一种桦褐孔菌多糖的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种桦褐孔菌多糖的制备方法，利用水提醇沉、反复冻融、脱蛋白、透析、冷冻干燥、亲和色谱等方法，从桦褐孔菌中分离纯化出具有抗氧化、抗衰老功能的多糖组分；桦褐孔菌多糖组分具有强的抗氧化活性；桦褐孔菌多糖预处理可抑制依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖抑制和凋亡，抑制依托泊苷引起的细胞衰老β‑半乳糖苷酶活性水平增加、衰老相关异染色质聚集和线粒体膜电位下降；桦褐孔菌多糖预处理可抑制依托泊苷诱导的p53、p21、p16蛋白和mRNA表达水平升高。通过本发明专利技术方法制备的桦褐孔菌多糖组分具有良好的抗氧化、抗衰老活性，作为新型抗衰老保护药物有着广阔的应用前景。

Preparation and application of a polysaccharide from Inonotus obliquus

The invention discloses a preparation method of Polysaccharide from Inonotus obliquus. The polysaccharide components with antioxidant and anti-aging functions are separated and purified from Inonotus obliquus by water extraction, ethanol precipitation, repeated freeze-thaw, deproteinization, dialysis, freeze-drying, affinity chromatography, etc. The polysaccharide components of Inonotus obliquus have strong antioxidant activity, and the pretreatment of Polysaccharide from Inonotus obliquus can inhibit the induction of etoposide. Inhibition of proliferation and apoptosis of rat aortic smooth muscle cells inhibited the increase of beta galactosidase activity, aggregation of aging-related heterochromatins and decrease of mitochondrial membrane potential induced by etoposide, and the increase of expression of p53, p21, p16 protein and mRNA induced by etoposide was inhibited by polysaccharide pretreatment of Inonotus obliquus. The polysaccharide component of Inonotus obliquus prepared by the method has good antioxidant and anti-aging activities, and has broad application prospects as a new anti-aging protective drug.

【技术实现步骤摘要】
一种桦褐孔菌多糖的制备方法及其应用
本专利技术涉及天然产物活性成分领域，更具体的说是涉及一种桦褐孔菌多糖的制备方法及其应用。
技术介绍
桦褐孔菌(Inonotusobliquus(Fr.)Pilt)是一种珍稀而名贵的药用真菌，在《全国中草药汇编》中记载名为桦菌芝，又名桦树茸、白桦茸、桦树菇、褐多孔菌、桦癌褐孔菌、斜管纤孔菌、蔷甘、和西伯利亚灵芝，生物学范畴上，属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐卧孔菌属，多寄生于白桦、银桦、榆树、赤杨等树皮下或被砍伐后的枯干上，主要分布在北纬45°-50°的地区。早在12世纪，满族人们就用桦褐孔菌调理疾病，据称满族人民在大雪封山时是依靠桦褐孔菌治疗百病，多年以来，桦褐孔菌在许多国家被用于抵抗疾病。值得一提的是，其在多种疾病治疗期间未被发现明显的毒性和副反应。美国FDA将其认证称为“TheKingofHerbs”，并列入“特殊的天然物质”。现代研究表明，桦褐孔菌活性成分有：多糖、三萜类(桦褐孔菌醇、羊毛甾醇、麦角甾醇、栓菌酸、桦褐孔菌素等)、黄酮类、氨基酸类、木质素类、生物碱类、多酚类、叶酸衍生物、芳香物质(香草酸、丁香酸和γ羟基苯甲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桦褐孔菌多糖的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)将干燥的桦褐孔菌粉碎，过筛；(2)将步骤(1)粉碎过筛的桦褐孔菌粉末用80％乙醇回流脱脂18～24h，残渣利用水提醇沉法提取多糖，反复冻融，酶‑Sevag联合法脱蛋白，截留分子量3500Da透析去除小分子物质，在‑45～‑55℃及真空度5～100Pa下冷冻干燥得到粗多糖；(3)将步骤(2)获得的粗多糖用蒸馏水复溶成5％的糖溶液，过滤后上样到DEAE‑cellulose柱，用0→1mol/L NaCl梯度洗脱，收集洗脱液，苯酚‑硫酸法测定多糖含量，得到两种主要多糖组分；(4)室温流水透析步骤(3)得到的两种主要多糖组分，分别采用Se...

【技术特征摘要】
1.一种桦褐孔菌多糖的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)将干燥的桦褐孔菌粉碎，过筛；(2)将步骤(1)粉碎过筛的桦褐孔菌粉末用80％乙醇回流脱脂18～24h，残渣利用水提醇沉法提取多糖，反复冻融，酶-Sevag联合法脱蛋白，截留分子量3500Da透析去除小分子物质，在-45～-55℃及真空度5～100Pa下冷冻干燥得到粗多糖；(3)将步骤(2)获得的粗多糖用蒸馏水复溶成5％的糖溶液，过滤后上样到DEAE-cellulose柱，用0→1mol/LNaCl梯度洗脱，收集洗脱液，苯酚-硫酸法测定多糖含量，得到两种主要多糖组分；(4)室温流水透析步骤(3)得到的两种主要多糖组分，分别采用SepharoseCL-6B柱层析进一步纯化，0.15mol/LNaCl洗脱，室温流水透析18～24h，在-45～-55℃及真空度5～100Pa下冷冻干燥，得到分子量均一的桦褐孔菌不同多糖组分。2.根据权利要求1所述的一种桦褐孔菌多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述残渣利用水提醇沉法提取多糖，反复冻融，酶-Sevag法联合脱蛋白，透析去除小...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙新，任婷，
申请(专利权)人：北华大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22