一种提高植物生根率的无糖组培方法技术

本发明专利技术提供了一种提高植物生根率的无糖组培方法，可提高瓶苗的生根率及成活率。该方法包括准备瓶苗、组培瓶、培养盒及气管、准备基质和培养液、填装培养盒、栽苗、无糖室培养、炼苗。本发明专利技术中无糖组培方法操作规范，培养基中不添加有机物，添加有植物组织培养专用抑菌剂，大大改善瓶苗生长环境，有利于瓶苗生根、生长，提高瓶苗的成活率。

A Sugar-free Tissue Culture Method for Improving Root Rate of Plants

The invention provides a sugar-free tissue culture method for improving plant rooting rate, which can improve the rooting rate and survival rate of bottle seedlings. The method includes preparing bottle seedlings, tissue culture bottles, culture boxes and trachea, preparing medium and culture medium, filling culture boxes, planting seedlings, sugar-free room culture and seedling refining. The Sugar-free Tissue culture method in the present invention is operated in a standard way, and the medium does not contain organic substances, and special bacteriostatic agent for plant tissue culture is added, which greatly improves the growth environment of bottle seedlings, is conducive to the rooting and growth of bottle seedlings, and improves the survival rate of bottle seedlings.

【技术实现步骤摘要】
一种提高植物生根率的无糖组培方法
本专利技术属于无糖培养微繁殖，具体涉及一种提高植物生根率的无糖组培方法。
技术介绍
植物无糖组培技术是以CO2替代培养基中的糖作为碳源，采用人工控制植物生长环境的手段，为植物提供适宜的生长环境，其具有培养周期短、地区及季节不受限等优点，得到广泛应用，但植物无糖组培技术在实施中仍存在一些问题，比如由于组培方法不规范、培养基易污染等原因影响瓶苗生根，从而降低了瓶苗的成活率。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了提高瓶苗的生根率及成活率，而提供一种植物无糖组培方法。为实现上述专利技术目的，具体技术方案如下：一种提高植物生根率的无糖组培方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：1)准备培养盒及瓶苗；所述培养盒上开设有一个或多个透气孔；2)材料准备2.1)向蛭石中加水拌匀后装袋，高压蒸汽灭菌，制成基质；2.2)在不含有机物的1/2MS培养基中加入植物组织培养专用抑菌剂，并分装入瓶中，高压蒸汽灭菌，制成培养液；3)将基质分装至培养盒中，倒入培养液，要求培养液不淹没基质；4)将瓶苗切分后接种至培养盒中；5)将培养盒置于无糖培养室中按以下步骤进行培养：5.1)第1天，用保鲜膜将透气孔密封，黑暗培养；5.2)第2天起，光照强度3800lx～4200lx(开2盏18W的植物生长灯)，温度25℃±2℃，光照周期：光培养阶段14h±2h，其余时间黑暗；5.3)第3天起，取掉保鲜膜，其余条件不变；5.4)第5天起，光照强度5100lx～5400lx(开3盏18W的植物生长灯)，温度不变，光照周期不变；5.5)第10天起，光照强度6400lx～6500lx(开4盏18W的植物生长灯)，温度不变，光照周期不变；并且开始向无糖培养室内通CO2气体，保持室内CO2浓度800ppm～1500ppm；并向培养盒中插入气管，在光培养阶段以300ml/min±100ml/min的气体流量(分流头的角度约为45°)向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气15min±5min；5.6)第25天起，在光培养阶段以1000ml/min±100ml/min的气体流量(分流头的角度约为90°)向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气30min±5min，其余条件不变；5.7)第40-50天将培养盒中的组培苗陆续转移至炼苗温室；6)在炼苗温室，将组培苗移栽穴盘或降解袋中进行炼苗。进一步地，所述2.2)中，还包括向培养基中按0.5mg/L-1.0mg/L的标准加入IAA(吲哚-3-乙酸)，以促进较弱的瓶苗生长，加强正常瓶苗生长，提高瓶苗的成活率。进一步地，所述2.2)中，所述植物组织培养专用抑菌剂按0.3g/L～1.0g/L的标准加入，植物组织培养专用抑菌剂可购买由上海离草科技有限公司生产的产品。进一步地，所述3)中，向培养盒中加入培养液的量按以下比例进行换算：每400g～450g的蛭石中加入900ml～1100ml的培养液。比如，每400g～450g的蛭石中可加入900ml～1100ml的培养液，优选1000ml；按照此比例添加培养液，既不会淹没基质，又可将瓶苗很好的固定在培养盒中，利于瓶苗稳固生根。进一步地，所述2.1)中，蛭石的粒径为3mm～8mm，该粒径范围内的蛭石比较适宜瓶苗生长。