柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)导致的认知障碍药物中的应用。本发明专利技术利用8月龄APP/PS‑1转基因鼠，进行柠檬提取物吸嗅，在处理前/后对小鼠的认知功能及相关分子marker进行检查。发现APP/PS‑1转基因鼠进行柠檬提取物吸嗅后，学习记忆能力明显改善；且与突触后致密蛋白95(PSD95)、突触素1(Synapsin‑1)的表达增强相关。提示柠檬提取物增强突触重塑作用，对AD的认知障碍和神经损伤情况具有改善和保护作用。柠檬提取物作为传统芳香疗法对于AD病人具有预防保护作用，适合改善由AD引起的记忆力减退、学习能力降低等认知障碍，具有极大的应用价值。

Application of lemon extract in the preparation of drugs for preventing or treating cognitive impairment caused by Alzheimer's disease

The invention discloses the application of lemon extract in the preparation of drugs for preventing or treating cognitive impairment caused by Alzheimer's Disease (AD). The present invention uses 8-month-old APP/PS 1 transgenic mice to sniff lemon extract, and inspects the cognitive function and related molecular marker of mice before and after treatment. It was found that the learning and memory abilities of APP/PS_1 transgenic mice were significantly improved after sniffing lemon extract, which was related to the increased expression of postsynaptic dense protein 95 (PSD95) and synapsin_1 (Synapsin 1). These results suggest that lemon extract can enhance synaptic remodeling, improve and protect AD cognitive impairment and neurological damage. As a traditional aromatherapy, lemon extract has preventive and protective effects on AD patients. It is suitable for improving cognitive impairment caused by AD, such as memory impairment and learning impairment. It has great application value.

【技术实现步骤摘要】
柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍药物中的应用
本专利技术涉及柠檬提取物的新用途，特别涉及柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病造成认知障碍药物中的用途。本专利技术属于医药

技术介绍
柠檬是民间药物，味酸性凉，具有止渴生津、提神醒脑、祛湿安胎的功效，用于多种类疾病的治疗，例如咽痛口干、减肥，高血压，胃脘胀气，心肌梗塞等。《本草纲目》中提及陈皮(柑橘)“同补药则补；同泻药则泻；同升药则升；同降药则降。”可见远在古代，人们就已经认识到柑橘类的药用价值了。现代研究也表明柠檬具有杀菌、防治结石、预防心血管疾病、提高凝血功能、止血等方面的药理活性。实验显示，酯度极强的柠檬汁在15min内可把活海生贝壳内所有的细菌杀死。此外，柠檬酸有收缩、增固毛细血管，降低通透性，提高凝血功能及血小板数量的作用，可缩短凝血时间和出血时间，具有止血作用。目前，随着老龄化增长，阿尔茨海默病(Alzheimer’sDisease,AD)AD已经成为一个严重的公共健康问题，给个人、家庭、社会带来诸多的不便。AD是起病隐匿的神经系统退行性疾病，病理表现为脑萎缩、淀粉样变以及神经纤维缠结，是导致老年痴呆的主要病因。在发达国家AD是老年人的第四大死因；在中国，85岁以上的高龄老人的AD发病率为20％，预计到2050年人数将从目前的900万增至3000万。由于疾病中晚期的干预及治疗难以逆转病情，所以要在疾病早期尽可能进行干预和治疗。本专利技术提出了柠檬提取物用于改善APP/PS-1转基因鼠的神经损伤及认知障碍的新用途，柠檬提取物用于AD疗效确切、毒副作用低、成本低廉、易于操作且易保存，本专利技术的提出为AD患者提供了一种新的备选药物。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新的药物用于预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍。为了达到上述目的，本专利技术采用的技术手段为：APP/PS-1双转基因鼠是一种用以研究AD致病机制的转基因小鼠模型，其具有认知功能障碍并伴随神经损伤。本专利技术利用APP/PS-1双转基因鼠模型，随机分为两组，即空白组(A-8-N)，柠檬提取物吸嗅组(A-8-O)，利用水迷宫实验检测小鼠认知功能情况。取各组小鼠大脑海马区组织，并提取蛋白质，利用Westernblot实验检测各组小鼠海马中突触后致密蛋白95(PSD95)、突触素1(Synapsin-1)的表达情况。取各组小鼠大脑组织并固定，利用免疫组化实验检测各组小鼠海马中乙酰胆碱酯酶(AChE)的表达情况。水迷宫实验结果表明8月龄APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组与未处理组相比，在平台象限停留时间、穿越平台次数上，前者相对于后者明显增多，表明柠檬提取物能有效改善APP/PS-1转基因鼠的认知功能障碍。Westernblot实验结果表明APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组海马中Synapsin-1、PSD95的表达较未处理组明显增高，表明柠檬提取物能够促进突触重塑，改善AD造成的神经损伤。免疫组化实验结果表明APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物处理组与未处理组相比，前者海马中的AChE表达明显下降。AChE能够水解与记忆相关的乙酰胆碱(Ach)，AChE在多种神经退行性疾病中的异常增多会导致认知功能障碍。该结果说明柠檬提取物对APP/PS-1转基因鼠的记忆损伤具有改善作用。因此，在上述研究的基础上，本专利技术提出了柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍药物中的应用。其中，优选的，所述的柠檬提取物是通过柠檬果皮蒸汽蒸馏法获得。其中，优选的，所述的蒸汽蒸馏法是首先利用水蒸气将柠檬果皮中挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，再用二氯甲烷萃取，蒸去二氯甲烷后获得所述的柠檬提取物。所述的柠檬提取物可自行提取制备或直接购买自市场，例如可购买自上海源叶生物科技有限公司。其中，优选的，所述的柠檬提取物通过促进突触重塑，改善AD造成的神经损伤、降低海马中的AChE表达来达到预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍的目的。其中，优选的，所述的认知障碍包括记忆力减退、学习能力减弱等。相较于现有技术，本专利技术的有益效果是：本专利技术提出了一种可用于预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍的新的备选药物。实验证明柠檬提取物作为潜在的芳香疗法药物，对AD患者的记忆力减退、学习能力减弱等认知障碍具有很好的预防保护作用，因此，柠檬提取物在预防或治疗阿尔茨海默病领域将具有广阔的应用前景。附图说明图1为水迷宫实验结果；其中：(A)逃避潜伏期，(B)目标象限与其他象限平均停留时间百分比，(C)游泳速度，(D)目标象限的游泳距离。A-8-N表示8月龄APP/PS-1转基因鼠未处理组，A-8-O表示8月龄APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组。图2为水迷宫空间探索实验小鼠游泳轨迹；其中：A-8-N表示8月龄APP/PS-1转基因鼠未处理组，A-8-O表示8月龄APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组。图3为WB检测小鼠海马中的PSD95表达量；其中：(A)WB实验检测PSD95表达量结果，(B)表达量的统计数据，P<0.05；图4为WB检测小鼠海马中的Synapsin-1；其中：(A)WB实验检测Synapsin-1表达量结果，(B)表达量的统计数据，P<0.05；A-8-N表示8月龄APP/PS-1转基因鼠未处理组，A-8-O表示8月龄APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组。图5为免疫组化检测AChE表达量；其中：(A)海马区AChE阳性神经元表达，(B)AChE阳性神经元表达的统计数据，P<0.05；A-8-N表示8月龄APP/PS-1转基因鼠未处理组，A-8-O表示8月龄APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组。图6为免疫组化检测PSD95。其中：(A)PSD95阳性神经元表达，(B)PSD95阳性神经元表达的统计数据，P<0.05。A-8-N表示8月龄APP/PS-1转基因鼠未处理组，A-8-O表示8月龄APP/PS-1转基因鼠柠檬提取物吸嗅组。具体实施方式下面结合具体实施例和附图来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实施例1柠檬提取物的制备柠檬提取物通过柠檬果皮蒸汽蒸馏法获得，得到的精油颜色是浅黄色的，带有植物的特征性的果香。首先利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，再用二氯甲烷萃取，蒸去二氯甲烷后获得精油，其中，90％以上的成分为柠檬烯。常温避光保存备用。所述的柠檬提取物可自行提取制备或直接购买自市场，例如可购买自上海源叶生物科技有限公司。实施例2柠檬提取物在预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍中的应用1.准备实验动物8月龄SPF级雄性APP/PS-1转基因小鼠，购于北京维通利华公司。分笼饲养于哈尔滨医科大学实验动物中心。适应性喂养1周，每笼5只群养。APP/PS-1转基因鼠可表达突变的人类早老素和淀粉样前蛋白，6-7月龄脑内会形成β-淀粉样蛋白沉淀。将动物随机分为两组：空白组(A-8-N)5只，柠檬提取物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.柠檬提取物在制备预防或治疗阿尔茨海默病导致的认知障碍药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的柠檬提取物是通过柠檬果皮蒸汽蒸馏法获得。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的蒸汽蒸馏法是首先利用水蒸气将柠檬果皮中挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，再用二氯甲烷...

【专利技术属性】
技术研发人员：高旭，韩冬，马宁，王猛，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23