lncRNA和lncRNA抑制剂的应用及应用其的产品制造技术

本发明专利技术提供了一种lncRNA和lncRNA抑制剂的应用及应用其的产品，涉及生物医学工程技术领域。本发明专利技术提供的lncRNA，含有SEQ ID NO.1所示的序列，在H2O2处理的HA‑VSMC细胞中表达量增加；而且，lncRNA能够促进小鼠原代血管平滑肌细胞的凋亡，并且能够促进动脉粥样硬化炎症的发生和粥样斑块的大小和数量；而lncRNA抑制剂能够使细胞死亡率降低，经lncRNA抑制剂处理的细胞中抗凋亡蛋白Bcl‑2表达增加。因此，lncRNA可以作为一种新的生物标志物，应用于动脉粥样硬化的诊断和/或预后评估；而与之相应的lncRNA抑制剂，可以作为一种新型的药物用于动脉粥样硬化的预防和/或治疗。

Application and products of lncRNA and lncRNA inhibitors

The invention provides an application and application product of lncRNA and lncRNA inhibitor, which relates to the field of Biomedical Engineering technology. The lncRNA provided by the invention contains the sequence shown in SEQ ID NO.1 and increases the expression in HA_VSMC cells treated with H_2O_2; furthermore, lncRNA can promote the apoptosis of primary vascular smooth muscle cells in mice, and can promote the occurrence of atherosclerotic inflammation and the size and number of atherosclerotic plaques; and lncRNA inhibitors can reduce cell mortality and pass through lncRNA inhibitors. The expression of anti-apoptotic protein Bcl_2 was increased in Lychoblastic cells. Therefore, lncRNA can be used as a new biomarker for the diagnosis and/or prognosis evaluation of atherosclerosis, and the corresponding lncRNA inhibitors can be used as a new drug for the prevention and/or treatment of atherosclerosis.

【技术实现步骤摘要】
lncRNA和lncRNA抑制剂的应用及应用其的产品
本专利技术涉及生物医学工程
，尤其是涉及一种lncRNA和lncRNA抑制剂的应用及应用其的产品。
技术介绍
目前，心血管疾病是导致人类死亡的第一杀手，动脉粥样硬化斑块破裂所致的缺血性心脏病是导致死亡的主要原因。如何早期预测动脉粥样硬化斑块破裂和干预血栓形成是目前医学和生物学研究亟待解决的难题。非编码长链RNA(longnon-codingRNA，lncRNA)是一类广泛存在于真核生物、长度为大于200的非蛋白质编码RNA，它们能以序列特异性方式调节基因表达，在发育、凋亡、代谢以及人类疾病方面都起着不容忽视的作用。lncRNA的生理病理调控机制是近几年来受到高度重视的一门新型学科。lncRNA在心血管疾病，尤其是动脉粥状硬化中的应用，仍处于研发阶段，需要不断的探索和研究。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供lncRNA的应用，本专利技术的第二个目的在于提供用于特异性检测lncRNA的引物的应用，本专利技术的第三个目的在于提供一种用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒，本专利技术的第四个目的在于提供lncRNA抑制剂的应用，本专利技术的第五个目的在于提供一种用于预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物，以缓解现有技术中存在的动脉粥状硬化相关lncRNA研究不足的现状。本专利技术提供了lncRNA在制备用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒中的应用，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。另外，本专利技术还提供了用于特异性检测lncRNA的引物在制备用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒中的应用，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。进一步的，所述用于特异性检测lncRNA的引物为：lncRNA-F：5’-CCGGAATTCCGGAGCGCCTAGGAGCCC-3’(SEQIDNO.2)；lncRNA-R：5’-CCGCTCGAGTTAAAATCCTTTGGT-3’(SEQIDNO.3)。另外，本专利技术还提供了一种用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒，所述试剂盒包括用于特异性检测lncRNA的引物，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。进一步的，所述用于特异性检测lncRNA的引物为：lncRNA-F：5’-CCGGAATTCCGGAGCGCCTAGGAGCCC-3’(SEQIDNO.2)；lncRNA-R：5’-CCGCTCGAGTTAAAATCCTTTGGT-3’(SEQIDNO.3)。另外，本专利技术还提供了lncRNA抑制剂制备用于预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物中的应用，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。进一步的，所述lncRNA抑制剂为所述lncRNA的寡核苷酸衍生物，所述寡核苷酸衍生物中的β-D-呋喃核糖的2'-O、4’-C位可通过缩水作用形成刚性结构。另外，本专利技术还提供了一种用于预防和/或治疗动脉粥样硬化的药物，所述药物包括lncRNA抑制剂，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。进一步的，所述lncRNA抑制剂为所述lncRNA的寡核苷酸衍生物；优选地，所述lncRNA抑制剂具有如SEQIDNO.4所示的序列。进一步的，所述药物的给药方式包括口服给药或者注射给药；优选地，所述注射给药包括静脉注射、肌肉注射、或者冠状动脉内注射。本专利技术提供的lncRNA在H2O2处理的HA-VSMC细胞中表达量增加，并且westenblotting技术测定细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少；而且，lncRNA质粒转染扩增的腺病毒灌注，能够促进小鼠原代血管平滑肌细胞的凋亡，并且能够促进动脉粥样硬化炎症的发生和粥样斑块的大小和数量；而lncRNA抑制剂能够使细胞死亡率降低，且经检测发现，经lncRNA抑制剂处理的细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加。因此，lncRNA可以作为一种新的生物标志物，应用于动脉粥样硬化的诊断和/或预后评估；而与之相应的lncRNA抑制剂，可以作为一种新型的药物用于动脉粥样硬化的预防和/或治疗。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1提供的lncRNA-punisher在动脉粥样硬化模型小鼠中主动脉的表达情况结果图；图2为本专利技术实施例1提供的lncRNA-punisher在动脉粥样硬化临床样本中的表达情况结果图；图3A为本专利技术实施例2提供的采用细胞流式法测定对照组HA-VSMC细胞的凋亡率的结果图；图3B为本专利技术实施例2提供的采用细胞流式法测定lncRNA-Punisher抑制组HA-VSMC细胞的凋亡率的结果图；图3C为本专利技术实施例2提供的采用细胞流式法测定HA-VSMC细胞的凋亡率的统计结果图；图4为本专利技术实施例3提供的采用CCK8法测定HA-VSMC细胞的增殖率的结果图；图5A为本专利技术实施例3提供的细胞划痕实验结果图；图5B为本专利技术实施例3提供的利用ImageJ计算迁移面积的分析结果图；图6A为本专利技术实施例2提供的采用westenblotting技术检测lncRNA-Punisher抑制剂对HA-VSMC细胞中BcL-2蛋白表达的影响的WB结果图；图6B为本专利技术实施例2提供的采用westenblotting技术检测lncRNA-Punisher抑制剂对HA-VSMC细胞中BcL-2蛋白表达的影响的WB条带灰度值的结果图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术中涉及的lncRNA可以为：与SEQIDNO.1所示序列完全相同的序列，或者含有SEQIDNO.1所示序列的序列，或者SEQIDNO.1所示序列的生物活性功能片段，或者SEQIDNO.1所示序列的变体。凡是具备SEQIDNO.1所示序列功能的序列，都应当理解为本专利技术的保护范围，而不应当仅理解为与SEQIDNO.1所示序列完全相同的序列。其中，SEQIDNO.1所示的序列为：AGCGCCTAGGAGCCCGTACCGCTGGGGACCTCCCCTTCCGCGAACCCCGAGCGGGTAGACCCAGAGCAATCCGAGTGTGGAAACAATGGAGAGGGGGCGTGTTGAGCTGGGGTCTCCATGCCTCGTTGGGGAGAGGGAGCTCACGTACCCACAGCAGCAGTTGCGTGATGACGACGTGGGCGAGCTCGGCCGCCAGGTGGAGTGGGGAGCGCAGCTGTGGGTCCTCTACGCTGGTGTCGAGCGGCCCGTGTCGCGCATGGGCCAAAAGCAGGAGAACGGTAGCCACGTCCTGGGCCTGCACGGCGGCCCACAGCTGGCGGCCCAGCGGCTCCTCCGAG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.lncRNA在制备用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒中的应用，其特征在于，所述lncRNA含有SEQ ID NO.1所示的序列。

【技术特征摘要】
1.lncRNA在制备用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒中的应用，其特征在于，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。2.用于特异性检测lncRNA的引物在制备用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒中的应用，其特征在于，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用于特异性检测lncRNA的引物为：lncRNA-F：5’-CCGGAATTCCGGAGCGCCTAGGAGCCC-3’(SEQIDNO.2)；lncRNA-R：5’-CCGCTCGAGTTAAAATCCTTTGGT-3’(SEQIDNO.3)。4.一种用于诊断和/或预后评估动脉粥样硬化的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于特异性检测lncRNA的引物，所述lncRNA含有SEQIDNO.1所示的序列。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述用于特异性检测lncRNA的引物为：lncRNA-F：5’-CCGGAATTCCGGAGCGCCTAGGAGCCC-3’(SEQIDNO.2)；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李培峰，于涛，杨艳艳，
申请(专利权)人：青岛大学，
类型：发明
国别省市：山东,37