一种分离检测柠檬酸消毒液中有效成分的方法技术

本发明专利技术属于化学品检测技术领域，涉及一种分离检测柠檬酸消毒液中有效成分的方法，具体涉及用高效液相色谱法分离和检测柠檬酸消毒液中柠檬酸、L‑苹果酸、乳酸的方法。本发明专利技术采用高效液相色谱法，分离柠檬酸消毒液中柠檬酸、L‑苹果酸、乳酸，所述高效液相色谱法的流动相为：磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液，磷酸二氢钾溶液与甲醇的体积比为：90～95:10～5，磷酸二氢钾溶液的浓度为：25mmol/L，pH值为：2.3～2.7；经分离后，本发明专利技术的各成分的R＞4.0，理论塔板数n＞5000，拖尾因子T为0.90～1.20，另外，与现有技术中的方法相比，本发明专利技术中实际测得的柠檬酸、L‑苹果酸、乳酸的含量更接近于质量标准。

A Method for Separation and Detection of Effective Components in Citric Acid Disinfection Solution

The invention belongs to the technical field of chemical detection, and relates to a method for separating and detecting the active ingredients in citric acid disinfection solution, in particular to a method for separating and detecting citric acid, L malic acid and lactic acid in citric acid disinfection solution by high performance liquid chromatography. The invention adopts high performance liquid chromatography to separate citric acid, L malic acid and lactic acid from citric acid disinfectant solution. The mobile phase of the high performance liquid chromatography is: potassium dihydrogen phosphate solution and Methanol Mixed solution, the volume ratio of potassium dihydrogen phosphate solution and methanol is 90-95:10-5, the concentration of potassium dihydrogen phosphate solution is 25 mmol/L, the pH value is 2.3-2.7; after separation, the original product is prepared. The R > 4.0 of each component, the theoretical tray number n > 5000, and the tailing factor T are 0.90-1.20. In addition, compared with the method in the prior art, the actual measured contents of citric acid, L malic acid and lactic acid in the invention are closer to the quality standard.

