一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，以四甲基联苯二胺为发色底物，在筒状蛋白纳米反应器内，H2O2还原成H2O，四甲基联苯二胺被氧化为蓝色的二亚胺化合物，644nm处产生特征吸收峰；加入浓硫酸后，显色反应终止，通过450nm处的吸收峰进行定量分析；筒状蛋白纳米反应器主体为两端开口的筒状蛋白，并且筒状蛋白两端开口处内表面通过疏水作用结合具有催化活性的疏水客体；筒状蛋白的筒壁为多孔结构。将筒状蛋白纳米反应器应用于显色检测可通过纳米尺寸效应提高监测的灵敏度和准确率。

Application of a tubular protein nanoreactor in color detection

The invention discloses the application of tubular protein nanoreactor in color detection. In tubular protein nanoreactor, tetramethylbiphenylenediamine is used as chromogenic substrate, in which hydrogen peroxide is reduced to hydrogen peroxide, tetramethylbiphenylenediamine is oxidized to blue diimide compound, and a characteristic absorption peak is generated at 644 nm; after adding concentrated sulfuric acid, the chromogenic reaction is terminated and carried out through the absorption peak at 450 nm. Quantitative analysis; the main body of tubular protein nanoreactor is tubular protein with opening at both ends, and the inner surface of the opening at both ends of tubular protein binds hydrophobic guest with catalytic activity through hydrophobic interaction; the tubular wall of tubular protein is porous structure. The application of tubular protein nanoreactor in color detection can improve the sensitivity and accuracy of monitoring through nano-size effect.

【技术实现步骤摘要】
一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用
本专利技术涉及生物纳米
，更具体的说是涉及一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用。
技术介绍
常见的纳米反应器大体可以分为四大类，即反相微乳液、嵌段共聚物、多孔材料和层状盐酸盐。但人工合成纳米结构的精致性、均一性和单分散性均无法与基于蛋白笼的蛋白纳米反应器相比较。利用成熟的分子生物学技术，人们可以方便地克隆出纳米蛋白笼组成单元的基因，并且可以利用异源表达体系大量合成出重组蛋白纳米笼，进而为其应用提供基础。目前，显色检测是一种广泛应用的检测方法，其简便、快捷、准确、检测限低、灵敏度高。而纳米反应器会产生纳米尺寸效应，显著提高反应速率。因此，如何将蛋白笼构筑的单分散性纳米反应器应用于显色检测中、结合敏感的色原底物提高检测灵敏度和准确性成为本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，实现了高灵敏度、高准确率的检测。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，以四甲基联苯二胺为发色底物，在筒状蛋白纳米反应器内，H2O2还原成H2O，四本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，其特征在于，以四甲基联苯二胺为发色底物，在筒状蛋白纳米反应器内，H2O2还原成H2O，四甲基联苯二胺被氧化为蓝色的二亚胺化合物，644nm处产生特征吸收峰；加入浓硫酸后，显色反应终止，通过450nm处的吸收峰进行定量分析；所述筒状蛋白纳米反应器主体为两端开口的筒状蛋白，并且筒状蛋白两端开口处内表面通过疏水作用结合具有催化活性的疏水客体；所述筒状蛋白的筒壁为多孔结构。

【技术特征摘要】
1.一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，其特征在于，以四甲基联苯二胺为发色底物，在筒状蛋白纳米反应器内，H2O2还原成H2O，四甲基联苯二胺被氧化为蓝色的二亚胺化合物，644nm处产生特征吸收峰；加入浓硫酸后，显色反应终止，通过450nm处的吸收峰进行定量分析；所述筒状蛋白纳米反应器主体为两端开口的筒状蛋白，并且筒状蛋白两端开口处内表面通过疏水作用结合具有催化活性的疏水客体；所述筒状蛋白的筒壁为多孔结构。2.根据权利要求1所述的一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，其特征在于，显色检测具体步骤为：将20μM筒状蛋白纳米反应器溶液与3mM四甲基联苯二胺溶液等体积混合，静置10min，得到混合液；之后加入所述混合液一半体积的含H2O2的溶液，30℃水浴锅中孵育20min；孵育后加入体积分数20％的硫酸终止显色反应，利用紫外可见分光光度计测量450nm处的吸光度；以H2O2浓度为横坐标，450nm处的吸光度为纵坐标绘制标准曲线；检测未知溶液中H2O2含量时，测定450nm处的吸光度值，根据标准曲线即可推算出H2O2浓度。3.根据权利要求1所述的一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，其特征在于，所述筒状蛋白纳米反应器内径4.5nm，外径14nm，高14.6nm。4.根据权利要求3所述的一种筒状蛋白纳米反应器在显色检测中的应用，其特征在于，所述筒状蛋白纳米反应器的制备方法包括如下步骤：(1)以pET-28a+为载体将SEQIDNO:1所示基因转入大肠杆菌菌株C41(DE3)中，构建得到工程菌；对工程菌进行扩大培养，诱导筒状蛋白表达，提取纯化筒状蛋白；(2)将具有催化活性的疏水客体分散于含T...

【专利技术属性】
技术研发人员：王小强，杨伟娟，张辉，
申请(专利权)人：青岛古高生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37