The invention discloses a photoelectric chemical biosensor and a preparation method thereof. The prepared Bi2WO6 RE ultrasound is dissolved in water, dripped on FTO, dried naturally, and cooled to room temperature after calcination. Then FTO/Bi2WO6_RE electrode was immersed in HAuCl4 solution and calcined to obtain FTO/Bi2WO6_RE/Au electrode. The activated complementary sDNA was then dripped onto the FTO/Bi2WO6 RE/Au electrode and incubated overnight at 4 C. Rinse the unconnected sDNA with Tris HCl buffer and seal it with MCH. After rinsing with Tris_HCl, the GQDs_vDNA conjugates were incubated on the electrodes. After rinsing with Tris HCl solution, then dripping with VP solution containing Exo I, the working electrode is obtained after incubation and rinsing with Tris HCl solution. The working electrode is inserted into the photochemistry cell, then the saturated calomel electrode and the platinum pair electrode are inserted into the cell to form a three-electrode system. The three-electrode system is connected with an external electrochemical workstation, supplemented by a simulated solar xenon lamp source system, that is, an optoelectronic-chemical adapter sensor is assembled. The sensor has the advantages of strong photocurrent response, high detection sensitivity, short detection time, low cost and portability.
【技术实现步骤摘要】
一种光电化学生物传感器及其制备方法
本专利技术属于电化学检测领域，指一种光电化学生物传感器及其制备方法。
技术介绍
副溶血性弧菌(VibrioParahaemolyticus，以下简称VP)是一种嗜盐性革兰氏阴性短杆菌，是世界范围内重要的食源性致病菌。VP引起的食源性疾病已成为世界范围内的公共卫生问题之一。近年来，在亚洲(尤其是东南亚地区)、欧洲和北美洲均多次爆发了VP导致的食源性疾病。据我国食源性疾病监测网2003～2007年与2010～2014年统计分析数据显示，VP引起的食源性疾病已位居微生物食源性疾病的首位，海产品中VP检测已成为各地区食品风险监测的重要一环。我国食品安全国家标准GB29921-2013对水产制品、水产调味品中VP进行了限量规定，可接受水平的限量值为100MPN/g(mL)，最高安全限量值为1000MPN/g(mL)。目前，我国VP的现行检测方法是GB/T4789.7-2013，该传统培养法准确性高；但检测过程通常需要4～5d，耗时长、操作繁琐，不能满足水产品质量安全快速反应体系的需求。目前研究最多的VP快速检测技术是PCR技术、酶联免疫吸附技术和生物传感器技术。PCR技术操作过程较为繁琐，需要设备条件，且耗时相对较长。酶联免疫吸附技术在检测效率、特异性、现场适用性上具有优势，但由于VP抗体成本高，应用受到局限。生物传感器作为新型的检测手段，与传统的检测手段相比，具有方便、省时、精度高、设备简单、价廉，易于微型化等优点，并且数据的收集与处理也很简便，亦不会造成污染，可实现现场大通量样品的检测。光电化学生物传感器将传统的电化学传感器和...
【技术保护点】
1.一种光电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、制备Bi2WO6‑RE纳米粒子将2mmol的Bi(NO3)3·5H2O和1mmol的Na2WO4·2H2O分别溶于40mL的乙二醇和20mL的0.6M稀硝酸溶液，搅拌至溶解完全，分别得到溶液A和溶液B。将稀土硝酸盐溶液加入到溶液A中搅拌均匀。再将淡黄色的溶液B逐滴加入到A的混合溶液中，用NaOH溶液调节pH值到中性，搅拌使得混合溶液由淡黄色变为无色。将已经混合均匀的溶液转移到100mL的水热反应釜中，在一定温度下水热反应一定时间。冷却后先用乙醇然后再用去离子水清洗离心三次，在80℃干燥12h。干燥的粉体研磨，在一定温度下煅烧一定时间，随炉冷却到室温后再次研磨，得到Bi2WO6‑RE。步骤2、制备N掺杂的GQDs先将2g前驱物芘与80mL发烟硝酸混合后，在80℃下回流搅拌，将芘晶粒表面进行硝基功能化处理，取出反应物后过滤除酸后加入适量的氨水调节pH值，采用300W超声波分散处理后转移至聚四氟乙烯罐中，在一定温度下水热反应一定时间，待自然冷却后取出反应物过滤透析后在70℃下干燥得到N‑GQDs。步骤3、GQDs‑vDN...
【技术特征摘要】
1.一种光电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、制备Bi2WO6-RE纳米粒子将2mmol的Bi(NO3)3·5H2O和1mmol的Na2WO4·2H2O分别溶于40mL的乙二醇和20mL的0.6M稀硝酸溶液，搅拌至溶解完全，分别得到溶液A和溶液B。将稀土硝酸盐溶液加入到溶液A中搅拌均匀。再将淡黄色的溶液B逐滴加入到A的混合溶液中，用NaOH溶液调节pH值到中性，搅拌使得混合溶液由淡黄色变为无色。将已经混合均匀的溶液转移到100mL的水热反应釜中，在一定温度下水热反应一定时间。冷却后先用乙醇然后再用去离子水清洗离心三次，在80℃干燥12h。干燥的粉体研磨，在一定温度下煅烧一定时间，随炉冷却到室温后再次研磨，得到Bi2WO6-RE。步骤2、制备N掺杂的GQDs先将2g前驱物芘与80mL发烟硝酸混合后，在80℃下回流搅拌，将芘晶粒表面进行硝基功能化处理，取出反应物后过滤除酸后加入适量的氨水调节pH值，采用300W超声波分散处理后转移至聚四氟乙烯罐中，在一定温度下水热反应一定时间，待自然冷却后取出反应物过滤透析后在70℃下干燥得到N-GQDs。步骤3、GQDs-vDNA偶联物的制备720μLGQDs用100μL含有10mMEDC和10mMNHS的水溶液在室温下活化30min，然后将600μL2μM过量的VP适配体vDNA加入到上述GQDs溶液中，持续搅拌过夜。所得溶液在4℃离心除去过量vDNA，即得到GQDs-vDNA偶联物。步骤4、构建检测副溶血性弧菌的光电化学生物传感器工作电极将FTO电极先后用丙酮、氢氧化钠、去离子水清洗，烘干备用。将10mgBi2WO6-RE超声溶解于5mL水中，取20μL均匀溶液滴于面积为0.25cm2的FTO电极上，自然晾干后，450℃空气气氛下煅烧30min，自然冷却至室温。再将FTO/Bi2WO6-RE电极浸入0.01MHAuCl4(pH＝4.5)溶液中40min，于300℃下煅烧2h形成金纳米颗粒，即得FTO/Bi2WO6-RE/Au电极。将20μL在三(2-羧乙基)膦(TCEP)(0.5μL，10mM)溶液中活化1h的2μMVP适配体vD...
【专利技术属性】
技术研发人员：郝洪顺，张作为，侯红漫，侯云霞，郝寿辰，毕景然，张公亮，闫爽，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
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