一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法技术

本发明专利技术公开了一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，具体涉及药残检测领域，该预处理方法包括如下步骤：在待测样品中加入提取剂以及除杂剂，匀浆处理，得到样品浆液。在样品浆液中，加入氧化剂，反应后，冷冻离心处理，得到上清液和残渣。上清液经旋蒸至干后，采用纯净水复溶，得到样本溶液。在样本溶液中加入磁性吸附剂，离心振荡后，采用磁性物质将样本溶液中附着有植物生长调节剂的磁性吸附剂分离，得到附着有吸附质的磁性吸附剂和余液。磁性吸附剂经洗脱，得到洗脱液和脱附后的磁性吸附剂。洗脱液经氮吹至干，并采用乙腈‑甲酸水溶液复溶，过滤膜，得到预处理完成的上机分析液。本发明专利技术具有准确性高以及操作简单的优点。

A Pretreatment Method for Determining Residues of Plant Growth Regulators in Melons and Fruits

【技术实现步骤摘要】
一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法
本专利技术涉及药残检测领域，具体为一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法。
技术介绍
植物生长调节剂是一种人工合成、具有和天然植物激素相似生理和生物学效应的活性物质，对植物的生长和发育有重要的调节和控制作用。因其效用高、用量小、残毒少的特点而被广泛使用，已经成为农业生产中不可缺少的重要措施。然而，随着PGRs使用的日益增多以及使用范围的逐渐扩大，其安全性也越来越受到重视。研究表明，残留在植物中的PGRs会随着食物链进入人体内，过量食用会导致人体免疫功能下降,骨骼疏松，甚至致畸、致癌、致基因突变等后果。近年来，国内外关于PGRs残留的检测方法主要有毛细管电泳-质谱法(CE-MS)、酶联免疫法(ELISA)、气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。植物中PGRs多残留测定的难点在于基质干扰非常严重，故对于预处理方法的要求较高。因此，建立一套高效、精确高的植物生长调节剂残留量的预处理方法是亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术提供了一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，该预处理方法具有准确性高以及操作简单的优点。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，该预处理方法包括如下步骤：S01、在待测样品中加入提取剂以及除杂剂，匀浆处理，得到样品浆液；S02、在得到的样品浆液中，加入氧化剂，在30～50℃的温度条件下，反应20～40min，待自然冷却后，冷冻离心处理，得到上清液和残渣；S03、所述上清液经旋蒸至干后，采用纯净水复溶，得到样本溶液；S04、在所述样本溶液中加入磁性吸附剂，离心振荡后，采用磁性物质将样本溶液中附着有植物生长调节剂的磁性吸附剂分离，得到附着有吸附质的磁性吸附剂和余液；S05、附着有吸附质的磁性吸附剂经洗脱剂洗脱，得到洗脱液和脱附后的磁性吸附剂；S06、所述洗脱液经氮吹至干，并采用乙腈-甲酸水溶液复溶，过滤膜，得到预处理完成的上机分析液；其中，所述除杂剂包括除蛋白剂以及抗菌剂。作为优选，所述除蛋白剂选自乙腈、乙醇、丙酮以及四氢呋喃中的至少一种。作为优选，所述抗菌剂选自羟基壳聚糖、纳米二氧化钛以及纳米二氧化锌中的至少一种。作为优选，所述除杂剂还包括果胶酶以及纤维素酶。作为优选，步骤S01具体为：在待测样品中按次序加入果胶酶、纤维素酶、提取剂以及抗菌剂，充分匀浆处理后，加入除蛋白剂，得到步骤S02中所述的样品浆液。作为优选，在步骤S02中，氧化剂选用双氧水或者碘单质。作为优选，所述提取剂选用甲酸和乙腈的混合溶液、乙腈、氢氧化钠和乙腈的混合溶液中的任意一种。其中，在甲酸和乙腈的混合溶液中，甲酸的质量分数为1％～3％；氢氧化钠和乙腈的混合溶液中，氢氧化钠的质量分数为1％。作为优选，在步骤S04中，所述磁性吸附剂选自磁性石墨烯与β-环糊精制成的复合材料或者壳聚糖和四氧化三铁制成的复合材料。作为优选，在步骤S05中，洗脱剂选自甲醇、乙酸乙酯、乙腈以及二氯甲烷中的任意一种。本专利技术的有益效果为：(1)基于磁性石墨烯的磁性固相萃取技术是近年来发展起来的一种新型样品处理技术，它结合了磁性萃取操作简单、省时快速和石墨烯具有超大的比表面积、较好的化学稳定性和对有机化合物产生强大的π-π相互作用的特性，在样品前处理方面取得了一定的进展。(2)通过在待测样品中加入除杂剂，以净化基质中特定的、可对实验结果造成干扰的成分，从而更有利于实验结果的准确性。具体实施方式实施例1本实施例提供一种技术方案：一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，其特征在于，包括如下步骤：S01、在待测样品中按次序加入果胶酶、纤维素酶、甲酸和乙腈的混合溶液以及羟基壳聚糖，充分匀浆处理后，加入丙酮，得到样品浆液。其中，果胶酶和纤维素酶可酶解细胞壁中的果胶和纤维素成分，使得细胞内的植物生长调节剂更容易因机械搅碎而流出，且被甲酸和乙腈的混合溶液提取出来。同时，待测样品在匀浆的过程中，加入抗菌剂羟基壳聚糖的目的在于：防止微生物滋生，且分解有机物代谢产生酸或醇等，进而对实验结果造成干扰。并且，当天气温度较高时，加入抗菌剂也有利于延长样品浆液的存放时间。为了防止植物生长调节剂，如IAA与蛋白质络合形成结合态的络合物，当待测样品溶液匀浆完成后，添加丙酮以除去蛋白质(使其沉淀)。S02、在得到的样品浆液中，加入双氧水，在30～50℃的温度条件下，反应30min。由于样品浆液中含有肌醇，而肌醇易与植物生长调节剂络合形成络合物，如IAA易与肌醇络合成吲哚乙酸肌醇，从而导致后期测定植物生长调节剂组分的时候，该种植物生长调节剂的含量偏低。因此，通过上述氧化反应，肌醇可被氧化而断裂成葡萄糖醛酸，以防止其结合植物生长调节剂。当样品浆液反应结束后，通过冷冻离心处理，进一步除去蛋白质，从而得到纯净的上清液和残渣。S03、所述上清液经旋蒸至干后，采用纯净水复溶，得到样本溶液。S04、在所述样本溶液中加入磁性石墨烯与β-环糊精制成的复合材料，离心振荡后，采用磁性物质(磁铁)将样本溶液中附着有植物生长调节剂的上述符合材料吸出，得到附着有吸附质的复合材料和余液。利用β-环糊精修饰磁性石墨烯制备纳米修饰材料，不但保留了β-环糊精与磁性石墨烯两者的固有性能，也起到了增强磁性石墨烯水溶性，防止其自聚集的作用。因此，本专利技术所提供的方案通过上述磁性石墨烯与β-环糊精制成的复合材料吸附目标待测物，不仅操作更加简单，精确度也非常高。S05、附着有吸附质的复合材料经乙腈洗脱，得到洗脱液和脱附后的复合材料。该复合材料可经过多次洗脱后重复利用。S06、所述洗脱液经氮吹至干，并采用乙腈-甲酸水溶液复溶，过滤膜，得到预处理完成的上机分析液。实施例2本实施例与实施例1所提供的预处理方法相同，仅在步骤S01采用纳米二氧化钛和纳米二氧化锌的混合物作为抗菌剂。实施例3采用实施例1的方法，选用番茄、黄瓜和草莓等空白样品进行添加回收实验，每个添加水平做6个平行，结果见下表。9种PGRs的平均回收率为71.7％～101％，相对标准偏差(RSD)为0.9％～10.9％，具有良好的准确度和精密度，符合多残留分析要求。具体结果如下：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，该预处理方法包括如下步骤：S01、在待测样品中加入提取剂以及除杂剂，匀浆处理，得到样品浆液；S02、在得到的样品浆液中，加入氧化剂，在30～50℃的温度条件下，反应20～40min，待自然冷却后，冷冻离心处理，得到上清液和残渣；S03、所述上清液经旋蒸至干后，采用纯净水复溶，得到样本溶液；S04、在所述样本溶液中加入磁性吸附剂，离心振荡后，采用磁性物质将样本溶液中附着有植物生长调节剂的磁性吸附剂分离，得到附着有吸附质的磁性吸附剂和余液；S05、附着有吸附质的磁性吸附剂经洗脱剂洗脱，得到洗脱液和脱附后的磁性吸附剂；S06、所述洗脱液经氮吹至干，并采用乙腈‑甲酸水溶液复溶，过滤膜，得到预处理完成的上机分析液；其中，所述除杂剂包括除蛋白剂以及抗菌剂。

