一种向日葵花盘挥发物的收集方法及装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种向日葵花盘挥发物的收集方法及装置，其方法包括：4月底种植向日葵，待至7月中下旬，向日葵花期茂盛时，挑选无虫危害的向日葵花盘用于挥发物收集；将向日葵花盘剪下后，立即用无菌蒸馏水浸泡的湿润棉花包裹住与花盘连接的植株茎秆受伤处，防止受伤处释放额外的挥发物；用圆柱形玻璃罩将待测向日葵花盘罩住，放在洁净A4纸铺垫的平板玻璃桌上，用以收集花盘挥发物；固相微萃取的萃取头在230℃条件下被活化30分钟后，将其经玻璃罩上口径的不锈钢圆孔插入玻璃罩内，连续富集向日葵花盘挥发物；挥发物被富集30分钟后，立即取出萃取头，230℃条件下热解析2分钟后进行气相色谱–质谱联用分析。本发明专利技术能准确科学地鉴定出向日葵花盘释放的挥发物。

A method and device for collecting volatiles from sunflower discs

【技术实现步骤摘要】
一种向日葵花盘挥发物的收集方法及装置
本专利技术属于害虫生物防治
，具体涉及一种向日葵花盘挥发物的收集方法及装置。
技术介绍
向日葵(Helianthusannuus)为菊科向日葵属的一年生草本植物，其植株在幼苗期、现蕾期和成熟期释放挥发物相对较少，而在开花期释放的较多且难被收集。此外，向日葵开花期释放的挥发物主要集中在花盘上。收集向日葵花盘挥发物，是鉴定其化学组分的重要前期准备过程，因此，设计精准科学的挥发物收集装置，是鉴定向日葵花盘挥发物组分的关键因素。固相微萃取法(Solid-phasemicroextraction,SPME)和吸附剂吸附法是收集植物挥发物的两种方法。查阅相关资料发现，植物挥发物组分鉴定的准确性会因收集方法的不同而发生变化。这两种方法是否都能精准测定向日葵花盘释放的挥发物，有待核实。据记载，收集向日葵花盘挥发物的装置，主要是用纱网袋罩在花盘上，这种装置有以下不足：1)纱网袋有网眼缝隙，向日葵花盘释放的挥发物会从这些网眼“逃逸”出去，因此，采用该装置检测到的向日葵花盘挥发物成分，会比实际释放出的少；2)纱网袋一般由聚丙烯(PP)、聚乙烯(PE)等制成，且味道比较大，若将纱网袋罩在花盘上，这会增加不少杂质，依据该装置收集的挥发物成分并非是花盘自身实际释放出的。故而，避免以上两点不足，对准确收集并鉴定向日葵花盘挥发物，尤为重要。在农林业生产上，向日葵常常被作为诱集植物控制靶标植食性昆虫，其花盘能够诱杀大豆上的钻心虫(Dectestexanus)、黄瓜上的长毛草盲蝽(Lygusrugulipennis)以及辣椒上的茶翅蝽(Halyomorphahalys)；此外，向日葵花盘对棉田绿盲蝽(Lygocorislucorum)、果园白星花金龟(Potosiabrevitarsis)和桃蛀螟(Conogethespnctiferalis)也具有较强的引诱作用。为此，成功收集与准确鉴定向日葵花盘挥发物，对进一步分析每种挥发物引诱靶标植食性昆虫的功能至关重要，更是研发植物引诱剂产品的必要条件。
技术实现思路
本专利技术的目的是根据当前向日葵花盘挥发物收集装置的缺陷而提供的一种挥发物收集方法及收集装置，其原理是经过改进花盘挥发物收集装置，达到完全收集花盘挥发物、避免杂质气体干扰花盘释放挥发物的目标；此外，比较2种收集方法(本专利技术、Tenax吸附剂吸附法)对收集与鉴定向日葵花盘挥发物的影响。