OCT4抗原表位肽、抗原偶联物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种OCT4抗原表位肽、抗原偶联物及其制备方法和应用。该OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示或如SEQ ID No.2所示。上述OCT4抗原表位肽对肿瘤细胞具有较好的抑制作用。

OCT4 antigen epitope peptide, antigen conjugate, preparation method and Application

The invention relates to an OCT4 antigen epitope peptide, an antigen conjugate, a preparation method and application thereof. The amino acid sequence of the OCT4 epitope peptide is shown as SEQ ID No.1 or SEQ ID No.2. These OCT4 epitope peptides have a good inhibitory effect on cancer cells.

【技术实现步骤摘要】
OCT4抗原表位肽、抗原偶联物及其制备方法和应用
本专利技术涉及免疫生物学领域，特别是涉及一种OCT4抗原表位肽、抗原偶联物及其制备方法和应用。
技术介绍
肿瘤疫苗(tumorvaccine)是近年研究的热点之一，其原理将肿瘤抗原以多种形式如：肿瘤细胞、肿瘤相关蛋白或多肽、表达肿瘤抗原的基因等，导入患者体内，克服肿瘤引起的免疫抑制状态，增强免疫原性，激活患者自身的免疫系统，诱导机体细胞免疫和体液免疫应答，从而达到控制或清除肿瘤的目的。日新月异的肿瘤免疫治疗已迅速改变肿瘤患者的预期寿命，引发肿瘤治疗的新变革。然而。近几十年来的研究表明，肿瘤疫苗成功研发并应用的屈指可数，其重要原因在于，这些疫苗对肿瘤细胞的抑制作用较差。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种对肿瘤细胞具有较好抑制作用的OCT4抗原表位肽。此外，还提供一种OCT4抗原表位肽的制备方法和应用、抗原偶联物及其制备方法和应用。一种OCT4抗原表位肽，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；或者，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。研究发现，氨基酸序列如SEQIDNo.1所示或如SEQIDNo.2所示的OCT4抗原表位肽能够有效地抑制睾丸癌细胞的生长，以延长睾丸癌患者的寿命，从而能够应用于制备抑制睾丸癌细胞生长的药物或延长睾丸癌患者的药物中。经试验验证，注射有上述OCT抗原表位肽偶联血蓝蛋白的抗原偶联物的小鼠内的睾丸癌细胞的体积和重量明显低于仅注射血蓝蛋白的小鼠内的睾丸癌细胞的体积和重量，且注射有上述OCT抗原表位肽偶联血蓝蛋白的抗原偶联物的小鼠内的寿命明显长于仅注射血蓝蛋白的小鼠的寿命。一种OCT4抗原表位肽的制备方法，包括如下步骤：通过多肽固相合成法或转基因方法制备得到OCT4抗原表位肽，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；或者，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。一种抗原偶联物，所述抗原偶联物包括抗原部分，所述抗原部分含有上述OCT4抗原表位肽；或者，所述抗原部分含有上述OCT4抗原表位肽的制备方法制备得到的OCT4抗原表位肽。在其中一个实施例中，所述抗原偶联物还包括偶联部分，所述偶联部分与所述抗原部分连接，所述偶联部分选自血蓝蛋白、卵清蛋白及牛血清白蛋白中的至少一种。一种抗原偶联物的制备方法，包括如下步骤：将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、N-羟基琥珀酰亚胺、抗原部分与偶联部分混合并反应，以使所述抗原部分与所述偶联部分连接，得到抗原偶联物；其中，所述抗原部分含有上述OCT4抗原表位肽，或者，所述抗原部分含有上述OCT4抗原表位肽的制备方法制备得到的OCT4抗原表位肽。上述OCT4抗原表位肽在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的应用；或者，上述OCT4抗原表位肽制备方法得到的OCT4抗原表位肽在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的应用；或者，上述抗原偶联物在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的应用；或者，上述抗原偶联物的制备方法得到的抗原偶联物在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的应用。上述OCT4抗原表位肽在制备延长肿瘤患者寿命的药物中的应用；或者，上述OCT4抗原表位肽制备方法得到的OCT4抗原表位肽在制备延长肿瘤患者寿命的药物中的应用；或者，上述抗原偶联物在制备延长肿瘤患者寿命的药物中的应用；或者，上述抗原偶联物的制备方法得到的抗原偶联物在制备延长肿瘤患者寿命的药物中的应用。在其中一个实施例中，所述肿瘤为睾丸肿瘤。一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有上述OCT4抗原表位肽；或者，所述药物组合物含有上述OCT4抗原表位肽的制备方法制备得到的OCT4抗原表位肽；或者，所述药物组合物包括上述抗原偶联物；或者，所述药物组合物包括上述抗原偶联物的制备方法得到的抗原偶联物。