疫苗制剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及疫苗领域，公开了一种疫苗制剂及其应用。本发明专利技术提供的疫苗制剂通过将成瘾药物半抗原和佐剂以共价连接或者混合自组装的方式进行组合得到，结构简单、免疫性能好(引发高滴度的IgG抗体)，且热稳定性好，易于保存和运输。

Vaccine preparation and its application

The invention relates to the field of vaccines, and discloses a vaccine preparation and its application. The vaccine preparation provided by the invention is obtained by combining the hapten of addictive drug and adjuvant by covalent connection or mixed self-assembly. The vaccine preparation has simple structure, good immune performance (initiating high titer IgG antibody), good thermal stability, and is easy to preserve and transport.

【技术实现步骤摘要】
疫苗制剂及其应用
本专利技术涉及疫苗领域，具体涉及一种疫苗制剂及其应用。
技术介绍
成瘾药物的滥用严重影响身体健康，同时造成社会财富的巨大损失和浪费。目前，治疗通常采用心理治疗并结合药物的方式，然而这种治疗方法的效果并不令人满意，寻找更有效的方法仍然是现代医学面临的挑战。疫苗可能是一种独特的、具有潜在吸引力的治疗方法，刺激免疫系统并产生相应的特异性抗体。通常由于成瘾物质的分子量太小，不足以刺激免疫系统产生抗体，因此有必要将它们与载体蛋白质连接。半抗原-蛋白复合物(hapten-protein)的半合成疫苗是目前产生IgG抗体最常见的方法。将半抗原与含有T细胞表位的蛋白共价连接，可以使半抗原被免疫系统识别，从而产生高亲和力的IgG抗体。疫苗产生的抗体可以与抗原结合为抗体-抗原复合物，该复合物分子量大而不能通过血脑屏障，减少大脑对毒品的依赖性从而达到控制毒瘾的目的。其中，蛋白载体包括匙孔血蓝蛋白(KLH)，牛血清白蛋白(BSA)，鸡卵白蛋白(OVA)，白喉CRM197蛋白等。半合成疫苗存在着一些缺点，比如偶联位点不确定、偶联率不稳定以及蛋白本身也会引起一定的免疫反应等。另外，半抗原-蛋白复合物的热稳定性差，带来保存和运输的额外负担。全合成的疫苗分子的研究近年来受到广泛关注。经典的全合成疫苗分子由半抗原，辅助T细胞表位(Thepitope)肽和Toll样受体(Tolllikereceptor,TLR)激动剂等三组分共价偶联组成。据报道，将几种不同Th表位构建在同一疫苗分子中，可以提高疫苗分子的免疫性能。另外，主要组织相容性复合体(majorhistocompatibilitycomplex，MHC)具有多形性，不同的个体需要不同的Th表位肽和MHC结合，所以普适的疫苗分子需要引入多个Th表位肽。随着组分的增加，有机合成的难度也增加，对于工业化生产造成巨大挑战。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的成瘾药物疫苗通过半抗原-蛋白复合物的半合成疫苗产生IgG抗体，导致偶联位点不确定、偶联率不稳定，且蛋白本身也会引起一定的免疫反应，以及半抗原-蛋白复合物的热稳定性差的问题，提供一种疫苗制剂，其结构简单、免疫性能好(引发高滴度的IgG抗体)，且热稳定性好，易于保存和运输。为了实现上述目的，本专利技术一方面提供了一种疫苗制剂，所述制剂包括：组分(a)：半抗原，该半抗原为成瘾药物；组分(b)：连接单元，该连接单元的一端与所述组分(a)共价连接以形成组分a-b；组分(c)：佐剂，该佐剂选自式(1)-式(4)所示的化合物中的至少一种；其中，所述组分(c)与所述组分a-b中的组分(b)的另一端共价连接，以形成a-b-c所示的有效成分；或者所述制剂中还包括组分(d)：载体，该载体与所述组分(b)的另一端共价连接以形成组分a-b-d，并且所述组分a-b-d与所述组分(c)混合自组装为a-b-d/c所示的有效成分；在式(1)-(4)中的各个X各自独立地选自-CH3、-NH2、-OH或-SH，各个Y各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-；R选自中的一种；并且，所述连接单元选自式(5)-式(16)所示的结构单元：在式(5)-式(16)中，m1-m5、n1-n7、p1、p2和q1各自独立地为1-60中的任意一个整数，X1-X7、Y1-Y9各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-；以及，所述载体选自式(17)-式(20)所示的基团，在式(17)-式(20)中，各个m各自独立地为0-30中的任意一个整数，各个n各自独立地为0-6中的任意一个整数，各个X8各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-。本专利技术第二方面提供了一种上述疫苗制剂在制备治疗抗成瘾相关药物中的应用。通过上述技术方案，本专利技术提供的疫苗制剂能够在简化疫苗分子结构的同时保证产生高滴度、高亲和力的IgG抗体；该疫苗分子热稳定性好，更易保存和运输。附图说明图1是疫苗制剂A-E、F1-F3产生的抗尼古丁滴度评价结果，其中a)是IgG抗体滴度评价结果，b)是IgM抗体滴度评价结果，c)是IgG1抗体滴度评价结果，d)是IgG3抗体滴度评价结果，e)是IgG2a抗体滴度评价结果，f)是IgG2b抗体滴度评价结果；图2是实施例7-11中得到的疫苗制剂产生的抗尼古丁滴度评价结果，其中a)是IgG抗体滴度评价结果，b)是IgM抗体滴度评价结果，c)是疫苗制剂在42d后产生的IgG1抗体、IgG3抗体、IgG2a抗体、IgG2b抗体滴度评价结果；图3是疫苗制剂A-E、F1-F3产生的抗体亲和力测定结果；图4是实施例7-11中得到的疫苗制剂产生的抗体亲和力测定结果；图5是疫苗制剂A-E、F1-F3的体内细胞因子测定结果，其中，左图是干扰素-γ(24h)测定结果，右图是白介素-4(2h)测定结果；图6是疫苗制剂A-E、F1-F3的热板测试结果；图7是实施例7-11中得到的疫苗制剂的热板测试结果；图8是注射疫苗制剂A-E、F1-F3后小鼠体温的测试结果；图9是注射实施例7-11中得到的疫苗制剂后小鼠体温的测试结果；图10是注射疫苗制剂A-E、F1-F3后小鼠的体重变化测定结果；图11是注射实施例7-11中得到的疫苗制剂后小鼠的体重变化测定结果。具体实施方式在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。本专利技术第一方面提供了一种疫苗制剂，所述制剂包括：组分(a)：半抗原，该半抗原为成瘾药物；组分(b)：连接单元，该连接单元的一端与所述组分(a)共价连接以形成组分a-b；组分(c)：佐剂，该佐剂选自式(1)-式(4)所示的化合物中的至少一种；其中，所述组分(c)与所述组分a-b中的组分(b)的另一端共价连接，以形成a-b-c所示的有效成分；或者所述制剂中还包括组分(d)：载体，该载体与所述组分(b)的另一端共价连接以形成组分a-b-d，并且所述组分a-b-d与所述组分(c)混合自组装为a-b-d/c所示的有效成分；在式(1)-(4)中的各个X各自独立地选自-CH3、-NH2、-OH或-SH，各个Y各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-；R选自中的一种；并且，所述连接单元选自式(5)-式(16)所示的结构单元：在式(5)-式(16)中，m1-m5、n1-n7、p1、p2和q1各自独立地为1-60中的任意一个整数，X1-X7、Y1-Y9各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-；以及，所述载体选自式(17)-式(20)所示的基团，在式(17)-式(20)中，各个m各自独立地为0-30中的任意一个整数，各个各自n独立地为0-6中的任意一个整数，各个X8各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-。在本专利技术中，所述有效成分包括两种组成方式：1)所述组分(c)与所述组分a-b中的组分(b)的另一端共价连接，以形成a-b-c所示的有效成分；2)所述组分(d)与所述组分a-b中的组分(b)的另一端共价连接以形成组分a-b-d本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种疫苗制剂，其特征在于，所述制剂包括：组分(a)：半抗原，该半抗原为成瘾药物；组分(b)：连接单元，该连接单元的一端与所述组分(a)共价连接以形成组分a‑b；组分(c)：佐剂，该佐剂选自式(1)‑式(4)所示的化合物中的至少一种；其中，所述组分(c)与所述组分a‑b中的组分(b)的另一端共价连接，以形成a‑b‑c所示的有效成分；或者所述制剂中还包括组分(d)：载体，该载体与所述组分(b)的另一端共价连接以形成组分a‑b‑d，并且所述组分a‑b‑d与所述组分(c)混合自组装为a‑b‑d/c所示的有效成分；

