抗TIM-3抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及特异性结合T细胞免疫球蛋白结构域和粘液素结构域3(Tim‑3)的抗体。抗Tim‑3抗体可用于治疗、预防或诊断免疫疾病、癌性疾病、感染性疾病或可通过Tim‑3介导的功能调节的其他病理病症。

Anti-TIM-3 Antibody and Its Application

The present invention relates to antibodies that specifically bind the T cell immunoglobulin domain and the mucin domain 3 (Tim 3). Anti-Tim_ 3 antibodies can be used to treat, prevent or diagnose immune diseases, cancerous diseases, infectious diseases or other pathological diseases that can be regulated by Tim_ 3-mediated functions.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗TIM-3抗体及其用途本申请要求于2016年8月26日提交的国际申请No.PCT/CN2016/096924的优先权，其通过引用全部并入本申请。
本申请公开的是特异性结合T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(Tim-3)的抗体。
技术介绍
T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(Tim-3，HAVCR2或CD366)是33KDI型跨膜糖蛋白，其是包含T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域的家族的成员，在促进慢性病毒感染和肿瘤逃避免疫监视的T细胞耗竭中起重要作用(Monneyetal.,2002Nature415:536-541；Sanchez-FueyoA,etal.,2003NatImmunol.4:1093-101；SabatosCA,etal.,2003NatImmunol.4:1102-10；Andersonetal.,2006CurrOpinImmunol.18:665-669)。编码Tim-3的基因和cDNA在小鼠和人中被克隆和表征(Monneyetal.,2002Nature415:536-541；McIntireetal.,2001Nat.Immunol.2:1109-1116)。成熟的人Tim-3含有280个氨基酸残基(NCBI登录号:NP_116171.3)。其胞外域(extracellulardomain)由氨基酸残基1-181组成，跨膜结构域和胞质C-末端尾部包含残基182-280。没有已知的抑制性信号传导基序，诸如在胞质结构域中发现的基于免疫受体酪氨酸的抑制性基序(ITIM)和酪氨酸转换基序(switchmotif)(ITSM)。Tim-3最初在Th1细胞中被鉴定出来。随后的研究显示除了T细胞之外，Tim-3还在其他类型的免疫细胞，诸如NK细胞、巨噬细胞、DC和肥大细胞中表达(Hastingsetal.,2009EurJImmunol39:2492-2501；Andersonetal.,2007Science318:1141-1143；PhongBL,etal.,2015JExpMed.pii:jem.20150388)。Tim-3很少在其他人体组织中表达。在T细胞中，Tim-3表达通过TCR/CD3活化而被正调控(Hastingsetal.,2009EurJImmunol39:2492-2501)。此外，普通的γ链细胞因子(例如IL-2、IL-7、IL-15和IL-21)也以PI-3激酶依赖性方式增加Tim-3表达(MujibS,etal.,2012JImmunol.188:3745-56)。肿瘤微环境(TME)中的T细胞通常与其他“检查点”抑制性免疫受体诸如PD-1、Lag-3和Tigit共表达Tim-3(FourcadeJ,etal.,2010JExpMed.207:2175-86；GrosA,etal.,2014JClinInvest.124:2246-59)。迄今为止，已经报道了几种Tim-3配体(Tim-3L)，其包括半乳糖凝集素-9和磷脂酰丝氨酸(PtdSer)，被认为是两种主要的Tim-3配体(AndersonAC,2012CurrOpinImmunol.24:213-6)。Tim-3L与Tim-3受体的结合诱导抑制T细胞活化的细胞内信号传导，从而导致细胞增殖、IL-2和IFN-γ分泌减少(Dekruyffetal.,2010J.Immunol.184:1918-1930；Zhuetal.,2005Nat.Immunol.6:1245-1252)。T细胞中Tim-3信号传导的详细机制仍然剩下大部分未知。一些研究显示，Tim-3可被募集到免疫突触并在与TCR相互作用时隔离Src激酶Lck，由此抑制其信号传导，特别是NFAT信号传导途径(TomkowiczB,etal.,2015PLoSOne10:e0140694；ClaytonKL,etal.,2014J.Immunol.192:782-91)。在癌症和病毒感染中，Tim-3信号传导的活化促进免疫细胞功能障碍，导致癌症生长物(outgrowth)或扩大的病毒感染。在肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、巨噬细胞和肿瘤细胞中Tim-3表达的上调已经在许多类型的癌症诸如肺癌(ZhuangX,etal.,AmJClinPathol2012137:978-985)、肝癌(LiH,etal.,Hepatology201256:1342-1351)、胃癌(Jiangetal.,PLoSOne20138:e81799)、肾癌(Komoharaetal.,CancerImmunolRes.20153:999-1000)、乳腺癌(HeonEK,etal.,2015BiochemBiophysResCommun.464:360-6)、结肠癌(Xuetal.,Oncotarget2015)、黑素细胞癌(GrosA,etal.,2014JClinInvest.2014124:2246-2259)和子宫颈癌(Caoetal.,PLoSOne20138:e53834)中报道。这些癌症中Tim-3表达的增加与患者生存预后不良的结果相关。Tim-3信号的上调不但在对癌症的免疫耐受中起重要作用，而且对慢性病毒感染也起作用。在HIV和HCV感染期间，T细胞上Tim-3的表达显著高于健康人，并且与病毒载量和疾病进展呈正相关(JonesRB,etal.,2008JExpMed.205:2763-79；SakhdariA,etal.,2012PLoSOne7:e40146；Golden-MasonL,etal.,2009JVirol.83:9122-30；2012MoormanJP,etal.,JImmunol.189:755-66)。此外，阻断Tim-3受体单独或与PD-1/PD-L1阻断联合可在体外和体内拯救功能性“耗尽”的T细胞(DietzeKK,etal.,2013PLoSPathog9:e1003798；Golden-MasonL,etal.,2009JVirol.83:9122-30)。因此，通过治疗剂调节Tim-3信号传导可能使免疫细胞例如T细胞、NK细胞和巨噬细胞免于耐受，诱导有效的免疫响应以根除肿瘤或慢性病毒感染。已经报道了一些抗体可在与其在细胞表面上的靶标结合时被内化(HurwitzE,etal.,1995,ProcNatlAcadSciUSA92:3353-7；PoulMA,etal.,2000,JMolBiol.301:1149-61；FischerE,etal.,2012,ClinCancerRes.18:6208-18)。抗体诱导的受体胞吞作用导致细胞表面受体的下调和受体依赖性信号传导的抑制(LiuL,etal.,2014,ClinCancerRes.20:6059-70)。由于抗体内化会降低受体的表面表达，通常需要对受体的抗体进行持久的内化。因此，需要对Tim-3受体具有高亲和力和特异性的抗Tim-3抗体，并且优选进一步具有Tim-3受体的持久内化。
技术实现思路
本申请公开的是以高亲和力和特异性结合Tim-3的抗体分子。具体而言，本申请公开的抗Tim-3抗体提供了Tim-3受体持续或持久的内化。还提供的是编码抗体分子的核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种能够结合人Tim‑3的抗体，其包含：(a)重链可变区(VH)，其包含一个、两个或三个选自SEQ ID NO 3、4、5或26的CDR氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；和/或(b)轻链可变区(VL)，其包含一个、两个或三个选自SEQ ID NO 6、7、8或27的CDR氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.26 CN PCT/CN2016/0969241.一种能够结合人Tim-3的抗体，其包含：(a)重链可变区(VH)，其包含一个、两个或三个选自SEQIDNO3、4、5或26的CDR氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；和/或(b)轻链可变区(VL)，其包含一个、两个或三个选自SEQIDNO6、7、8或27的CDR氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体。2.