进一步地，所述2.1)和2.2)中，高压蒸汽灭菌具体是采用高压蒸汽灭菌锅于121℃±3℃下保持20min±5min，优选121℃下保持20min。进一步地，所述4)中，瓶苗为质量好、未污染的大苗，尽量不要接种小苗和玻璃化苗；瓶苗切分后按每盒100株～150株的规模接种。进一步地，所述2.1)中，蛭石中加入水的质量占总质量的35％～55％，优选55％；比如，向650g蛭石中加入350g的水，使得水的质量分数为35％；或者，向500g蛭石中加入500g的水，使得水的质量分数为50％；进一步地，所述培养盒、气管均要清洗干净(可使用清洁剂清洗)，置于鼓风干燥箱中，在60℃下烘干备用。优选地，所述2.2)中，向培养基中按0.67g/L的标准加入植物组织培养专用抑菌剂，按照该浓度添加，在不影响瓶苗生根生长的情况下，抑菌效果最佳，生长环境较好；按0.8mg/L的标准加入IAA。优选地，所述5.2)～5.6)中，温度25℃，光照周期：光培养阶段14h，其余时间黑暗；所述5.5)中，第10天起，保持室内CO2浓度1300ppm；并向培养盒中插入气管，在光培养阶段以400ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气15min；所述5.6)中，第25天起，保持室内CO2浓度1300ppm；并向培养盒中插入气管，在光培养阶段以1000ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气30min。本专利技术的有益效果是：1.本专利技术的无糖组培方法操作规范，培养基中不添加有机物，添加有植物组织培养专用抑菌剂，大大改善瓶苗生长环境，有利于瓶苗生根、生长，提高瓶苗的成活率；同时，本专利技术中使用的培养盒上开设有透气孔，可避免因通气不良而造成瓶苗玻璃化、畸形等现象。2.本专利技术中向培养基中添加IAA，可促进较弱的瓶苗生长，加强正常瓶苗生长，提高瓶苗的成活率。3.随着瓶苗的生长，逐渐提高至适合其生长的光照强度，循序渐进地为瓶苗营造优良的生长环境；在接后第10天开始，保持室内CO2的浓度维持在800ppm～1500ppm，并定时定量地向培养盒中泵入CO2，满足自养需求，自身进行光合作用，合成自身需要的营养物质促进生长，提高瓶苗生根率和成活率。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术的内容作进一步的详细描述：实施例一一种植物无糖组培方法，包括以下步骤：1)准备瓶苗和洁净、干燥的组培瓶、培养盒、气管将组培瓶、培养盒和气管均用清洁剂清洗干净，置于鼓风干燥箱中在60℃下烘干备用；使用开设有6个透气孔的培养盒；2)材料准备2.1)采用粒径为3mm～8mm蛭石作为基质，向蛭石中加水，使得水的质量百分比为55％，拌匀后装入帆布袋中，采用高压蒸汽灭菌锅于121℃下保持20min；2.2)在不含有机物的1/2MS培养基中，按0.67g/L的标准加入植物组织培养专用抑菌剂，按0.8mg/L的标准加入IAA；分装入组培瓶中，采用高压蒸汽灭菌锅于121℃下保持20min，制成培养液；3)将基质分装至培养盒中，并按照每420g的蛭石中加入1000ml培养液的标准倒入培养液，此时，培养液未能淹没基质；4)将瓶苗切分后，选择质量好、无污染的大苗接种至培养盒中，每盒接100株～150株；5)将培养盒置于无糖培养室中按以下步骤进行培养：5.1)第1天，用保鲜膜将透气孔密封，黑暗培养；5.2)第2天起，光照强度3800lx～4200lx，温度25℃，光照周期：光培养阶段14h，其余时间黑暗；5.3)第3天起，取掉保鲜膜，其余条件不变；5.4)第5天起，光照强度5100lx～5400lx，温度不变，光照周期不变；5.5)第10天起，光照强度6400lx～6500lx，温度不变，光照周期不变；并且开始向无糖培养室内通CO2气体，保持室内CO2浓度1300ppm；向培养盒中插入气管，在光培养阶段以400ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气15min，即，光培养阶段向各培养盒中进行14次泵气，每本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高植物生根率的无糖组培方法，其特征在于，包括以下步骤：1)准备培养盒及瓶苗；所述培养盒上开设有一个或多个透气孔；2)材料准备2.1)向蛭石中加水拌匀后装袋，高压蒸汽灭菌，制成基质；2.2)在不含有机物的1/2MS培养基中加入植物组织培养专用抑菌剂，并分装入瓶中，高压蒸汽灭菌，制成培养液；3)将基质分装至培养盒中，倒入培养液，要求培养液不淹没基质；4)将瓶苗切分后接种至培养盒中；5)将培养盒置于无糖培养室中按以下步骤进行培养：5.1)第1天，用保鲜膜将透气孔密封，黑暗培养；5.2)第2天起，光照强度3800lx～4200lx，温度25℃±2℃，光照周期：光培养阶段14h±2h，其余时间黑暗；5.3)第3天起，取掉保鲜膜，其余条件不变；5.4)第5天起，光照强度5100lx～5400lx，温度不变，光照周期不变；5.5)第10天起，光照强度6400lx～6500lx，温度不变，光照周期不变；并且开始向无糖培养室内通CO2气体，保持室内CO2浓度800ppm～1500ppm；并向培养盒中插入气管，在光培养阶段以300ml/min±100ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气15min±5min；5.6)第25天起，在光培养阶段以1000ml/min±100ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气30min±5min，其余条件不变；5.7)第40‑50天将培养盒中的组培苗陆续转移至炼苗温室；6)在炼苗温室，将组培苗移栽穴盘或降解袋中进行炼苗。...

