奥曲肽类生长抑素前体化合物、配体化合物及制备和应用制造技术

本发明专利技术提供一种奥曲肽类生长抑素前体化合物，属于放射性药物及核医学技术领域。所述前体化合物为NOTA‑TATE，结构如下式Ⅰ所示：

Octreotide somatostatin precursors, ligands, preparation and Application

The invention provides an octreotide somatostatin precursor compound, which belongs to the field of radiopharmaceuticals and nuclear medicine technology. The precursor compound is NOTA TATE, and its structure is as follows:

【技术实现步骤摘要】
奥曲肽类生长抑素前体化合物、配体化合物及制备和应用
本专利技术属于放射性药物及核医学
，具体为一种奥曲肽类生长抑素前体化合物、配体化合物及制备和应用。
技术介绍
神经内分泌肿瘤(NETs)，起源于神经内分泌细胞肿瘤，可发生在体内任何部位，最常见部位为胃、肠、胰腺等消化系统(约占72％)，其次为肺(约占25％)等。欧美国家每年的发病率2-5/10万，分析表明过去30年里，全球发病率显著增加，这可能与成像技术的发展和诊断方法的改进密切相关。在NETs中发现生长抑素受体(SomatostatinReceptors,SSTRs)的特定亚类过度表达。SSTRs是一种糖蛋白，目前发现其有5种亚型，即SSTRl、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5，可与生长抑素类似物如奥曲肽特异性结合。TATE为奥曲肽衍生物，与生长抑素受体结合，DOTA充当螯合物，将放射性物质引入到表达SSTRs肿瘤中，从而形成多肽受体放射性核素显像及治疗(PeptideReceptorRadionuclideTherapy，PRRT)该类肿瘤的理论基础。近年来，随着分子影像技术的大力发展，传统的PET药物18F-FDG已经不能满足诊疗一体化的临床需要。68Ga标记生长抑素类似物PET/CT显像，在临床分期和发现原发灶未明和转移性胃肠胰神经内分泌肿瘤方面，比现有的111In-DTPA-奥曲肽SPECT/CT和传统解剖成像技术(CT/MRI)更为灵敏可靠。68Ga-DOTA-TATEPET/CT显像是发现胃肠胰神经内分泌肿瘤的新方法，该方法极具发展前景，它可以帮助临床医生选择最佳的治疗策略。177Lu-DOTA-TATE治疗NETs患者可以延长患者无进展生存期，改善患者症状，提高生活质量，加之不良反应相对轻微，美国FDA已于2018年1月批准其临床应用，为首款多肽受体放射性核素疗法，尽管主要用于GEP-NETs，但对于SRI(+)患者，可考虑使用该药物治疗，从而拓展了NETs患者治疗的方式，对于不宜手术或转移性NETs患者有望成为一线治疗方式。从核素的选择来看，适用于PET的显像核素18F、64Cu、68Ga具有优势。DOTA为68Ga3+离子最常用的配位螯合剂，但形成的68Ga-DOTA螯合物并不十分稳定，因为DOTA的环半径对于68Ga离子来说太大(68Ga3+离子半径较64Cu2+更小)，热力学稳定性一般。同时，环状结构螯合剂的配位动力学比较惰性，导致68Ga标记DOTA的反应条件比较苛刻，标记反应时间长，反应温度高，该标记条件对68Ga十分不利，由于68Ga为短半衰期核素，标记时间过长导致68Ga衰变越多，且过高反应温度不利于温度敏感的生物分子。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对上述现有DOTA作为螯合物在肿瘤显像及治疗中存在的问题，提供一种更为理想的含NOTA结构的奥曲肽类生长抑素前体化合物，并用放射性核素对该前体化合物进行标记，得到成本低、标记率高、稳定性好、显像或治疗性能强的A-NOTA-TATE生长抑素配体化合物。本专利技术的目的通过如下技术方案实现：一种奥曲肽类生长抑素前体化合物，所述前体化合物为NOTA-TATE，结构如下式Ⅰ所示：本专利技术前体化合物以NOTA作为螯合剂，也是配位基团。NOAT与放射性核素如68Ga形成的螯合物68Ga-NOTA为变形的八面体结构，三个NOTA环上的氮原子以及环臂上羧酸的氧原子与68Ga配位，68Ga-NOTA的热力学稳定常数约为30.98，比68Ga-DOTA高出10个数量级。而且NOTA配位基团可通过与Al18F配位获得18F标记的NOTA-TATE，也可用于64Cu、67Ga、90Y、111In、89Zr、18F或177Lu等核素的标记，部分稳定性相比DOTA-TATE稳定。一种奥曲肽类生长抑素前体化合物的制备方法，采用标准FMOC固相多肽合成法合成NOTA-TATE，包括以下步骤：1)将Throl-树脂和Fmoc-氨基酸溶于N，N-二甲基甲酰胺，加入HATU进行缩合反应；2)将上述缩合产物经N，N-二甲基甲酰胺洗涤后，加入N，N-二甲基甲酰胺(DMF)/六氢吡啶(piperidine)/二氮杂二环(DBU)的混合溶液进行脱保护，然后经温育后去除溶剂，根据所需的肽序列，依次重复偶联步骤；3)加入二氯甲烷/乙酸/三氟乙醇的混合溶液，温和搅拌，将多肽从树脂上裂解，再用二甲基亚砜(DMSO)室温下隔夜孵育裂解下来的多肽，使其环化，即得到目标化合NOTA-D-Phe-cyclo[Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-Throl(MH+1305)，即NOTA-TATE。进一步，所述HATU缩合反应为在室温下反应2h～6h。进一步，所述N，N-二甲基甲酰胺(DMF)/六氢吡啶(piperidine)/二氮杂二环(DBU)的体积比为(60～100)：2：2。进一步，所述温育为在25℃～60℃恒温箱中放置1～20分钟。进一步，所述二氯甲烷/乙酸/三氟乙醇的体积比为(1～5)：1：1。一种奥曲肽类生长抑素配体化合物，所述生长抑素配体化合物为采用放射性核素A对上述所述的前体化合物NOTA-TATE进行标记得到的A-NOTA-TATE，结构如下式Ⅱ所示：单独的核素或单独的前体化合物NOTA-TATE并不能够进行肿瘤的显像，显像主要依赖于放射性核素发出的射线。TATE为奥曲肽衍生物，与生长抑素受体结合，NOTA充当螯合物，将放射性物质引入到表达SSTRs肿瘤中，将核素标记的NOTA-TATE用于显像和治疗该类肿瘤，有望成为核素标记DOTA-TATE在国内的替代药物，性质更优于DOTA-TATE。进一步，所述放射性核素A为64Cu、68Ga、67Ga、90Y、111In、89Zr、18F或177Lu中的一种。一种奥曲肽类生长抑素配体化合物的制备方法，向NOTA-TATE前体化合物中加入缓冲液和放射性金属离子溶液，在一定温度下反应一段时间后，即可得到目标放射性核素A标记的生长抑素配体化合物A-NOTA-TATE。进一步，所述NOTA-TATE前体化合物为10～20ug；所述缓冲液的pH为3.5～7.5；所述反应温度为40～105℃，反应时间为10～60min。进一步，所述缓冲液为无金属离子的盐溶液，优选为醋酸盐、磷酸盐、碳酸盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、滑石酸盐或乳酸盐中的一种或几种。进一步，当标记率小于90％时，用Sep-pakC18Column分离纯化目标化合物，使目标化合物的放射性化学纯度大于99％。分离纯化的目的是吸附标记物中的杂质、游离得的放射性核素等，使最后洗脱出来的目标化合物更纯，可达99％以上。具体操作：使用前Sep-pak柱需用无水乙醇和高纯水活化，向其内注入标记后的化合物，待目标化合物吸附于18C柱后，用生理盐水洗脱放射性杂质，然后再用10％～60％的乙醇洗脱出目标化合物。一种奥曲肽类生长抑素配体化合物的应用，所述生长抑素配体化合物在肿瘤显像或治疗中的应用。进一步，所述生长抑素配体化合物在神经内分泌肿瘤显像或治疗靶向试剂中的应用。因为神经内分泌肿瘤细胞表达生长抑素受体，TATE能够与生长抑素受体特异性结合，NOTA作为螯合剂，可使得放射性核素连接在T本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种奥曲肽类生长抑素前体化合物，其特征在于，所述前体化合物为NOTA‑TATE，结构如下式Ⅰ所示：

【技术特征摘要】
1.一种奥曲肽类生长抑素前体化合物，其特征在于，所述前体化合物为NOTA-TATE，结构如下式Ⅰ所示：2.如权利要求1所述一种奥曲肽类生长抑素前体化合物的制备方法，其特征在于，采用标准FMOC固相多肽合成法合成NOTA-TATE，包括以下步骤：1)将Throl-树脂和Fmoc-氨基酸溶于N，N-二甲基甲酰胺，加入HATU进行缩合反应；2)将上述缩合产物经N，N-二甲基甲酰胺洗涤后，加入N，N-二甲基甲酰胺(DMF)/六氢吡啶(piperidine)/二氮杂二环(DBU)的混合溶液进行脱保护，然后经温育后去除溶剂，根据所需的肽序列，依次重复偶联步骤；3)加入二氯甲烷/乙酸/三氟乙醇的混合溶液，温和搅拌，将多肽从树脂上裂解，再用二甲基亚砜(DMSO)室温下隔夜孵育裂解下来的多肽，使其环化，即得到目标化合NOTA-D-Phe-cyclo[Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-Throl(MH+1305)，即NOTA-TATE。3.一种奥曲肽类生长抑素配体化合物，其特征在于，所述生长抑素配体化合物为采用放射性核素A对权利要求1所述的前体化合物NOTA-TATE进行标记得到的A-NOTA-TATE，结构式如下式Ⅱ所示：4.如权利要求3所述一种奥曲肽类生长抑素配体化合物，其特征在于，所述放射性核素A为64Cu、68Ga、67Ga、90Y、...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈跃，夏雨霄，曾成润，赵艳红，李子博，廖斌，杜一华，王瑛，陈正君，刘洋，陈琳，
申请(专利权)人：西南医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：四川,51