实现本专利技术目的的具体技术方案是：一种向日葵花盘挥发物的收集方法，该方法包括以下具体步骤：a、种植向日葵及采集向日葵花盘选择裸露的田块，且田块附近没有其他植物，以避免其他植物对向日葵的化感作用；4月底，在裸露田块里，用铁锹挖点穴，每穴深15-25cm、间距40-50cm，将3-5粒饱满的向日葵籽种放进每个点穴内；之后，5-7天浇水一次；种植过程中，不使用任何农药；待至向日葵花期茂盛时即7月中、下旬，挑选无虫危害的向日葵花盘；b、向日葵花盘处理将向日葵花盘剪下，立即用无菌蒸馏水浸泡过的湿润棉花包裹住与向日葵花盘连接的植株茎秆受伤处，防止受伤处释放额外的挥发物；然后，使向日葵花盘竖立摆放在洁净的平板玻璃上，用洁净的圆柱形玻璃罩将向日葵花盘罩住；c、微萃取挥发物用洁净圆形不锈钢片盖住玻璃罩上口径，不锈钢片中间有圆孔，其孔的半径1.5-1.7mm，用铝箔纸封孔；将萃取头在气相色谱的汽化室活化，活化温度230℃，活化30min后随即将萃取头通过不锈钢片中间的圆孔插入到玻璃罩内富集挥发物，富集30min后取出萃取头，230℃条件下热解析2min后进行气相色谱–质谱(GC/MS)联用分析；d、挥发物检测挥发物用气相色谱-质谱联用仪分析；HP-Wax石英毛细管色谱柱规格为30m×0.25mm×0.25μm，用99.999%的氦气作为载气气谱，氦气流量为1ml·min-1，汽化温度为230℃，分流进样，分流比15∶1；柱起始温度60℃，此温度下恒温2min，然后以20℃·min-1的速率逐渐升至230℃，230℃恒温10min；EI的电离方式，230℃的接口温度，200℃的离子源温度；70eV电离能，400V倍增电压，41~400amu的扫描质量范围；根据质谱库，鉴定向日葵花盘释放挥发物的化学成分；参照标准化合物的离子峰和保留时间，对比扫描的质谱图和检索结果的标准图谱，鉴定每种挥发物的化学结构；采用峰面积归一化法，计算每种向日葵花盘挥发物的相对含量。一种实施上述方法的装置，该装置包括平板玻璃、圆柱形玻璃罩、不锈钢片及微萃取器，所述圆柱形玻璃罩顶部设有圆孔，不锈钢片中部设有小孔，圆柱形玻璃罩设于平板玻璃上，不锈钢片盖在圆柱形玻璃罩顶部的圆孔上，微萃取器通过不锈钢片中部的小孔伸入圆柱形玻璃罩内。所述不锈钢片中部小孔半径为1.3-1.7mm。本专利技术其装置结构的超微化决定了它能避免经典固相萃取的较多缺点；挥发物在汽化室内被解吸后,靠流动相将其导入色谱柱,完成提取、分离和浓缩的一整套过程；具有操作更简易、携带更便利、运行费用更低、萃取速度更快、功能更齐全等优点，克服了固相萃取回收率低、吸附剂孔道易堵塞等缺点。此外，与传统的纱网袋相比，本专利技术中的玻璃罩更能收集完全向日葵实际释放的挥发物、也不会带来杂质气体。附图说明图1为本专利技术装置结构示意图；图2为本专利技术装置使用状态图；图3为Tenax吸附剂吸附法收集向日葵花盘挥发物装置示意图；图4为本专利技术采集方法的向日葵花盘挥发物的GC-MS总离子流色谱图；图5为Tenax-TA吸附剂吸附法的向日葵花盘挥发物的GC-MS总离子流色谱图。具体实施方式参阅图1，本专利技术装置包括平板玻璃4、圆柱形玻璃罩5、不锈钢片6及微萃取器7，所述圆柱形玻璃罩5顶部设有圆孔，不锈钢片6中部设有小孔，圆柱形玻璃罩5设于平板玻璃4上，不锈钢片6盖在圆柱形玻璃罩5顶部的圆孔上，微萃取器7通过不锈钢片6中部的小孔伸入圆柱形玻璃罩5内，微萃取器7的萃取头8富集挥发物。参阅图2，收集向日葵花盘3挥发物时，将向日葵花盘剪下，立即用无菌蒸馏水浸泡过的湿润棉花1包裹住与向日葵花盘3连接的植株茎秆受伤处，将向日葵花盘3竖立摆放在洁净的平板玻璃4上，用洁净的圆柱形玻璃罩5将向日葵花盘3罩住；用洁净圆形不锈钢片6盖住玻璃罩5上口径，不锈钢片6中间有圆孔，用铝箔纸封孔；将微萃取器7在气相色谱的汽化室活化，活化后随即将微萃取器7通过不锈钢片6中间的圆孔插入到玻璃罩5内富集挥发物，富集后取出微萃取器7，对微萃取器7进行气相色谱–质谱(GC/MS)联用分析。