【技术实现步骤摘要】
一种分离检测柠檬酸消毒液中有效成分的方法
：本专利技术属于化学品检测
，涉及一种分离检测柠檬酸消毒液中有效成分的方法，具体涉及用高效液相色谱法分离和检测柠檬酸消毒液中柠檬酸、L-苹果酸、乳酸的方法。
技术介绍
：血液透析机是一种较为复杂的机电一体化设备,结构上由血路、水路及电路3部分组成,原理由体外循环通路,透析液通路及基于微电脑技术的控制监测电路组成。多数血液透析机故障发生在液路部分,主要由酸洗及消毒不充分造成。血液透析浓缩液是含电解质及碱基的液体，将其与透析用水按比例稀释，得到与人体血液电解质浓度相接近的透析液，用于临床治疗使用。常用的透析液碱基主要为碳酸氢盐。使用含碳酸氢钠透析液治疗时，透析液易析出碳酸盐结晶，当透析液的PH大于7.35时碳酸盐结晶加速，使用酸性清洗剂柠檬酸等能够有效的清除碱性碳酸盐(碳酸钙)的结晶沉淀。碱性碳酸氢盐(碳酸钙)的清除效果直接影响患者的透析效果。柠檬酸消毒液是近年来血液透析机用消毒剂中使用最频繁，应用最广泛的一种消毒剂。因此柠檬酸消毒液的浓度选择至关重要。柠檬酸消毒液的含量不准确会导致除钙的效果降低。柠檬酸消毒液的含量测定方法多采用酸碱滴定法，通过此方法只能测定产品中总酸含量，不能确定某一种酸的含量，并且检验结果误差较大。这将制约了柠檬酸酸产品的品质监控。现有技术没有同时进行L-苹果酸、乳酸、柠檬酸含量检验的标准方法。分别进行L-苹果酸、乳酸、柠檬酸含量检验不仅会增加检验成本，而且操作复杂。同时通过验证《中国药典》中枸橼酸离子检测方法项下高效液相色谱法，GB/T5009.157《食品中有机酸的测定》法，不适用柠檬酸消毒液中三种酸(L-苹果酸、乳酸、柠檬酸)含量检验。
技术实现思路
：针对现有技术的缺陷，本专利技术提供了一种柠檬酸消毒液的检测方法，该方法可以使得柠檬酸消毒液中L-苹果酸、乳酸、柠檬酸有效分离，其分离度在2.0以上。本专利技术所采用的技术方案是：采用高效液相色谱法，分离柠檬酸消毒液中柠檬酸、L-苹果酸、乳酸，所述高效液相色谱法的流动相为：磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液，磷酸二氢钾溶液与甲醇的体积比为：90～95:10～5，磷酸二氢钾溶液的浓度为：25mmol/L，pH值为：2.3～2.7；所述高效液相色谱法所用的色谱柱为SpursilC18；所述高效液相色谱法的流速为0.7～0.9mL/min；所述高效液相色谱法的检测波长为210～215nm；所述高效液相色谱法的柱温为20℃～25℃。具体地，本专利技术的色谱条件为：色谱柱：SpursilC18(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：25mmol/L磷酸二氢钾(pH2.5):甲醇(95:5)；流速：0.8mL/min；柱温:25℃；检测波长：215nm。L-苹果酸、乳酸储备液、对照品储备液采用常规方法制备。本专利技术的方法可以使柠檬酸消毒液中柠檬酸、L-苹果酸、乳酸有效的分离，其各成分的R值均可以达到R＞4.0，理论塔板数n＞5000，拖尾因子T为0.90～1.20，另外，与现有技术中的方法相比，本专利技术中实际测得的柠檬酸、L-苹果酸、乳酸的含量更接近于质量标准。附图说明：图1为专利方法-20％柠檬酸消毒液含量检验图谱；图2为专利方法-50％柠檬酸消毒液检验图谱；图3为《中国药典》中枸橼酸离子检测方法-20％柠檬酸消毒液含量检验图谱；图4为《中国药典》中枸橼酸离子检测方法-50％柠檬酸消毒液含量检验图谱；图5为GB/T5009.157《食品中有机酸的测定》法-20％柠檬酸消毒液含量检验图谱；图6为GB/T5009.157《食品中有机酸的测定》法-20％柠檬酸消毒液含量检验图谱。具体实施方式：实施例1：依据20％柠檬酸消毒液和50％柠檬酸消毒液产品配方所生产的消毒液，考察产品的实际检测浓度。产品含量质量标准见表1、表2。表120％柠檬酸消毒液质量标准项目质量体积浓度柠檬酸(以C6H8O7计)220.0±11.0g/LL-苹果酸(以C4H6O5计)28.0±2.8g/L乳酸(以C3H6O3计)28.0±2.8g/L表250％柠檬酸消毒液质量标准项目质量体积浓度柠檬酸(以C6H8O7计)560.0±28.0g/LL-苹果酸(以C4H6O5计)38.0±3.8g/L乳酸(以C3H6O3计)38.0±3.8g/L操作方法：20％柠檬酸消毒液供试液的制备：称取约1.0ml供试品，于50mL容量瓶中，用超纯水稀释定容至刻度混匀，精密量取该溶液1.25mL，置25mL容量瓶中，加入0.5mL1mol/L磷酸，用超纯水稀释定容至刻度，0.45μm膜过滤，取20μL注入高效液相色谱仪。50％柠檬酸消毒液供试液的制备与测定：称取约0.5ml供试品，于50mL容量瓶中，用超纯水稀释定容至刻度混匀，精密量取该溶液1.25mL，置25mL容量瓶中，加入0.5mL1mol/L磷酸，用超纯水稀释定容至刻度，0.45μm膜过滤，取20μL注入高效液相色谱仪。L-苹果酸、乳酸储备液的制备：精密称取L-苹果酸对照品、乳酸对照品各0.600g，置10ml容量瓶中，用超纯水溶解定容至刻度。L-苹果酸、乳酸浓度均为60.0mg/mL，此液为L-苹果酸、乳酸储备液。对照品储备液：精密称取柠檬酸对照品0.500g、精密量取L-苹果酸、乳酸储备液1.0mL，置50mL容量瓶中，用超纯水溶解定容至刻度。柠檬酸浓度为10.0mg/mL，L-苹果酸、乳酸浓度为1.2mg/mL，此液为对照品储备液。对照品使用液：精密量取10.0mL对照品储备液于50mL容量瓶中用超纯水稀释到刻度。柠檬酸浓度为2.0mg/mL，L-苹果酸、乳酸浓度为0.24mg/mL，此液为对照品使用液。标准曲线的绘制：取对照品使用液1.25、2.50、5.00mL，置25mL容量瓶中，加入0.5mL1mol/L磷酸，用超纯水稀释定容至刻度，混匀。进样20μL于高效液相色谱仪中，记录色谱图。分别以对照品溶液中柠檬酸、L-苹果酸、乳酸的浓度(μg/mL)对其相应的峰面积作直线回归，求得各组分直线回归方程。结果计算：供试品中有机酸的含量按下式计算：ω＝c×M×10-3式中：ω－供试品中有机酸含量(g/L)；c－由直线回归方程中求得供试液中某有机酸的浓度(μg/mL)；M－稀释倍数。检测结果：附图1：专利方法-20％柠檬酸消毒液含量检验图谱，各成分含量符合标准规定。表3:20％柠檬酸消毒液含量检验结果项目质量体积浓度柠檬酸(以C6H8O7计)221.0g/LL-苹果酸(以C4H6O5计)27.6g/L乳酸(以C3H6O3计)27.5g/L检测结果：附图2：专利方法-50％柠檬酸消毒液含量检验图谱，各成分含量符合标准规定。表4:50％柠檬酸消毒液含量检验结果项目质量体积浓度柠檬酸(以C6H8O7计)552.9g/LL-苹果酸(以C4H6O5计)39.0g/L乳酸(以C3H6O3计)37.1g/L实施例2：针对同一批次20％柠檬酸消毒液和50％柠檬酸消毒液分别采用三种不同的方法进行含量检验。考察样品中各成分的分离结果以及实际含量结果。方法一：本方法色谱条件：色谱柱：SpursilC18(4.6mm×150mm，5μm)；流动相：25mmol/L磷酸二氢钾(pH2.5):甲醇(95:5)；流速：0.8mL/m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离检测柠檬酸消毒液中有效成分的方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，所述高效液相色谱法的流动相为：磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液，磷酸二氢钾溶液与甲醇的体积比为：90～95:10～5。

【技术特征摘要】
1.一种分离检测柠檬酸消毒液中有效成分的方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，所述高效液相色谱法的流动相为：磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液，磷酸二氢钾溶液与甲醇的体积比为：90～95:10～5。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，磷酸二氢钾溶液与甲醇的体积比为：95:5。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述磷酸二氢钾溶液的pH值为：2.3～2.7。4.如权利要求1-3任何一项所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法所用的色谱柱为SpursilC18。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的流速为0.7～0.9mL/min。6.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：李明，肖凤，冯光，张阳，高欣，
申请(专利权)人：辽宁三生科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21