The present invention provides a lentivirus vector, a lentivirus and its preparation method and application. The lentivirus vector includes gene fragments composed of gene elements, which are sequentially linked in the following order: TMEM119 promoter, iCre gene, Cx3cr1 promoter, loxP site, DsRed gene and EGFP gene. The lentivirus of the invention can specifically label microglia in vivo, accurately distinguish microglia from other cells in real time, and is of great significance in studying the development, behavior and function of microglia.
【技术实现步骤摘要】
一种慢病毒载体、慢病毒及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，涉及一种慢病毒载体、慢病毒及其制备方法和应用，尤其涉及一种特异性活体标记小胶质细胞的慢病毒及其制备方法和应用。
技术介绍
小胶质细胞(microglia)是中枢神经系统最小的神经胶质细胞，分布于整个中枢神经系统，约占胶质细胞总数的5％-10％。作为常驻中枢神经系统的免疫效应细胞，小胶质细胞隶属于单核吞噬细胞族，被认为是中枢神经系统的主要免疫效应器。小胶质细胞及其介导的神经炎症在中枢神经系统的损伤及疾病的转归过程中起着非常重要的作用，参与诸如HIV脑病、帕金森病、阿尔兹海默病和多发性硬化等人神经系统紊乱疾病。Cre重组酶是一种来源于P1噬菌体的位点特异性络氨酸重组酶，属于λ整合酶超家族，由一个五价物[Arg-Lys-(His/Lys)-Arg-(His/Trp)]协助催化DNA重组过程中DNA链的断裂和重连，cre插入内含子后形成icre。loxP位点是一段总长度为34bp的反向重复DNA序列，Cre重组酶介导两个loxP位点之间的重组，而且，两个loxP位点的方向和位置可以造成重组后的三种结果：...
【技术保护点】
1.一种慢病毒载体，其特征在于，包括基因元件组成的基因片段，所述基因元件按以下顺序顺次连接：TMEM119启动子、iCre基因、Cx3cr1启动子、loxP位点、DsRed基因和EGFP基因。
【技术特征摘要】
1.一种慢病毒载体，其特征在于，包括基因元件组成的基因片段，所述基因元件按以下顺序顺次连接：TMEM119启动子、iCre基因、Cx3cr1启动子、loxP位点、DsRed基因和EGFP基因。2.根据权利要求1所述的慢病毒载体，其特征在于，所述慢病毒载体的基因片段的核酸序列如SEQIDNO.1所示。3.一种慢病毒，其特征在于，所述慢病毒包括如权利要求1或2所述的慢病毒载体。4.根据权利要求3所述的慢病毒，其特征在于，所述慢病毒转入小胶质细胞中，TMEM119启动子阳性，启动iCre基因表达，loxP位点重组，Cx3cr1启动子阳性，启动EGFP基因表达，小胶质细胞被标记绿色荧光；优选地，所述慢病毒转入血液循环系统来源的巨噬细胞中，TMEM119启动子阴性，不启动iCre基因表达，loxP位点不重组，Cx3cr1启动子阳性，启动DsRed基因表达，巨噬细胞被标记红色荧光；优选地，所述慢病毒转入不包括小胶质细胞的中枢神经系统的细胞中，TMEM119启动子阴性，不启动iCre基因表达，loxP位点不重组，Cx3cr1启动子阴性，不启动DsRed基因表达，细胞无荧光。5.一种制备如权利要求3或4所述慢病毒的方法，其特征在于，包括如下...
【专利技术属性】
技术研发人员：詹阳，龚根承，吕泽中，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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