【技术实现步骤摘要】
一种简易的凤鲚染色体制备的方法
本专利技术属于细胞遗传学领域，具体的涉及一种简易的凤鲚染色体制备装置和操作的方法。
技术介绍
染色体是遗传物质的载体，研究物种染色体，不仅可以探讨其分类地位和系统演化，也有助于近缘物种的鉴定和群落分析，对资源的开发利用和遗传育种都有重要的意义。染色体分析还是各种动物遗传疾病诊断和性状变异研究的一个重要手段，更是染色体组操作育种必需掌握的一门技术。水产养殖业也常常需要掌握所培育物种的染色体组成及结构等信息。尤其近年来，海洋动物雌雄异形的现象吸引了大量专家的关注，性别决定机制的探讨也一直是生命科学研究中最具有吸引力和最热门的领域之一，是否存在性染色体是研究人员最想要了解的问题。20世纪前半叶，细胞遗传学的研究表明，性染色体在动物物种间，甚至非常相近种间都存在着变异，这意味着性染色体进化较快。之后的遗传学研究还发现，即使在一些染色体明显相同的种间，性别决定机制也显著不同，甚至还有研究发现性别决定机制在种内都存在差异。要想开展精确的细胞遗传学分析，染色体标本制备是最重要的一个环节，关键在于取材和滴片，优良的染色体制片是细胞遗传学研究的根本。...
【技术保护点】
1.一种简易的凤鲚染色体制备的方法，其特征在于所述方法包括：1)凤鲚取材装置及操作；2)样品低渗、固定和解离；3)滴片装置及操作；4)染色；所述的凤鲚取材装置：所述凤鲚取材装置包括一个带盖泡沫箱，泡沫箱内容积至少5L，泡沫箱壁厚度2cm～8cm，箱内空间分隔成2部分，一部分为储物区，放置取材器具，另一部分为冷冻区，放置冰袋或冰瓶，该区放置一瓶20～100ml秋水仙素母液、一个空的100～250ml固定液瓶、一个10～50ml解离液瓶，1个10ml离心管架；箱中所有试剂瓶都坐进相近大小的样品袋中，样品袋中放置1～2个2ml或3ml带刻度的一次性滴管；凤鲚取材操作为捕捞出凤鲚后...
【技术特征摘要】
1.一种简易的凤鲚染色体制备的方法，其特征在于所述方法包括：1)凤鲚取材装置及操作；2)样品低渗、固定和解离；3)滴片装置及操作；4)染色；所述的凤鲚取材装置：所述凤鲚取材装置包括一个带盖泡沫箱，泡沫箱内容积至少5L，泡沫箱壁厚度2cm～8cm，箱内空间分隔成2部分，一部分为储物区，放置取材器具，另一部分为冷冻区，放置冰袋或冰瓶，该区放置一瓶20～100ml秋水仙素母液、一个空的100～250ml固定液瓶、一个10～50ml解离液瓶，1个10ml离心管架；箱中所有试剂瓶都坐进相近大小的样品袋中，样品袋中放置1～2个2ml或3ml带刻度的一次性滴管；凤鲚取材操作为捕捞出凤鲚后，迅速挑选性腺饱满、仍有活力、体长12～16cm的成鱼，用镊子揭开鳃盖，剪取部分鳃丝，立刻投入提前配制好的0.04％秋水仙素溶液中，所述0.04％秋水仙素溶液含体积比50％当地过滤海水，所述秋水仙素溶液放置在10ml离心管中，所述10ml离心管放置10ml试管架上，并放置在泡沫箱盖上30min；此时，将储物区的工具从泡沫箱中取出，放置在泡沫箱盖上，泡沫箱盖盖在泡沫箱上；秋水仙素处理期间，测量并记录已被取样的凤鲚体长，解剖性腺或挤压腹部，观察生殖液状态以鉴别凤鲚性别；所述的样品低渗、固定和解离：固定和解离的操作在凤鲚取材装置的冷冻区进行；秋水仙素处理组织样品之后，将样品置于低渗溶液中，低渗处理45～60min；期间上下颠倒离心管数次，确保低渗充分；低渗期间配置固定液和解离液放入泡沫箱的冷冻区冷藏；所述固定液为无水乙醇或甲醇与冰醋酸的体积比为3：1的混合液；所述解离液为冰醋酸与蒸馏水体积比1：1的混合液；将10ml离心管架和1.5ml离心管架放到冷冻区预冷；组织样品低渗结束后，弃去低渗溶液，加入固定溶液，固定15min，固定的样品管插入冷冻区试管架上，盖上泡沫箱盖，确保整个固定过程都在冷冻区进行；固定液量需完全浸没组织；15min之后，弃去固定液，然后更换新的预冷的固定液，再次固定15min，固定的样品管依旧插入冷冻区试管架上，盖上泡沫箱盖，重复此固定步骤3～4次，样品固定充分；将组织样品放入1.5ml预冷的离心管中，离心管中加有0.5～1.5ml预冷的解离液，然后放入冷冻区或4℃冰箱中解离；所述滴片装置...
【专利技术属性】
技术研发人员：周丽青，赵峰，杨爱国，刘志鸿，吴彪，宋超，孙秀俊，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院黄海水产研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37
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