白术药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法技术

本发明专利技术涉及一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法。该特征图谱构建方法包括以下步骤：以绿原酸为对照品制备对照品参照物溶液；以白术对照药材制备对照药材参照物溶液；分别取白术药材、白术饮片、麸炒白术饮片、白术标准汤剂和麸炒白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液分别作为供试品溶液；将所述参照物溶液、供试品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得所述白术药材UPLC特征图谱。该方法重现性良好，准确可靠，通过所建立的UPLC特征图谱可以反映白术标准汤剂的物质基础，实现对白术药材质量的有效控制。可以提升白术药材的质量监控水平，为临床含白术的制剂提供质优、稳定的白术原料。

【技术实现步骤摘要】
白术药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法
本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法。
技术介绍
白术为菊科植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根茎，为临床常用中药。其具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的作用，临床上多用于治疗脾虛食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安等，具有较强的临床应用价值，市场需求广阔，被开发成相关复方制剂如玉屏风颗粒，以及中药配方颗粒广泛用于临床。中药的临床使用多以传统汤剂为主。中药汤剂的物质基础，是中医理论指导下防治疾病的基础。现行的法定标准没有定量控制指标，不能全面反映中药成分的整体作用。在现阶段，中药绝大多数有效成分未明确的情况下，中药指纹图谱/特征图谱的建立能大大提高中药质量控制的技术水平及科技含量。《中国药典》2015年版白术药材没有收载含量测定项，并不能全面地评价白术质量。目前文献研究报道的关于白术指纹图谱或特征图谱多采用的是常规的HPLC法，且均只针对原药材的物质基础，指标成分多以脂溶性成分为研究对象；主要用于中药材的定性鉴别，不能全部反映中药汤剂的物质基础特征。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法。该方法重现性良好，准确可靠，通过所建立的UPLC特征图谱可以实现对白术药材质量的有效控制。具体技术方案为：一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：参照物溶液的制备：以绿原酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；取白术对照药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；供试品溶液的制备：取白术药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术药材供试品溶液；取白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术饮片供试品溶液；取麸炒白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术饮片供试品溶液；取白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术标准汤剂供试品溶液；取麸炒白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术标准汤剂供试品溶液；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、白术药材供试品溶液、白术饮片供试品溶液、麸炒白术饮片供试品溶液、白术标准汤剂供试品溶液和麸炒白术标准汤剂供试品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得所述白术药材UPLC特征图谱。本专利技术还提供一种白术药材的检测方法，包括以下步骤：参照物溶液的制备：以绿原酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；取白术对照药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；待测溶液的制备：取待测样品，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为待测样品溶液；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、和待测样品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，即得所述待测样品的UPLC图谱。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术采用超高效液相色谱(UPLC)法构建白术药材的特征图谱，引入白术饮片、麸炒白术饮片、白术标准汤剂和麸炒白术标准汤剂的特征图谱进行研究，针对饮片、汤剂与白术药材共有的水溶性特征成分进行研究，并作为特征图谱峰确定的依据。采用UPLC-MS和相关对照品确认了3个水溶性特征成分，分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸成分，并作为白术药材特征图谱特征峰确定的依据；同时，采用了对照品、对照药材双重对照，可以有效克服液相条件指纹图谱固有存在的耐用性偏差问题，比较更加全面。本专利技术以未知峰1作为参照峰，规定每个特征峰的相对峰面积限量范围，实现多个特征成分的定量化，符合中药的整体作用理念。本专利技术采用了UPLC法，与常规HPLC法相比，更加高效、快速、环保；采用本专利技术构建的特征图谱及方法，重现性好，准确可靠，可以快速、全面实现对白术药材多个特征成分的质量监控，既提升了白术药材的质量控制水平，又提升和稳定白术药材的内在质量；保持了白术药材、白术饮片与临床汤剂质量的一致性，为临床提供符合白术标准汤剂要求的原料，为白术相关的制剂工艺生产过程提供重要的多指标参数依据。附图说明图1为15批次白术标准汤剂UPLC特征图谱的叠加图(峰2：新绿原酸、峰3：绿原酸、峰4：隐绿原酸)；图2为15批次白术饮片UPLC特征图谱的叠加图；图3为15批次白术药材UPLC特征图谱的叠加图；图4为15批次麸炒白术标准汤剂UPLC特征图谱的叠加图；图5为15批次麸炒白术饮片UPLC特征图谱的叠加图；图6为白术标准汤剂UPLC对照特征图谱(峰2：新绿原酸、峰3：绿原酸、峰4：隐绿原酸)；图7为白术饮片UPLC对照特征图谱(峰2：新绿原酸、峰3：绿原酸、峰4：隐绿原酸)；图8为白术药材UPLC对照特征图谱(峰2：新绿原酸、峰3：绿原酸、峰4：隐绿原酸)；图9为麸炒白术标准汤剂UPLC对照特征图谱(峰2：新绿原酸、峰3：绿原酸、峰4：隐绿原酸)；图10为麸炒白术饮片UPLC对照特征图谱(峰2：新绿原酸、峰3：绿原酸、峰4：隐绿原酸)。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术作进一步详细的说明。本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式。相反地，提供这些实施方式的目的是使对本专利技术公开内容理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：参照物溶液的制备：以绿原酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；取白术对照药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；供试品溶液的制备：取白术药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术药材供试品溶液；取白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术饮片供试品溶液；取麸炒白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术饮片供试品溶液；取白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术标准汤剂供试品溶液；取麸炒白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术标准汤剂供试品溶液；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、白术药材供试品溶液、白术饮片供试品溶液、麸炒白术饮片供试品溶液、白术标准汤剂供试品溶液和麸炒白术标准汤剂供试品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得所述白术药材UPLC特征图谱。该方法的超高效液相色谱的色谱条件包括：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。所述色谱柱为WatersBEHC18色谱柱。所述色谱柱的柱长为50±5mm，内径为2.1±0.3mm，粒径为1.7±0.3μm。流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05-0.15％磷酸溶液，进行梯度洗脱。所述梯度洗脱具体为：0-4min，流动相A的体积分数由1％上升到6％，流动相B的体积分数由99％降低至94％；4-10min，流动相A的体积分数由6％上升到9％，流动相B的体积分数由94％降低至91％；10-16min，流动相A的体积分数由9％上升到18％，流动相B的体积分数由9本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：参照物溶液的制备：以绿原酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；取白术对照药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；供试品溶液的制备：取白术药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术药材供试品溶液；取白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术饮片供试品溶液；取麸炒白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术饮片供试品溶液；取白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术标准汤剂供试品溶液；取麸炒白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术标准汤剂供试品溶液；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、白术药材供试品溶液、白术饮片供试品溶液、麸炒白术饮片供试品溶液、白术标准汤剂供试品溶液和麸炒白术标准汤剂供试品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得所述白术药材UPLC特征图谱。