【技术特征摘要】
1.一种提高植物生根率的无糖组培方法，其特征在于，包括以下步骤：1)准备培养盒及瓶苗；所述培养盒上开设有一个或多个透气孔；2)材料准备2.1)向蛭石中加水拌匀后装袋，高压蒸汽灭菌，制成基质；2.2)在不含有机物的1/2MS培养基中加入植物组织培养专用抑菌剂，并分装入瓶中，高压蒸汽灭菌，制成培养液；3)将基质分装至培养盒中，倒入培养液，要求培养液不淹没基质；4)将瓶苗切分后接种至培养盒中；5)将培养盒置于无糖培养室中按以下步骤进行培养：5.1)第1天，用保鲜膜将透气孔密封，黑暗培养；5.2)第2天起，光照强度3800lx～4200lx，温度25℃±2℃，光照周期：光培养阶段14h±2h，其余时间黑暗；5.3)第3天起，取掉保鲜膜，其余条件不变；5.4)第5天起，光照强度5100lx～5400lx，温度不变，光照周期不变；5.5)第10天起，光照强度6400lx～6500lx，温度不变，光照周期不变；并且开始向无糖培养室内通CO2气体，保持室内CO2浓度800ppm～1500ppm；并向培养盒中插入气管，在光培养阶段以300ml/min±100ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气15min±5min；5.6)第25天起，在光培养阶段以1000ml/min±100ml/min的气体流量向各培养盒中通入CO2气体，每小时通气30min±5min，其余条件不变；5.7)第40-50天将培养盒中的组培苗陆续转移至炼苗温室；6)在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王忠景，郭瑶，靳海燕，郑燕青，孙彪，孙维维，高天喜，程娜，
申请(专利权)人：陕西海棠生态农林股份有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61