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含：(a)重链可变区(VH)，其包含SEQIDNO3的VH-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO4的VH-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO5的VH-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；和轻链可变区(VL)，其包含SEQIDNO6的VL-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO7的VL-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO8的VL-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；(b)重链可变区(VH)，其包含SEQIDNO3的VH-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO26的VH-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO5的VH-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；和轻链可变区(VL)，其包含SEQIDNO6的VL-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO7的VL-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO8的VL-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；(c)重链可变区(VH)，其包含SEQIDNO3的VH-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO4的VH-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO5的VH-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；和轻链可变区(VL)，其包含SEQIDNO6的VL-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO7的VL-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO27的VL-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；或(d)重链可变区(VH)，其包含SEQIDNO3的VH-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO26的VH-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO5的VH-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体；和轻链可变区(VL)，其包含SEQIDNO6的VL-CDR1氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体，SEQIDNO7的VL-CDR2氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体和SEQIDNO27的VL-CDR3氨基酸序列或其包含一个或多个保守取代的变体。3.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含：(a)重链可变区(VH)，其包含SEQIDNO3的VH-CDR1氨基酸序列，SEQIDNO4的VH-CDR2氨基酸序列和SEQIDNO5的VH-CDR3氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含SEQIDNO6的VL-CDR1氨基酸序列，SEQIDNO7的VL-CDR2氨基酸序列和SEQIDNO8的VL-CDR3氨基酸序列；或(b)重链可变区(VH)，其包含SEQIDNO3的VH-CDR1氨基酸序列，SEQIDNO26的VH-CDR2氨基酸序列和SEQIDNO5的VH-CDR3氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含SEQIDNO6的VL-CDR1氨基酸序列，SEQIDNO7的VL-CDR2氨基酸序列和SEQIDNO27的VL-CDR3氨基酸序列。4.权利要求1的抗体，其中所述抗体是人源化抗体分子。5.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含与SEQIDNO9、17、28或40的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域。6.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含与SEQIDNO9、17或28的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域。7.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含与SEQIDNO11、19、30或36的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域。8.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含：(a)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO11的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(b)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO19的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(c)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO30的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(d)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO36的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(e)与SEQIDNO17的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO11的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(f)与SEQIDNO17的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO19的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(g)与SEQIDNO17的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO30的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(h)与SEQIDNO17的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO36的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(i)与SEQIDNO28的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO11的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(j)与SEQIDNO28的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO19的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(k)与SEQIDNO28的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO30的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(l)与SEQIDNO28的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO36的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(m)与SEQIDNO40的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO11的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(n)与SEQIDNO40的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO19的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(o)与SEQIDNO40的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO30的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；或(p)与SEQIDNO40的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO36的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域。9.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含：(a)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO11的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(b)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO19的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(c)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO30的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(d)与SEQIDNO9的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO36的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(e)与SEQIDNO17的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变结构域，和与SEQIDNO11的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变结构域；(f)与SEQIDNO17的氨基酸序列具有至少95％...

【专利技术属性】
技术研发人员：张彤，薛柳，刘琦，彭浩，魏旻，李康，
申请(专利权)人：百济神州有限公司，
类型：发明
国别省市：开曼群岛,KY