The invention relates to a preparation method of Chlorella polysaccharide, which is carried out in the following steps: wall breaking, membrane filtration, elution and water freeze-drying. The method for extracting and preparing Chlorella polysaccharides of the invention has the advantages that the content of the extracted Chlorella polysaccharides is much higher than that of the conventional method, and the content of other components and impurities is also lower than that of the conventional extraction method.
【技术实现步骤摘要】
一种小球藻多糖的制备方法
本专利技术涉及一种提取物的制备方法，特别是一种小球藻多糖的制备方法。
技术介绍
小球藻是一类普生性单细胞绿藻，含有丰富的蛋白质、多糖、脂质、叶绿素、维生素、微量元素和一些生物活性代谢产物，有“药物藻类”之美誉l1J。有研究表明，小球藻干粉或其提取物能使免疫低下小鼠的细胞免疫功能有所恢复。Tanaka等报道小球藻提取物在小鼠抗肿瘤MethA的作用中，需要抑制性T淋巴细胞的参与，即通过淋巴器官中T细胞的活化，并增强肿瘤部位T细胞的补充来抑制肿瘤转移。Hasegawa等l5I研究给予白血病小鼠小球藻后，可恢复其对单核增生李斯特氏菌的清除力，感染部位的T细胞数目增加。多糖是小球藻提取液中主要的活性成分之一，在抗肿瘤、抗病源菌、抗病毒方面具有显著效果。
技术实现思路
一种小球藻多糖的制备方法，其按以下步骤进行：1)准确称取小球藻粉末20g溶于400mL水中，在室温下不断搅拌溶胀4h；2)在47℃环境中向小球藻溶液中缓慢加入NaOH粉末至NaOH浓度达到4%，并不断搅拌；3)在47℃环境中，超声-碱液破壁25min，调节pH至7，2000rpm离心20min，取上清液，4℃冷却后备用；4)于4℃环境中，加入4倍体积于上清液的冰镇95%乙醇，持续搅拌1min，静置5h，2000rpm离心20min，去上清液，去除沉淀残余表面酒精，收集沉淀，用0.1mol/LpH=6的PBS溶液溶解沉淀，4℃保存备用；5)加入复合风味蛋白酶，50℃环境中酶解5h，期间每半小时调节pH为6；6)将酶解液置于沸水中15min，8000rpm离心10min，取上清液，于旋...
【技术保护点】
1.一种小球藻多糖的制备方法，其按以下步骤进行：1) 准确称取小球藻粉末20 g溶于400 mL水中，在室温下不断搅拌溶胀4 h；2) 在47℃环境中向小球藻溶液中缓慢加入NaOH粉末至NaOH浓度达到4%，并不断搅拌；3) 在47℃环境中，超声‑碱液破壁25 min，调节pH至7，2000 rpm离心20 min，取上清液，4℃冷却后备用；4) 于4℃环境中，加入4倍体积于上清液的冰镇95%乙醇，持续搅拌1 min，静置5 h，2000 rpm离心20 min，去上清液，去除沉淀残余表面酒精，收集沉淀，用0.1 mol/L pH=6的PBS溶液溶解沉淀，4℃保存备用；5)加入复合风味蛋白酶，50℃环境中酶解5 h，期间每半小时调节pH为6；6) 将酶解液置于沸水中15 min，8000 rpm离心10 min，取上清液，于旋转蒸发仪中浓缩上清液，即为小球藻粗提溶液，4℃保存；7）制备的粗提取液用0.22
【技术特征摘要】
1.一种小球藻多糖的制备方法，其按以下步骤进行：1)准确称取小球藻粉末20g溶于400mL水中，在室温下不断搅拌溶胀4h；2)在47℃环境中向小球藻溶液中缓慢加入NaOH粉末至NaOH浓度达到4%，并不断搅拌；3)在47℃环境中，超声-碱液破壁25min，调节pH至7，2000rpm离心20min，取上清液，4℃冷却后备用；4)于4℃环境中，加入4倍体积于上清液的冰镇95%乙醇，持续搅拌1min，静置5h，2000rpm离心20min，去上清液，去除沉淀残余表面酒...
【专利技术属性】
技术研发人员：王阳光，
申请(专利权)人：威海紫光生物科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37
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