【技术特征摘要】
1.一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，该预处理方法包括如下步骤：S01、在待测样品中加入提取剂以及除杂剂，匀浆处理，得到样品浆液；S02、在得到的样品浆液中，加入氧化剂，在30～50℃的温度条件下，反应20～40min，待自然冷却后，冷冻离心处理，得到上清液和残渣；S03、所述上清液经旋蒸至干后，采用纯净水复溶，得到样本溶液；S04、在所述样本溶液中加入磁性吸附剂，离心振荡后，采用磁性物质将样本溶液中附着有植物生长调节剂的磁性吸附剂分离，得到附着有吸附质的磁性吸附剂和余液；S05、附着有吸附质的磁性吸附剂经洗脱剂洗脱，得到洗脱液和脱附后的磁性吸附剂；S06、所述洗脱液经氮吹至干，并采用乙腈-甲酸水溶液复溶，过滤膜，得到预处理完成的上机分析液；其中，所述除杂剂包括除蛋白剂以及抗菌剂。2.根据权利要求1所述的一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，其特征在于，所述除蛋白剂选自乙腈、乙醇、丙酮以及四氢呋喃中的至少一种。3.根据权利要求1所述的一种测定瓜果中植物生长调节剂残留量的预处理方法，其特征在于，所述抗菌剂选自羟基壳聚糖、纳米二氧化钛以及纳米二氧化锌中的至少一种。4.根据权利要求1所述的一种测定瓜果中植物生长调...

【专利技术属性】
技术研发人员：李樱红，孟廷廷，周明昊，赵超群，龚青，赵维良，
申请(专利权)人：浙江省食品药品检验研究院，浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33