挥发油香水；黄皮果挥发油香水特性检测：理化特性、香水抗氧化性、香水抑菌活性、香水抑癌细胞生长。本发明专利技术提供的香水带有浓郁的黄皮果果香味，持久性长，可在滤纸上持香48h；从成分上来看，黄皮果香水仅添加精油和95％乙醇，安全性高。黄皮果香水清除能力更好，即抗氧化能力越强。黄皮果香水有抑菌能力，对不同菌种的抑菌能力不同。癌细胞在香水中死亡率高于在95％乙醇中，即黄皮果香水抑制癌细胞生长。

Preparation method of volatile oil of wadding fruit

The invention belongs to the technical field of raw material research, and discloses a preparation method of the volatile oil of wadding fruit. The preparation method is to extract volatile oil from the Cortex Phellodendri; the determination of volatile oil; the preparation of perfume; the mixture of 8% essential oil and 92% 95 ethanol, emulsification, and centrifugation at 4 degrees Celsius to remove insoluble impurities; the clarified solution is the volatile oil perfume of wrewd fruit; the volatile oil of wrewd fruit is characterized by its physicochemical properties, perfume antioxidant activity, perfume antifungal activity, and growth of perfume inhibiting tumor cells. The perfume provided by the invention has a strong flavour of yellow peel and fruit, and has a long duration and can hold 48h on the filter paper. From the component point of view, only 95% essential oils and flavors are added to the yellow fruit perfume, and the safety is high. Yellow peel has better scavenging ability, that is, the stronger antioxidant capacity. It has antibacterial activity and different bacteriostatic ability to different strains. The death rate of cancer cells in perfume is higher than that in 95% ethanol, that is, Cortex Phellodendri perfume inhibits cancer cell growth.

【技术实现步骤摘要】
一种黄皮果挥发油香水的制备方法
本专利技术属于原材料研究
，尤其涉及一种黄皮果挥发油香水的制备方法。
技术介绍
目前，业内常用的现有技术是这样的：黄皮，乃肇庆道地果实，是人们喜爱的热带水果，用途非常广泛，具有较高的营养价值和药用价值，黄皮叶、果和种子等都具有药用价值，有理气健脾、消食健胃、行气止痛等功效，在肇庆也有很多特色黄皮。黄皮果实富含有机酸、果胶、氨基酸、挥发油、糖分、维生素C、黄酮甙等多种成分。黄皮果种子富含油分，挥发油属中药，具有多种生物活性，如抗菌、消炎、抗癌、镇痛、利尿等。挥发油具有多种药理作用，如制成精油或其他护肤制剂，且黄皮挥发油具浓郁果香味，研究其挥发油成分对开发其药用价值具有重要意义。从梅家齐的功能性精油香水的研究进展与应用可看出，不同植物的根、茎、叶、花、果有不同的芳香效果，且纯天然的精油属挥发性精油，含有大量的萜烯，醛类，脂类，酮类，酚或酚醚类，单烯类精油有杀菌，镇痛及增加人体免疫功能，倍半烯可消炎，止痒，双烯在吸入的过程抗真菌，起平衡激素分泌作用,其中精油中的醇具有抗感染，抗病毒性和对皮肤的低刺激性。