在其中一个实施例中，所述药物组合物还包括Toll样受体激动剂。附图说明图1为实施例3中KLH组、OCT4-1组、OCT4-2组及OCT4-3组小鼠的肿瘤体积的对比图；图2为实施例3中KLH组、OCT4-1组、OCT4-2组及OCT4-3组小鼠的肿瘤重量的对比图；图3为实施例3中KLH组、OCT4-1组、OCT4-2组及OCT4-3组小鼠的肿瘤的照片对比图；图4为实施例4中PBS组、TLR9组、OCT4-3组、OCT4-3+TLR9组小鼠的肿瘤体积的对比图；图5为实施例5中PBS组、KLH组、TLR9组、OCT4-1组、OCT4-2组及OCT4-3组的小鼠存活率对比图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳的实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本专利技术一实施方式提供了一种OCT4抗原表位肽，其能够有效地抑制睾丸癌细胞的生长，以延长睾丸癌患者的寿命，从而能够应用于制备抑制睾丸癌细胞生长的药物或延长睾丸癌患者的药物中。进一步地，肿瘤为睾丸肿瘤。具体地，肿瘤为睾丸畸胎瘤。Oct4基因也被称为Oct3、POU5F1、Oct3或Oct4，是POU转录因子家族中的一员。人的Oct4基因位于6号染色体上(6p21.31)，长度为16.40kb，具有多个转录起始位点，转录不同的mRNA亚型，从而翻译成多种蛋白质。研究发现，转录因子OCT4(Octamer-bindingtranscriptionfactor4)在多种肿瘤干细胞的形成和保持肿瘤干细胞特性和功能方面起到重要作用，在肿瘤干细胞中高表达而在正常人体已分化细胞中不表达，是良好潜在的生物治疗靶点。在其中一个实施例中，OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。具体地，如SEQIDNo.1所示的氨基酸序列为：ENRVRGNLENLFLQCPKPTLQQISHIAQQLGLE。在其中一个实施例中，OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。具体地，如SEQIDNo.2所示的氨基酸序列为：EAAGSPFSGGPVSFPLAPGPHFGTPGYGSPHF。研究发现，氨基酸序列如SEQIDNo.1所示或如SEQIDNo.2所示的OCT4抗原表位肽能够有效地抑制睾丸癌细胞的生长，以延长睾丸癌患者的寿命，从而能够应用于制备抑制睾丸癌细胞生长的药物或延长睾丸癌患者的药物中。经试验验证，注射有上述OCT抗原表位肽偶联血蓝蛋白的抗原偶联物的小鼠内的睾丸癌细胞的体积和重量明显低于仅注射血蓝蛋白的小鼠内的睾丸癌细胞的体积和重量，且注射有上述OCT抗原表位肽偶联血蓝蛋白的抗原偶联物的小鼠内的寿命明显长于仅注射血蓝蛋白的小鼠的寿命。上述OCT4抗原表位肽的制备方法，包括如下步骤：通过多肽固相合成法或转基因方法制备得到OCT4抗原表位肽。在其中一个实施例中，多肽固相合成法为Boc固相合成法或Fmoc固相合成法。其中，Boc为叔丁氧羰基。Boc固相合成法中以易酸解的Boc基团作为N-ɑ-保护基团。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种OCT4抗原表位肽，其特征在于，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；或者，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种OCT4抗原表位肽，其特征在于，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；或者，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。2.一种OCT4抗原表位肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：通过多肽固相合成法或转基因方法制备得到OCT4抗原表位肽，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；或者，所述OCT4抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。3.一种抗原偶联物，其特征在于，所述抗原偶联物包括抗原部分，所述抗原部分含有权利要求1所述的OCT4抗原表位肽；或者，所述抗原部分含有权利要求2所述的OCT4抗原表位肽的制备方法制备得到的OCT4抗原表位肽。4.根据权利要求3所述的抗原偶联物，其特征在于，所述抗原偶联物还包括偶联部分，所述偶联部分与所述抗原部分连接，所述偶联部分选自血蓝蛋白、卵清蛋白及牛血清白蛋白中的至少一种。5.一种抗原偶联物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、N-羟基琥珀酰亚胺、抗原部分与偶联部分混合并反应，以使所述抗原部分与所述偶联部分连接，得到抗原偶联物；其中，所述抗原部分含有权利要求1所述的OCT4抗原表位肽，或者，所述抗原部分含有权利要求2所述的OCT4抗原表位肽的制备方法制备得到的OCT4抗原表位肽。6.权利要求1所述的O...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓梅，林桂淼，陈婷婷，刘侃，吴承宁，丹尼斯·安东尼·卡尔森，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东,44