一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法技术

本发明专利技术提供一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，涉及医学研究技术领域。该用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，同时对雄性大鼠通过不同的手术方法进行肝脏切除后，再对传统一组、改良一组及改良B组中的大鼠，在手术结束后并持续跟进并进行相关影响因子的注入。该用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，通过对传统一组、改良一组进行术后一定时间段内对大鼠进行促进肝脏再生的相关蛋白的注入，通过多个时间点对大鼠致死处理，并对肝脏再生情况的评估，使观察者可以清晰直观得到肝组织生长率的变化，从而进一步帮助观察者进行更加精细的数值调控得到完整的数据，同时该方法具有操作简单，手术时间短，数据收集周期短等优点。

A Method for Increasing ALPPS-induced Growth Rate of Liver Tissue

The invention provides a method for improving ALPPS-induced liver tissue growth rate, which relates to the technical field of medical research. The method was used to increase ALPPS-induced liver tissue growth rate. After hepatectomy in male rats, rats in the traditional group, the improved group and the improved group B were followed up and injected with related influencing factors after the operation. This method is used to improve the growth rate of liver tissue induced by ALPPS. By injecting proteins related to liver regeneration into rats in a certain period of time after operation in the traditional group and the improved group, lethal treatment of rats at several time points, and evaluation of liver regeneration, the observer can clearly and intuitively get the change of liver tissue growth rate, thus further help. It can help the observer to get complete data through more precise numerical control. At the same time, this method has the advantages of simple operation, short operation time and short data collection cycle.

