解淀粉芽孢杆菌菌株、组合物和用途制造技术

本发明专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种解淀粉芽孢杆菌菌株、组合物和用途。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No:16748；保藏时间为：2018年11月15日。除高效降解淀粉外，该菌株的其它性状与野生型解淀粉芽孢杆菌株保持一致，符合实验目的要求。该菌株可用于高效降解作物秸秆、增加土壤腐殖质、提高土壤肥力、抑制有害微生物繁殖等。

Bacillus amyloliquefaciens strains, compositions and Applications

The invention relates to the field of microorganisms, in particular to a Bacillus amylolytica strain, composition and use. The strain is deposited in the General Microbial Center of the China Council for the Preservation of Microbial Species. The number of the strain is CGMCC No: 16748 and the storage time is November 15, 2018. In addition to degrading starch efficiently, other properties of the strain were consistent with those of wild-type Bacillus amylolytica strain, which met the requirements of the experiment. The strain can be used to degrade crop straw efficiently, increase soil humus, improve soil fertility and inhibit the propagation of harmful microorganisms.

【技术实现步骤摘要】
解淀粉芽孢杆菌菌株、组合物和用途
本专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种解淀粉芽孢杆菌菌株、组合物和用途。
技术介绍
作物秸秆含有多种植物生长所需的营养元素，包括N、P、K等。秸秆还田后有利于增加土壤有机质含量、促进农业生态系统物质能量循环、提高农业可持续生产能力，是目前国家大力倡导的秸秆处理方式。然而，由于秸秆在土壤中腐解过程缓慢影响农田土壤整地播种质量，甚至降低作物产量。胡立峰等(2009)研究表明秸秆腐解不充分会影响下茬作物的生长。研究表明，利用秸秆腐熟剂腐熟作物秸秆，可以使秸秆的快速腐解，实现大量秸秆的快速还田(匡恩俊等，2014；张舒予等，2018)。秸秆腐熟剂是一种含有功能微生物的微生物肥料，具有促进作物秸秆快速腐解的作用(匡恩俊等，2014)，在减轻和防止大量秸秆还田给作物生长带来不利影响的同时，可促进土壤养分积累，提高作物产量和品质(Wittetal.,2000)。然而，目前缺乏能够快速腐解作物秸秆的高效菌株。因此，本研究通过诱变筛选的方法筛选能够高效降解淀粉的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，为后期腐熟剂的生产和应用提供材料。解淀粉芽孢杆菌除了具有解淀粉的能力，其还是一类重要的根际促生菌，在植物病害防治过程中发挥着重要作用(胡春江等，2004)，其在生长过程中可以产生一系列能够抑制真菌和细菌活性的代谢物。解淀粉芽孢杆菌在农业中具有广泛的应用。Hiradate等研究发现解淀粉芽孢杆菌对桑树炭疽病具有较强的抑制作用。另外，研究还表明，解淀粉芽孢杆菌对玉米枯萎病、草莓灰霉病，设施蔬菜根结线虫，花生白绢病，小麦黄花病，山核桃根腐病，玉米叶斑病，水稻纹枯病，苹果斑点落叶病番茄枯萎病病等具有较强的抑制作用(段海明等2017；谷春艳，2017；刘刚2017)。在促进植物生长方面，解淀粉芽孢杆杆菌可以促进玉米(刘拴成等，2010)、水稻(张荣胜，等2018)，增强植物的耐盐耐胁迫能力(陈淋2016.)，提高茶叶的产量和品质(周晨光等，2014；白志等，2014)。因此，研究利用解淀粉芽孢杆菌作为腐熟剂的功能菌不仅可以促进秸秆的降解、提高土壤有机质含量，还可以提高土壤的抗病性、促进作物的生长，对农田的可持续发展以及减肥减药具有重要意义。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术通过提供新的微生物菌株、培养物、组合物，以及可用于降解淀粉的方法解决前述需求。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术涉及一种分离的解淀粉芽孢杆菌菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:16748；保藏时间为：2018年11月15日。该菌株的保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码100101。该菌株在LB培养基上，培养初期菌落乳白色，圆形，表面湿润粘稠；培养后期表面干燥有皱褶，菌落中间有突起，边缘不整齐且干燥、不透明。菌体呈杆状，革兰氏染色为阳性，产芽孢。该菌株通过紫外诱变来源于中国农科院农业资源与农业区划研究所的野生菌株菌株所获得。根据本专利技术的另一方面，本专利技术还涉及一种组合物，其含有如上所述的解淀粉芽孢杆菌菌株的培养物。