用于向中枢神经系统（CNS）递送蛋白质的工程改造的寄生虫技术方案

提供的是核酸构建体，包含其的弓形虫，包含其的药物组合物和使用其用于将目标蛋白质递送至主体的目标组织，例如CNS，并且进一步治疗可通过在主体的中枢神经系统中施用治疗性多肽来治疗的病理状况的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于向中枢神经系统（CNS）递送蛋白质的工程改造的寄生虫专利
和背景本专利技术在其一些实施方案中涉及用于分泌与刚地弓形虫（Toxoplasmagondii）分泌的多肽融合的药物多肽的核酸构建体，以及包含其的弓形虫，并且更具体地但非唯一地，涉及药物组合物和使用其用于治疗主体的方法。缺乏用于递送蛋白质治疗剂的稳健方法在很大程度上是将它们转化为临床治疗的当前瓶颈。蛋白质经常发挥高度特异性和复杂的功能集合，所述功能无法通过简单的化学化合物进行模拟（（NatRevDrugDiscov.2008；7（1）:21-39.Proteintherapeutics:asummaryandpharmacologicalclassification.LeaderB，BacaQJ，和GolanDE）；然而，由于它们的大分子性质，将治疗性蛋白质递送至体内的靶位点是极具挑战性的。在施用后或在贮存期间的低功能稳定性和快速活性丧失，连同通过生物屏障的低渗透性，限制了活性蛋白质的递送。化学修饰、缀合物和载体系统的持续发展辅助一些治疗性蛋白质的递送，但这些蛋白质仍主要限于“可接近的靶空间”内的靶–在血管区室中或在细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含异源多核苷酸的核酸构建体，所述异源多核苷酸包含在编码药物多肽的第二核酸序列的上游框内融合的编码弓形虫分泌的蛋白质的第一核酸序列，其中所述异源多核苷酸与用于指导所述异源多核苷酸在弓形虫中的转录的启动子可操作地连接，其中所述启动子选自：组成型启动子、诱导型启动子、潜伏期特异性启动子和弓形虫内源性启动子，条件是所述启动子不是Toxofilin启动子。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.29 US 62/3558981.一种包含异源多核苷酸的核酸构建体，所述异源多核苷酸包含在编码药物多肽的第二核酸序列的上游框内融合的编码弓形虫分泌的蛋白质的第一核酸序列，其中所述异源多核苷酸与用于指导所述异源多核苷酸在弓形虫中的转录的启动子可操作地连接，其中所述启动子选自：组成型启动子、诱导型启动子、潜伏期特异性启动子和弓形虫内源性启动子，条件是所述启动子不是Toxofilin启动子。2.权利要求1的核酸构建体，其中所述内源性启动子不是棒状体蛋白质的内源性启动子。3.权利要求1的核酸构建体，其中所述弓形虫分泌的蛋白质由所述弓形虫的棒状体分泌。4.权利要求3的核酸构建体，其中由所述棒状体分泌的所述弓形虫分泌的蛋白质包含Toxofilin和/或ROP1。5.权利要求1的核酸构建体，其中所述弓形虫分泌的蛋白质是非棒状体蛋白质。6.权利要求5的核酸构建体，其中所述弓形虫分泌的蛋白质选自微线体蛋白质和致密颗粒蛋白质。7.权利要求1的核酸构建体，其中所述弓形虫分泌的蛋白质由所述弓形虫的致密颗粒分泌。8.权利要求7的核酸构建体，其中由所述致密颗粒分泌的所述蛋白质包含选自SEQIDNO：234-279的氨基酸序列。9.权利要求7的核酸构建体，其中由所述致密颗粒分泌的所述弓形虫分泌的蛋白质包含GRA16和/或GRA24。10.权利要求1的核酸构建体，其中所述弓形虫分泌的蛋白质由所述弓形虫的微线体分泌。11.权利要求10的核酸构建体，其中由所述微线体分泌的所述蛋白质包含选自SEQIDNO：280-322的氨基酸序列。12.权利要求1的核酸构建体，其中所述弓形虫分泌的蛋白质包含刚地弓形虫巨噬细胞移动抑制因子（TgMIF）。13.权利要求1-12中任一项的核酸构建体，其中所述异源多核苷酸进一步包含在所述异源多核苷酸上游和/或下游的弓形虫非翻译区（UTR）核酸序列。14.权利要求1-13中任一项的核酸构建体，其进一步包含编码诱导型自毁元件的第三核酸序列。15.权利要求1-14中任一项的核酸构建体，条件是所述核酸构建体不包含Cre-重组酶编码序列。16.权利要求1-15中任一项的核酸构建体，其适合于整合到弓形虫的基因组内。17.权利要求16的核酸构建体，其中所述诱导型自毁元件对药物具有活性。18.权利要求17的核酸构建体，其中所述药物包含抗生素。19.权利要求1-18中任一项的核酸构建体，其进一步包含至少一个框内切割位点，其允许所述药物多肽从所述弓形虫分泌的蛋白质中脱离。20.权利要求1-19中任一项的核酸构建体，其中所述异源多核苷酸进一步包含编码可选择标记物的核酸序列。21.一种包含至少两种核酸构建体的核酸构建体系统，其中所述至少两种核酸构建体的第一核酸构建体是权利要求1-19中任一项的核酸构建体，并且所述至少两种核酸构建体的第二核酸构建体包含编码可选择标记物的多核苷酸。22.权利要求20或21的核酸构建体，其中所述可选择标记物包含氯霉素乙酰转移酶（CAT）、DHFR-TS、BLE、HXGPRT、UPRT、TK、CD、荧光蛋白或表位标签。23.一种弓形虫，其用权利要求1-20和22中任一项的核酸构建体、或者用权利要求21或22的...

【专利技术属性】
技术研发人员：O瑞沙维，S布拉莎，L舍因内，
申请(专利权)人：特拉维夫大学拉莫特有限公司，格拉斯哥大学校董会，
类型：发明
国别省市：以色列,IL