【技术实现步骤摘要】
一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法
本专利技术涉及医学研究
，具体为用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法。
技术介绍
肝脏具有强大的代谢功能和再生能力,但在正常生理状态下,绝大部分肝细胞处于静息状态,在受到感染、中毒等肝损伤,或者大部肝切除等刺激后,肝细胞会迅速开始分裂,表现出惊人的再生能力和功能代偿能力,这使得活体肝移植术后肝脏的结构和功能恢复到正常水平成为可能。其中，对于肝癌患者来说，肝癌的完整切除是肝癌患者获得根治性治疗效果的最主要途径,切除术后足够的剩余肝脏体积是避免肝衰竭的必要条件.为了达到上述目的,诞生了一种全新手术方式——联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除术，通过一阶段对肝脏上长有肿瘤部分的肝脏上静脉血管进行夹闭，使血流供应至另外一侧，待另外一侧肝脏长至合适比重后，再通过二次手术将肿瘤侧的肝脏进行切除，使患者达到治愈的效果。然而，受到患者自身术后身体状况的影响，使二次手术的操作时间变得不易调整，会出现短期内肝脏自身无法快速再生至理想状态，从而导致二次手术时间的延后，进而使患者无法得到及时的治疗。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术试图克服以上缺陷，因此本专利技术提供了一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，以达到了提高肝组织生长速率的效果。本专利技术为解决上述技术问题，提供如下技术方案：一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，包括以下步骤：S1、选取若干只健康SPF级雄性成年大鼠及SPF级雄性老年大鼠。S2、将S1中的雄性成年大鼠均分为四组，分别为传统一组、传统二组、改良一组和改良二组，同时将雄性老年大鼠均分为传统A组和改良B组。S3、将S1中的雄性大鼠以S2中的组类分开后，统一放于恒温恒湿动物房中，提供标准饲料与清水自由饮食饲养12H后，并在术前12H时对大鼠禁水。S4、术前对所有大鼠进行快速诱导麻醉并持续至手术结束，对传统组大鼠以经典法进行肝脏切除，对改良组以改良法进行肝脏切除。S5、对进行肝脏切除后的传统一组、改良一组及改良B组中的大鼠，在手术结束后30分钟后注入甲肾上腺激素和胰岛素，并在手术后4小时内对大鼠进行TNF-α及IL-6的注入，对传统二组、改良二组和传统A组进行正常放回。S6、在术后24小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF、CB和CDK的注入。S7、在术后48小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF的注入。S8、在术后6-10小时后对大鼠恢复饮水，20-24小时后恢复饲料供给，针对改良B组中的老年大鼠投以特殊饲料进行单独饲养，其余分组的大鼠投以标准饲料及清水进行饲养。S9、在术后50小时、1天、2天、3天、5天、7天六个时间点对各分组中的大鼠进行批量处死解剖，并统计并评估肝脏的再生状况。进一步，所述1操作步骤中选取的健康大鼠的体重在为190-200g之间，且选取健康成年大鼠80只和老年大鼠40只。进一步，所述S4步骤中肝脏的切除比例为70％。进一步，所述S4步骤中进行肝脏切除的经典法为不阻断入肝血流组的方式进行切除，改良法为阻断入肝血流组的方法式进行切除。与现有技术相比，该用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法具备如下有益效果：1、该用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，通过对传统一组、改良一组进行术后一定时间段内对大鼠进行促进肝脏再生的相关蛋白的注入，通过多个时间点对大鼠致死处理，并对肝脏再生情况的评估，使观察者可以清晰直观得到肝组织生长率的变化，从而进一步帮助观察者进行更加精细的数值调控得到完整的数据，同时该方法具有操作简单，手术时间短，数据收集周期短等优点。2、该用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，提供针对肝功能退化的肝脏在进行切除手术后观察肝脏再生情况的实验方法，为研究者对促进肝脏修复和治疗肝脏损伤相关疾病提供了一定数据支持。具体实施方式根据本专利技术的第一方面，本专利技术提供一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，具体包括以下实施例：实施例1：S1、选取若干只健康SPF级雄性成年大鼠及SPF级雄性老年大鼠。在本实施例中，选取的健康大鼠的体重在为190g-195g之间。优选地，健康成年大鼠80只和老年大鼠40只。S2、将S1中80只雄性成年大鼠均分为四组，分别为传统一组、传统二组、改良一组和改良二组，同时将40只雄性老年大鼠均分为传统A组和改良B组。S3、将S1中的雄性大鼠以S2中的组类分开后，统一放于恒温恒湿动物房中，提供标准饲料与清水自由饮食饲养12H后，并在术前12H时对大鼠禁水S4、术前对所有大鼠进行快速诱导麻醉并持续至手术结束。在本实施例中，对传统组大鼠以经典法进行肝脏切除，对改良组以改良法进行肝脏切除，大鼠肝脏的切除比例为70％。进一步的，进行肝脏切除的经典法为不阻断入肝血流组的方式进行切除，改良法为阻断入肝血流组的方法式进行切除。具体的，经典法为通过用生理盐水润湿的面前拨开中央小叶，剪开镰状韧带至下腔静脉钱，挤出小鼠肝脏后，剪开肝脏脏面的肝胃韧带和部分肝左侧冠状韧带，再取丝线将肝脏隔面尽量靠近根部进行结扎，待小叶颜色变为暗红色时，剪下肝左外叶，同时抬起肝左中叶和右中叶，从脏面绕过在肝脏隔面靠近根部进行结扎，然后剪下这两叶。改良法为在显微镜下，将肝叶分离后，用血管线进行结扎，支配左外叶和中叶的肝动脉和门静脉分支，带肝叶颜色变暗后，在中叶的根部用血管线结扎胆道，并将胆囊分离切除，最后用四岩结扎左外叶根部并切除，再分别结扎左中叶和右中叶并切除。在本实施例中：S5、对进行肝脏切除后的传统一组、改良一组及改良B组中的大鼠，在手术结束后30分钟后注入甲肾上腺激素和胰岛素，并在手术后4小时内对大鼠进行TNF-α及IL-6的注入，对传统二组、改良二组和传统A组进行正常放回。S6、在术后24小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF、CB和CDK的注入。S7、在术后48小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF的注入。S8、在术后6-10小时后对大鼠恢复饮水，20-24小时后恢复饲料供给，针对改良B组中的老年大鼠投以掺有胆酸的饲料进行单独饲养，其余分组的大鼠投以标准饲料及清水进行饲养。S9、在术后50小时、60小时、4天、7天、10天、12天六个时间点对各分组中的大鼠进行批量处死解剖，并统计并评估肝脏的再生状况。实施例2：S1、选取若干只健康SPF级雄性成年大鼠及SPF级雄性老年大鼠。在本实施例中，选取的健康大鼠的体重在为195g-200g之间。优选地，健康成年大鼠100只和老年大鼠60只。S2、将S1中80只雄性成年大鼠均分为四组，分别为传统一组、传统二组、改良一组和改良二组，同时将60只雄性老年大鼠均分为传统A组和改良B组。S3、将S1中的雄性大鼠以S2中的组类分开后，统一放于恒温恒湿动物房中，提供标准饲料与清水自由饮食饲养12H后，并在术前12H时对大鼠禁水S4、术前对所有大鼠进行快速诱导麻醉并持续至手术结束。在本实施例中，对传统组大鼠以经典法进行肝脏切除，对改良组以改良法进行肝脏切除，大鼠肝脏的切除比例为70％。进一步的，进行肝脏切除的经典法为不阻断入肝血流组的方式进行切除，改良法为阻断入肝血流组的方法式进行切除。具体的，经典法为通过用生理盐水润湿的面前拨开中央小叶，剪开镰状韧带本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，包括以下步骤：S1、选取若干只健康SPF级雄性成年大鼠及SPF级雄性老年大鼠；S2、将S1中的雄性成年大鼠均分为四组，分别为传统一组、传统二组、改良一组和改良二组，同时将雄性老年大鼠均分为传统A组和改良B组；S3、将S1中的雄性大鼠以S2中的组类分开后，统一放于恒温恒湿动物房中，提供标准饲料与清水自由饮食饲养12H后，并在术前12H时对大鼠禁水；S4、术前对所有大鼠进行快速诱导麻醉并持续至手术结束，对传统组大鼠以经典法进行肝脏切除，对改良组以改良法进行肝脏切除；S5、对进行肝脏切除后的传统一组、改良一组及改良B组中的大鼠，在手术结束后30分钟后注入甲肾上腺激素和胰岛素，并在手术后4小时内对大鼠进行TNF‑α及IL‑6的注入，对传统二组、改良二组和传统A组进行正常放回；S6、在术后24小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF、CB和CDK的注入；S7、在术后48小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF的注入；S8、在术后6‑10小时后对大鼠恢复饮水，20‑24小时后恢复饲料供给，针对改良B组中的老年大鼠投以特殊饲料进行单独饲养，其余分组的大鼠投以标准饲料及清水进行饲养；S9、在术后50小时、1天、2天、3天、5天、7天六个时间点对各分组中的大鼠进行批量处死解剖，并统计并评估肝脏的再生状况。...