根据本专利技术的另一方面，本专利技术还涉及降解淀粉的方法，其包括如下步骤：使如上所述的组合物与含有淀粉的底物组合物在所述解淀粉芽孢杆菌菌株能够保持其体内淀粉酶活性的条件下接触。本专利技术还涉及如上所述的组合物在秸秆降解及土壤改良方面的应用。该菌株通过对野生型解淀粉芽孢杆菌的紫外线诱变获得。除高效降解淀粉外，该菌株的其它性状与野生型解淀粉芽孢杆菌株保持一致，符合实验目的要求。该菌株可用于高效降解作物秸秆、增加土壤腐殖质、提高土壤肥力、抑制有害微生物繁殖等。本申请提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，菌株名为007，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存编号CGMCCNo:16748；经保藏中心于2018年11月15日检测为存活菌株并保藏。具体实施方式本专利技术涉及一种分离的解淀粉芽孢杆菌菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:16748；保藏时间为：2018年11月15日。该菌株具有很强的解淀粉能力，其解淀粉能力的衡量指标如实施例“解淀粉能力强的菌株筛选”所描述，在给定条件下，具有5.0左右的透明圈大小(例如4.0～6.0)。本专利技术请求保护上述保藏编号的解淀粉芽孢杆菌菌株，以及在适度范围内发生突变，且仍然具有很强的解淀粉能力的突变菌株。所谓“解淀粉芽孢杆菌菌株的突变菌株”，是指基因组高度类似007菌株的基因组的解淀粉芽孢杆菌菌株。在本申请中，表述“本专利技术的解淀粉芽孢杆菌菌株”涵盖了所述突变株。突变菌株可通过与SEQIDNO：1所示的007菌株16SrRNA同源性≥99％(例如99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％的同源性)的方式进行限定，也可以通过基因组方面高度类似涵盖：一种解淀粉芽孢杆菌菌株的基因组同007菌株的基因组相比，包含至多150个突变事件，优选包含至多140个、130个、120个、110个、100个、90个、80个、70个、60个、50个、40个、30个或20个突变事件。突变事件被限定为SNP(单核苷酸多态性)或INDEL(插入、缺失，及两者的组合)。按如下方式确定突变事件的数量：将007菌株的基因组视为对照，鉴定存在于突变株基因组中的突变事件，每种突变事件(SNP或INDEL)代表一个突变事件(即，例如，插入含若干个核苷酸的序列只视作一个突变事件)。在该语境中，本专利技术的突变株的基因组序列由同007菌株相比所含突变事件的数量限定，除这种限定方式外，还可额外由其与007菌株的基因组序列的同一性百分比限定，其中同一性百分比在本文表示在一种菌株的基因组中发现存在于另一种菌株的基因组中的序列的百分比，具体地讲：a)在007菌株的基因组中发现并存在于突变菌株的基因组中的序列的百分比，或b)在突变菌株的基因组序列中发现并存在于007菌株的基因组中的序列的百分比。因此，与007菌株的不同之处只有插入(一个或多个)或只有缺失(一个或多个)的突变菌株，具有的基因组与007菌株的基因组的同一性百分比为100％，因为在一种菌株的基因组中完全发现了另一种菌株的整个基因组序列。在一个具体实施例中，由突变事件数量限定的本专利技术的突变株的基因组序列，与007菌株的基因组序列的同一性百分比为至少90％、为至少91％、为至少92％、为至少93％、为至少94％、为至少95％、为至少96％、为至少97％、为至少98％、为至少99％、为至少99.1％、为至少99.2％、为至少99.3％、为至少99.4％、为至少99.5％、为至少99.6％、为至少99.7％、为至少99.8％、为至少99.9％、为至少99.92％、为至少99.94％、为至少99.96％、为至少99.98％或为至少99.99％，其中同一性百分比表示在一种菌株的基因组中发现并存在于另一种菌株的基因组中的序列的百分比；同一性是按照将两种基因组序列在它们的全长范围内相比较(全局比对)的方式作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的解淀粉芽孢杆菌菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No:16748；保藏时间为：2018年11月15日。

【技术特征摘要】
1.分离的解淀粉芽孢杆菌菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:16748；保藏时间为：2018年11月15日。2.组合物，其含有权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌菌株的培养物。3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物为液体、冷冻或干燥粉末形式。4.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物中包含助剂；优选的，所述助剂包括十二烷基苯磺酸钠、丁基萘磺酸钠、海藻糖、甘油、木质素磺酸钠、烷基萘磺酸钠缩聚物、烟酸、醇、缓冲盐、氯化钠、氨基酸、维生素类、蛋白质、多肽、多糖或单糖、酵母膏、白炭黑、茶皂素、脱脂奶中的一种或多种；当所述组合物为冷冻或干燥粉末形式时，其还包括固态载体；优选的，所述固态载体包括泥炭、草皮、滑石、褐煤、叶蜡石、蒙脱土、藻酸盐、压滤泥浆、锯屑、珍珠岩、云母、硅石、石英粉、钙基膨润土、蛭石、高岭土、轻质碳酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘海明，杜蓉蓉，
申请(专利权)人：北京航天恒丰科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11