实施例1a、设计试验处理：种植向日葵和收集向日葵花盘挥发物向日葵(2016年4月购于京东网恒林园艺专营店)被种植在裸露的田块上(田块附近没有其他植物，以避免其他植物对向日葵的化感作用)；4月底，在裸露地用铁锹挖“点穴”(每穴深度15-25厘米、间距40-50厘米)，将3-5粒饱满的向日葵种子放进每个“点穴”内；之后，5-7天浇水一次；种植过程中，不使用任何农药；待至向日葵花期茂盛时(7月20日左右)，挑选无虫危害的向日葵花盘用于挥发物收集。将向日葵花盘用剪刀剪下后，立即用湿润棉花(无菌蒸馏水浸泡)包裹住与花盘连接的植株茎秆受伤处，防止受伤处释放额外的挥发物；然后，用圆柱形玻璃罩将待测向日葵花盘罩住，放在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种向日葵花盘挥发物的收集方法，其特征在于，该方法包括以下具体步骤：a、种植向日葵及采集向日葵花盘选择裸露的田块，且田块附近没有其他植物，以避免其他植物对向日葵的化感作用；4月底，在裸露田块里，用铁锹挖点穴，每穴深15‑25cm、间距40‑50cm，将3‑5粒饱满的向日葵籽种放进每个点穴内；之后，5‑7天浇水一次；种植过程中，不使用任何农药；待至向日葵花期茂盛时,即7月中、下旬，挑选无虫危害的向日葵花盘；b、向日葵花盘处理将向日葵花盘剪下，立即用无菌蒸馏水浸泡过的湿润棉花包裹住与向日葵花盘连接的植株茎秆受伤处，防止受伤处释放额外的挥发物；然后，使向日葵花盘竖立摆放在洁净的平板玻璃上，用洁净的圆柱形玻璃罩将向日葵花盘罩住；c、微萃取挥发物用洁净圆形不锈钢片盖住玻璃罩上口径，不锈钢片中间有圆孔，其孔的半径1.3‑1.7mm，用铝箔纸封孔；将萃取头在气相色谱的汽化室活化，活化温度230℃，活化30min后，随即将萃取头通过不锈钢片中间的圆孔插入到玻璃罩内富集挥发物，富集30min后取出萃取头，230℃条件下热解析2 min后进行气相色谱–质谱(GC/MS)联用分析；d、挥发物检测挥发物用气相色谱‑质谱联用仪分析；HP‑Wax石英毛细管色谱柱规格为30m×0.25mm×0.25μm，用99.999%的氦气作为载气气谱，氦气流量为1ml·min...

【技术特征摘要】
1.一种向日葵花盘挥发物的收集方法，其特征在于，该方法包括以下具体步骤：a、种植向日葵及采集向日葵花盘选择裸露的田块，且田块附近没有其他植物，以避免其他植物对向日葵的化感作用；4月底，在裸露田块里，用铁锹挖点穴，每穴深15-25cm、间距40-50cm，将3-5粒饱满的向日葵籽种放进每个点穴内；之后，5-7天浇水一次；种植过程中，不使用任何农药；待至向日葵花期茂盛时,即7月中、下旬，挑选无虫危害的向日葵花盘；b、向日葵花盘处理将向日葵花盘剪下，立即用无菌蒸馏水浸泡过的湿润棉花包裹住与向日葵花盘连接的植株茎秆受伤处，防止受伤处释放额外的挥发物；然后，使向日葵花盘竖立摆放在洁净的平板玻璃上，用洁净的圆柱形玻璃罩将向日葵花盘罩住；c、微萃取挥发物用洁净圆形不锈钢片盖住玻璃罩上口径，不锈钢片中间有圆孔，其孔的半径1.3-1.7mm，用铝箔纸封孔；将萃取头在气相色谱的汽化室活化，活化温度230℃，活化30min后，随即将萃取头通过不锈钢片中间的圆孔插入到玻璃罩内富集挥发物，富集30min后取出萃取头，230℃条件下热解析2min后进行气相色谱–质谱(GC/MS)联用分析；d、挥发物检测挥发物用气相...

【专利技术属性】
技术研发人员：万年峰，蒋杰贤，季香云，张浩，陈义娟，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海,31