【技术特征摘要】
1.一种疫苗制剂，其特征在于，所述制剂包括：组分(a)：半抗原，该半抗原为成瘾药物；组分(b)：连接单元，该连接单元的一端与所述组分(a)共价连接以形成组分a-b；组分(c)：佐剂，该佐剂选自式(1)-式(4)所示的化合物中的至少一种；其中，所述组分(c)与所述组分a-b中的组分(b)的另一端共价连接，以形成a-b-c所示的有效成分；或者所述制剂中还包括组分(d)：载体，该载体与所述组分(b)的另一端共价连接以形成组分a-b-d，并且所述组分a-b-d与所述组分(c)混合自组装为a-b-d/c所示的有效成分；在式(1)-(4)中的各个X各自独立地选自-CH3、-NH2、-OH或-SH，各个Y各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-；R选自中的一种；并且，所述连接单元选自式(5)-式(16)所示的结构单元：在式(5)-式(16)中，m1-m5、n1-n7、p1、p2和q1各自独立地为1-60中的任意一个整数，X1-X7、Y1-Y9各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-；以及，所述载体选自式(17)-式(20)所示的基团，在式(17)-式(20)中，各个m各自独立地为0-30中的任意一个整数，各个n各自独立地为0-6中的任意一个整数，各个X8各自独立地选自-CH2-、-NH-、-O-或-S-。2.根据权利要求1所述的疫苗制剂，其中，所述成瘾药物选自尼古丁、甲基苯丙胺、海洛因、可卡因、芬太尼、鸦片、氯胺酮和咖啡因中的至少一种。3.根据权利要求2所述的疫苗制剂，其中，所述尼古丁的结构式选自中的至少一种；所述甲基苯丙胺的结构式选自中的至少一种；所述海洛因的结构式选自中的至少一种；所述可卡因的结构式为所述芬太尼的结构式为所述鸦片的结构式选自中的至少一种；所述氯胺酮的结构式为所述咖啡因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭军，刘政，陈祥钊，
申请(专利权)人：华中师范大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42