香水让人感觉更美妙且受多数人的需求，无论男女老少都喜爱香水，若能够提取黄皮果的挥发油，再制成香水，既可为香水产业增添新品种，另外，可解决黄皮果皮废料的充分应用，为肇庆特产-黄皮的有效利用提供理论依据。目前关于黄皮果材料来源的挥发油香水研制，还未见文献报道。综上所述，现有技术存在的问题是：目前关于黄皮果材料来源的挥发油香水研制，还未见文献报道。解决上述技术问题的难度：黄皮挥发油含量以及部位，通过多次试验研究，对黄皮的果皮，果实和核仁进行了挥发油的提取发现，混合提取挥发油的含量高，而工序简化，香味浓郁。解决上述技术问题的意义：通过研究，解决黄皮果挥发油提取的部位和提取流程，为从肇庆道地水果中提取高质量挥发油提供了方法和研究的参考依据。本专利技术对黄皮果挥发油的开发利用及发展前景都具有深远意义。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种黄皮果挥发油香水的制备方法。本专利技术是这样实现的，一种黄皮果挥发油香水的制备方法，具体包括以下步骤：步骤一：提取黄皮果挥发油：称取500g新鲜黄皮果皮和果核，利用挥发油提取器提取获得黄皮果挥发油；步骤二：挥发油的确定：采用薄板层析法经过薄层板到的制备、点样、展开和显色验证挥发油，确定挥发油；步骤三：香水的制备：用8％的精油和92％的95度乙醇混合，放入密封容器混合，乳化，4℃下离心去除不溶杂质，得澄清液即为黄皮果挥发油香水；步骤四：黄皮果挥发油香水特性的检测：理化特性、香水抗氧化性、香水抑菌活性、香水抑癌细胞生长。进一步，步骤一中，提取黄皮果挥发油的方法为：(1)称取500g新鲜黄皮果皮和果核，用蒸馏水冲洗干净，放入组织匀浆机加蒸馏水捣成匀浆；(2)将匀浆倒入2000ml圆底烧瓶中，用挥发油提取器提取，在提取器中加热6h后，分离出油水；(3)油水在高速冷冻离心机中离心初步除水后，加入少许无水硫酸钠除水；(4)利用0.45um滤膜过滤器过滤后得到黄皮挥发油。进一步，步骤二中，薄板层析法验证挥发油，具体方法为：(1)薄层板的制备在研钵中放入10g薄层层析硅胶，用现配的25ml0.5％的羧羟基纤维素钠水溶液研磨成糊状，将配制好的浆料倒在清洁干燥的载玻片上，左右摇晃使其表面均匀平滑，室温下晾干后在105℃活化30min，活化后的薄层板放在干燥器内保存待用；(2)点样在距薄层板一端1cm处用铅笔划起始线，用毛细管吸取样品后在起始线上点样，点样斑点直径不超过2mm；若样品太稀，可重复点样，且待前次点样的溶剂挥发后重新点样，避免样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果，在一个薄层板上点两个样，一为黄皮挥发油，一为标准品，样点间距离为1cm，点样要轻，不可刺破薄层，晾干或者吹风筒吹干；(3)展开选用石油醚和乙酸乙酯以1:5的比例作为展开剂，在层析缸中加入展开剂，高度不超过1cm，将点好样的薄层板放入层析缸中，点样一端向下，盖上瓶盖，待展开剂前沿跑到一定高度即为距薄层板一端1cm左右时取出，尽快在板上标上展开剂前沿位置，晾干或吹风筒吹干；(4)显色选用5％香草醛浓硫酸作为显色剂，待薄层板展开层完全干后喷洒香草醛浓硫酸，晾干或者吹风筒吹干后，观察对比其有色斑点；根据显色结果观察标示斑点位置，计算Rf值进一步，步骤三中，8％的精油包括3.6％黄皮挥发油，2.4％薰衣草精油和2.0％檀香精油。进一步，步骤三中，乳化为超声处理2小时。进一步，步骤三中，离心为6000r离心10分钟。进一步，步骤四中，香水抗氧化性检测方法：(1)配制不同浓度样品液，用二分法将黄皮果香水和市售香水分别用95％乙醇配制成10％、5％、2.5％、1.25％、0.625％、0.3125％的样品溶液；(2)测定香水清除羟自由基能力A0—空白对照液的吸光度；Ax—加入样品溶液后的吸光度；Ax0—不加显色剂H2O2样品溶液本底的吸光度。进一步，步骤四中，采用滤纸片法测定香水抗氧化性，具体包括以下步骤：(1)配制培养基；(2)制备试验菌悬液，实验菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌；(3)制作滤纸片；(4)采用二分法制备香水和氨苄青霉素钠稀释溶液，香水用95％乙醇配制成10％、5％、2.5％、1.25％、0.625％、0.3125％6个浓度；氨苄青霉素钠用蒸馏水配制成3.125、6.25、12.5、25、50、100ug/ml6个浓度；(5)测定香水和氨苄青霉素钠抑菌活性。进一步，步骤四中，香水抑癌细胞生长的检测方法为：(1)灭菌：将所有的实验用具用报纸或牛皮纸包好后在121℃下灭菌30分钟，以下操作均在无菌条件下进行；(2)制备DMEM培养液，200ml/瓶，-20℃保存备用；(3)双抗与血清溶液，冷藏的固体双抗和血清溶液放置于4℃解冻后，分别分装于15ml的干净玻璃瓶中待用；(4)癌细胞复苏及其实验，显微镜下观察结果；(5)癌细胞计数，计算培养瓶中存活的癌细胞总数。黄皮香水抑制癌细胞生长试验结果如下。在倒置显微镜下观察到的癌细胞在不同时间段下，相同培养条件下，癌细胞在95％乙醇的存活数量比在香水中的存活数量多，也就是说，在相同培养条件下，香水较95％乙醇有更好的抑癌效果。该数据已进行过统计学中的显著性检验分析。综上所述，本专利技术的优点及积极效果为：1.薄板层析RF值高于其他挥发油，其含量和纯度高于其他；2.理化性质分析可知，黄皮果香水为无色透明液体，带有黄皮果香味，具有挥发性，pH值为5.5，持香时间为48h，高于市售美顿香水为粉色透明液体，带有香甜的味道，具有挥发性，pH值为5.4，持香时间为18h；3.抗氧化特性研究表明，黄皮香水与市售香水都有清除羟自由基的能力，且黄皮果香水清除能力更好，即抗氧化能力越强；4.抑菌特性研究表明，与氨苄青霉素钠比较抑菌能力；显示黄皮果香水有抑菌能力，对不同菌种的抑菌能力不同；5.抑制癌细胞生长能力研究表明，癌细胞在95％乙醇和黄皮果香水中的生长状态比较可知，癌细胞在香水中死亡率高于在95％乙醇，反映出黄皮果香水领具有抑制癌细胞生长的能力。本专利技术提供的黄皮果挥发油香水带有浓郁的黄皮果果香味，持久性长，可在滤纸上持香48h；从成分上来看，黄皮果香本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种黄皮果挥发油香水的制备方法，其特征在于，所述的黄皮果挥发油香水的制备方法，具体包括以下步骤：步骤一：提取黄皮果挥发油：称取500g新鲜黄皮果皮和果核，利用挥发油提取器提取获得黄皮果挥发油；步骤二：挥发油的确定：采用薄板层析法经过薄层板到的制备、点样、展开和显色验证挥发油，确定挥发油；步骤三：香水的制备：用8％的精油和92％的95度乙醇混合，放入密封容器混合，乳化，4℃下离心去除不溶杂质，得澄清液即为黄皮果挥发油香水；步骤四：黄皮果挥发油香水特性的检测：理化特性、香水抗氧化性、香水抑菌活性、香水抑癌细胞生长。

【技术特征摘要】
1.一种黄皮果挥发油香水的制备方法，其特征在于，所述的黄皮果挥发油香水的制备方法，具体包括以下步骤：步骤一：提取黄皮果挥发油：称取500g新鲜黄皮果皮和果核，利用挥发油提取器提取获得黄皮果挥发油；步骤二：挥发油的确定：采用薄板层析法经过薄层板到的制备、点样、展开和显色验证挥发油，确定挥发油；步骤三：香水的制备：用8％的精油和92％的95度乙醇混合，放入密封容器混合，乳化，4℃下离心去除不溶杂质，得澄清液即为黄皮果挥发油香水；步骤四：黄皮果挥发油香水特性的检测：理化特性、香水抗氧化性、香水抑菌活性、香水抑癌细胞生长。2.如权利要求1所述的黄皮果挥发油香水的制备方法，其特征在于，所述步骤一中，提取黄皮果挥发油的方法为：(1)称取500g新鲜黄皮果皮和果核，用蒸馏水冲洗干净，放入组织匀浆机加蒸馏水捣成匀浆；(2)将匀浆倒入2000ml圆底烧瓶中，用挥发油提取器提取，在提取器中加热6h后，分离出油水；(3)油水在高速冷冻离心机中离心初步除水后，加入少许无水硫酸钠除水；(4)利用0.45um滤膜过滤器过滤后得到黄皮挥发油。3.如权利要求1所述的黄皮果挥发油香水的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，薄板层析法验证挥发油，具体方法为：(1)薄层板的制备(2)点样在距薄层板一端1cm处用铅笔划起始线，用毛细管吸取样品后在起始线上点样，点样斑点直径不超过2mm；(3)展开选用石油醚和乙酸乙酯以1:5的比例作为展开剂，在层析缸中加入展开剂，高度不超过1cm，将点好样的薄层板放入层析缸中，点样一端向下，盖上瓶盖，待展开剂前沿跑到一定高度即为距薄层板一端1cm左右时取出，尽快在板上标上展开剂前沿位置，晾干或吹风筒吹干；(4)显色选用5％香草醛浓硫酸作为显色剂，待薄层板展开层完全干后喷洒香草醛浓硫酸，晾干或者吹风筒吹干后，观察对比其有色斑点；根据显色结果观察标示斑点位置，计算Rf值4.如权利要求1所述的黄皮果挥发油香水的制备方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李充璧，许蓉蓉，蒋红群，许名颖，陈培海，谭俊阳，
申请(专利权)人：李充璧，
类型：发明
国别省市：广东,44