用于治疗免疫病症的免疫抑制组合物制造技术

本公开描述了一种药物组合物，所述药物组合物包含靶向选自以下的细胞因子中的一种或多种的至少一种抗体：巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)、白细胞介素‑1β(IL‑1β)、CCL‑1(I‑309)以及嗜酸性粒细胞趋化因子‑2(CCL24)；以及选自以下的至少一种间充质基质细胞衍生蛋白：前列腺素E2(PGE2)、骨保护素(OPG)、CCL7(MCP‑3)、CCL8(MCP‑2)、CCL20(MIP‑3α)、CXCL5(ENA‑78)、白细胞介素10(IL‑10)以及CXCL6(GCP‑2)。在优选的实施方案中，公开了一种包含抗CCL24抗体和CXCL5的组合物。本公开还描述了所述药物组合物用于治疗免疫疾病(例如同种免疫性疾病或自身免疫性疾病)的用途并且进一步公开了所述药物组合物用于免疫调节的用途。

Immunosuppressive compositions for the treatment of immune diseases

The present disclosure describes a pharmaceutical composition comprising at least one antibody targeting one or more of the following cytokines: macrophage colony stimulating factor (M_CSF), interleukin_1beta (IL_1beta), CCL_1 (I_309) and eosinophil chemokine_2 (CCL24); and at least one mesenchymal stromal cell derived from the following. Protein: prostaglandin E2 (PGE2), osteoprotegerin (OPG), CCL7 (MCP_3), CCL8 (MCP_2), CCL20 (MIP_3a), CXCL5 (ENA_78), interleukin 10 (IL_10) and CXCL6 (GCP 2). In the preferred implementation scheme, a composition comprising anti-CCL24 antibody and CXCL5 is disclosed. The present disclosure also describes the use of the pharmaceutical compositions for the treatment of immune diseases, such as homologous or autoimmune diseases, and further discloses the use of the pharmaceutical compositions for immunoregulation.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗免疫病症的免疫抑制组合物对相关申请的交叉引用本申请要求2016年8月19日提交的新加坡临时申请号10201606949Q的优先权益，该新加坡临时申请的内容在此以引用的方式整体并入本文用于所有目的。
本专利技术大体上涉及分子生物学领域。具体来说，本专利技术涉及用于治疗免疫病症的组合物。
技术介绍
间充质基质细胞(MSC)疗法已经被证实为有效例如调节免疫病症、同种免疫性疾病(在同种异体造血细胞移植之后的移植物抗宿主病(GVHD))以及自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮(SLE)、狼疮性肾炎、I型糖尿病、系统性硬化、炎症性肠病(IBD)、克罗恩氏病(Crohn'sdisease)等)。然而，MSC疗法试验仍面临关于无法预料的长期并发症、潜在的致瘤性以及不受控制地分化成不需要的细胞或组织类型的挑战。此外，使用人类间充质基质细胞引起了从不同来源分离的细胞和使用不同扩增方法的等同性的问题。因此，需要间充质基质细胞(MSC)疗法的替代方案来治疗免疫疾病。