【技术特征摘要】
1.一种用于提高ALPPS诱导肝组织生长率的方法，包括以下步骤：S1、选取若干只健康SPF级雄性成年大鼠及SPF级雄性老年大鼠；S2、将S1中的雄性成年大鼠均分为四组，分别为传统一组、传统二组、改良一组和改良二组，同时将雄性老年大鼠均分为传统A组和改良B组；S3、将S1中的雄性大鼠以S2中的组类分开后，统一放于恒温恒湿动物房中，提供标准饲料与清水自由饮食饲养12H后，并在术前12H时对大鼠禁水；S4、术前对所有大鼠进行快速诱导麻醉并持续至手术结束，对传统组大鼠以经典法进行肝脏切除，对改良组以改良法进行肝脏切除；S5、对进行肝脏切除后的传统一组、改良一组及改良B组中的大鼠，在手术结束后30分钟后注入甲肾上腺激素和胰岛素，并在手术后4小时内对大鼠进行TNF-α及IL-6的注入，对传统二组、改良二组和传统A组进行正常放回；S6、在术后24小时内，对传统一组和改良一组及改良B组进行HGF、CB和CDK的注入；S7、在术后48小时内，对传统一组和...

【专利技术属性】
技术研发人员：于剑，田虎，付真，张玲玲，
申请(专利权)人：山东省千佛山医院，
类型：发明
国别省市：山东,37