【技术特征摘要】
1.一种白术药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：参照物溶液的制备：以绿原酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；取白术对照药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；供试品溶液的制备：取白术药材，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术药材供试品溶液；取白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术饮片供试品溶液；取麸炒白术饮片，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术饮片供试品溶液；取白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为白术标准汤剂供试品溶液；取麸炒白术标准汤剂，加入提取溶剂提取，滤过，取续滤液作为麸炒白术标准汤剂供试品溶液；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、白术药材供试品溶液、白术饮片供试品溶液、麸炒白术饮片供试品溶液、白术标准汤剂供试品溶液和麸炒白术标准汤剂供试品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得所述白术药材UPLC特征图谱。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，超高效液相色谱的色谱条件包括：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05-0.15％磷酸溶液，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0-4min，流动相A的体积分数由1％上升到6％，流动相B的体积分数由99％降低至94％；4-10min，流动相A的体积分数由6％上升到9％，流动相B的体积分数由94％降低至91％；10-16min，流动相A的体积分数由9％上升到18％，流动相B的体积分数由91％降低至82％；16-22min，流动相A的体积分数由18％上升到20％，流动相B的体积分数由82％降低至80％；22-23min，流动相A的体积分数由20％上升到90％，流动相B的体积分数由80％降低至10％。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：柱温为(25±3)℃；流速为(0.25±0.1)ml/min；检测波长为(325±40)nm。4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文芳，林碧珊，陈锦霞，史紫娟，曾杉，陈伟钢，甘伟发，高永坚，袁春平，汤春花，
申请(专利权)人：国药集团广东环球制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44