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术涉及药物组合物，所述药物组合物包含至少一种抗体和至少一种间充质基质细胞衍生蛋白，其中所述抗体靶向选自由以下各项组成的组的细胞因子中的一种或多种：巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、CCL-1(I-309)以及CCL24(嗜酸性粒细胞趋化因子-2)；其中所述间充质基质细胞衍生蛋白选自由以下各项组成的组：PGE2(前列腺素E2)、OPG、CCL7(MCP-2)、CCL8(MCP-3)、CCL20(MIP-3α)、CXCL5(ENA-78)、IL-10以及CXCL6(GCP-2)。在一个实例中，本申请公开了本文所述的药物组合物，其中所述药物组合物如下表中所示：在另一个实例中，本申请公开了如本文所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含CXCL5和抗CCL24抗体(C32a)。在又另一个实例中，本申请公开了如本文所述的药物组合物，其中所述抗体以约0.05μg/ml至约5μg/ml的浓度存在。在另一个实例中，本申请公开了如本文所述的药物组合物，其中所述抗体以约1μg/ml或约2μg/ml的浓度存在。在一个实例中，本申请公开了如本文所述的药物组合物，其中所述间充质基质细胞衍生蛋白以约0.5ng/ml至约75ng/ml的浓度存在。在另一个实例中，本申请公开了如本文所述的药物组合物，其中所述间充质基质细胞衍生蛋白以约10ng/ml或50ng/ml的浓度存在。在另一个方面，本专利技术涉及治疗免疫病症的方法，所述方法包括施用药物组合物，所述药物组合物包含至少一种抗体和/或至少一种间充质基质细胞衍生蛋白，其中所述抗体靶向选自由以下各项组成的组的细胞因子中的一种或多种：巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、CCL-1(I-309)以及CCL24(嗜酸性粒细胞趋化因子-2)；其中所述间充质基质细胞衍生蛋白选自由以下各项组成的组：PGE2(前列腺素E2)、OPG、CCL7(MCP-2)、CCL8(MCP-3)、CCL20(MIP-3α)、CXCL5(ENA-78)、IL-10以及CXCL6(GCP-2)。在又另一个方面，本专利技术涉及一种调节免疫系统的方法，所述方法包括施用如本文所述的药物组合物。在一个实例中，本申请公开了本文所述的方法，其中所述药物组合物如下表中所示：在另一个实例中，本申请公开了如本文所述的方法，其中所述药物组合物包含CXCL5和抗CCL24抗体(C32a)。在又另一个实例中，本申请公开了如本文所述的方法，其中所述免疫病症是同种免疫性疾病或自身免疫性疾病。在另一个实例中，本申请公开了如本文所述的方法，其中所述同种免疫性疾病选自由以下各项组成的组：在同种异体造血细胞移植之后的移植物抗宿主病(GVHD)、由皮肤移植引起的同种免疫性疾病、由肾移植引起的同种免疫性疾病、由肝移植引起的同种免疫性疾病以及胎儿和新生儿的溶血性疾病。在又另一个实例中，本申请公开了如本文所述的方法，其中所述自身免疫性疾病选自由以下各项组成的组：系统性红斑狼疮(SLE)、狼疮性肾炎、I型糖尿病、系统性硬化、炎症性肠病(IBD)以及克罗恩氏病。在另一个实例中，本申请公开了如本文所公开的方法，其中所述药物组合物在受试者中引起选自由以下各项组成的组的循环促炎性细胞因子中的一种或多种的浓度降低：IFN-γ、IL-6、IL-17A、IL-8、MIP-1β以及MCP-1。在一个实例中，本专利技术公开了如本文所述的方法，其中所述药物组合物在受试者中引起至少一种间充质基质细胞衍生蛋白的浓度增加或降低，从而产生免疫抑制作用，其中所述间充质基质细胞衍生蛋白选自由以下各项组成的组：PGE2(前列腺素E2)、OPG、CCL7、CCL8、CCL20、IL-10、CXCL5、CXCL6、M-CSF、IL-1β、CCL-1以及CCL24。在另一个方面，本专利技术涉及试剂盒，所述试剂盒包括如本文所定义的至少一种抗体和至少一种间充质基质细胞衍生蛋白。附图说明在结合非限制性实施例和附图考虑时，通过参考详细说明将更好地理解本专利技术，在所述附图中：图1示出了柱状图，其中数据表明BM-MSC的免疫抑制作用主要可归因于可溶性因子。使用1.6×105个两种HLA错配的UCB-MNC以15:1E/T比引发混合淋巴细胞反应(MLR)实验20小时。通过LDH检测来确定细胞介导的细胞毒性。使用具有8μm孔径的嵌套小室(transwell)插入物。插入物与孔底之间的不同距离是变化的。结果被表示为平均值±S.D.。对于多重比较，使用邦费罗尼检验(Bonferroni'stest)来校正t检验的p值(*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001)。图2示出了细胞因子抗体阵列测定的图像，其中收集来自MLR、BM-MSC以及MLR和BM-MSC的培养物的上清液并且根据制造商的说明书施加到Raybio人类细胞因子抗体阵列G系列1000(含有120种细胞因子抗体)上。通过AxonGenepix6.1扫描并且分析孵育的载片。通过白色框标记阳性对照孔和阴性对照孔，而通过灰色框(上调)和黑色框(下调)标记其中蛋白质表达水平有超过3倍变化的孔。图3示出了剂量响应曲线，显示了每一种因子的最佳工作浓度的确定。(A-C)上调的因子的剂量响应曲线。(D)针对下调的因子的抗体的剂量响应曲线。在MLR系统上以15:1E/T比进行滴定20小时。通过LDH检测来确定细胞介导的细胞毒性。结果被表示为平均值±S.D.。图4示出了柱状图，描绘了最佳可溶性因子混合物中使用的确定的因子的组合的功效的数据，这是通过系列析因设计实验(FD)来确定的。(A)在212部分FD中筛选全组12个因子(n＝1)。含有7个因子的条件6(C6)在阻遏细胞介导的细胞毒性方面比全组对照和MSC物理接触更有效(p<0.05)。(B)具有4个因子的第二27部分FD鉴定的C6在阻遏细胞介导的细胞毒性方面甚至比全组对照更有效(n＝3，p<0.05)。(C)在24完全FD中进一步测试这4个因子(n＝2)。与4因子全组对照相比，含有两个因子——CXCL5和抗CCL24抗体的C10在阻遏细胞介导的细胞毒性方面表现出等同的效果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物组合物，所述药物组合物包含至少一种抗体和至少一种间充质基质细胞衍生蛋白，其中所述抗体靶向选自由以下各项组成的组的细胞因子中的一种或多种：巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)、白细胞介素‑1β(IL‑1β)、CCL‑1(I‑309)以及CCL24(嗜酸性粒细胞趋化因子‑2)；其中所述间充质基质细胞衍生蛋白选自由以下各项组成的组：PGE2(前列腺素E2)、OPG、CCL7(MCP‑2)、CCL8(MCP‑3)、CCL20(MIP‑3α)、CXCL5(ENA‑78)、IL‑10以及CXCL6(GCP‑2)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.19 SG 10201606949Q1.一种药物组合物，所述药物组合物包含至少一种抗体和至少一种间充质基质细胞衍生蛋白，其中所述抗体靶向选自由以下各项组成的组的细胞因子中的一种或多种：巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、CCL-1(I-309)以及CCL24(嗜酸性粒细胞趋化因子-2)；其中所述间充质基质细胞衍生蛋白选自由以下各项组成的组：PGE2(前列腺素E2)、OPG、CCL7(MCP-2)、CCL8(MCP-3)、CCL20(MIP-3α)、CXCL5(ENA-78)、IL-10以及CXCL6(GCP-2)。2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物如下表中所示：。3.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含CXCL5和抗CCL24抗体(C32a)。4.如前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体以约0.05μg/ml至约5μg/ml的浓度存在。5.如权利要求4所述的药物组合物，其中所述抗体以约1μg/ml或约2μg/ml的浓度存在。6.如前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述间充质基质细胞衍生蛋白以约0.5ng/ml至约75ng/ml的浓度存在。7.如权利要求6所述的药物组合物，其中所述间充质基质细胞衍生蛋白以约10ng/ml或50ng/ml的浓度存在。8.一种治疗免疫病症的方法，所述方法包括施用药物组合物，所述药物组合物包含至少一种抗体和/或至少一种间充质基质细胞衍生蛋白，其中所述抗体靶向选自由以下各项组成的组的细胞因子中的一种或多种：巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、CCL-1(I-309)以及CCL24(嗜酸性粒细胞趋化因子-2)；其中所述间充质基质细胞衍生蛋白选自由以下各项组成的组：PGE2(前列腺素...

【专利技术属性】
技术研发人员：范秀波，黄殷祺，刘秀玲，黄振德，唐博君仁，
申请(专利权)人：新加坡保健服务集团有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG