一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法。所述分离纯化方法是以粉碎后的高良姜茎叶为原料，以溶剂提取法或酶法进行功能性成分的提取，利用柱层析法进行功能性成分的分离纯化，最终得到高良姜茎叶提取物。所得到的高良姜茎叶提取物纯度高，具有很好的降血糖效果，对α‑淀粉酶的抑制率可达90.11%，可用于制备降血糖药物或保健品。该方法制备工艺简便，工艺参数容易控制，有效利用了被忽视浪费的高良姜茎叶，生产原料来源广泛，有效填补了高良姜茎叶开发利用的空白，具有很高的社会价值和经济价值。

Separation and Purification of Extract from Alpinia officinalis Stem and Leaf

【技术实现步骤摘要】
一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法
本专利技术涉及植物活性成分提取
，具体地，涉及一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法。
技术介绍
高良姜(AlpiniaofficinarumHance)为山姜属植物，别名风姜、小良姜、膏凉姜，是一种热带多年生草本。高良姜主产于广东、广西、云南、海南、台湾等地区，是一种食药兼用的植物资源，具有温胃止吐、散寒止痛、抗腹泻等功效。现代药理学研究表明，高良姜具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、降血糖、降脂等药理作用。目前高良姜根部的食用药用价值被高度关注，而针对高良姜地上部分的研究非常少，在采集时茎叶直接被丢弃，造成资源的浪费。经实践证明，高良姜茎叶具有非常好的抗氧化、降血糖等生物活性，提取物中含有丰富的黄酮、多糖等活性物质，其中黄酮类化合物的主要成分是高良姜素，具有很高的研究价值和开发利用前景。但是由于目前高良姜茎叶这一原料被忽视，其中的功能性成分没有被提取出来并加以利用，使得在高良姜茎叶活性物质的的加工提取技术方面有所不足。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有高良姜茎叶活性物质的加工提取技术方面的不足，提供一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法，通过该方法能得到高纯度、具有很好降血糖效果的高良姜茎叶提取物。本专利技术的另一目的在于提供由上述分离纯化方法制备得到的高良姜茎叶提取物在制备降血糖药物或保健品中的应用。为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：一种高良姜茎叶提取物的分离纯化的方法，包括以下步骤：S1.选择新鲜、无病虫害的高良姜茎叶为原料，挑选除杂后干燥至含水量为10％以下，粉碎备用；S2.取步骤S1所得高良姜茎叶粉末为原料，采用溶剂提取法或酶法进行提取，得粗提液；S3.将步骤S2所得粗提液浓缩后离心，取上清液，对上清液中的功能性成分进行分离纯化，得到纯化后的高良姜茎叶提取物。优选地，所述高良姜茎叶可以是不同品种或不同生长年份的；品种可以是鸡姜、牛姜、或其他品种，也可以是混合的高良姜品种，生长年份可以是1～5年中的一种、两种或两种以上的混合；以生长年份为2年或3年的高良姜茎叶较好。作为一种可选择的实施方式，步骤S1中所述干燥的方法为热风干燥法，干燥条件为温度35～85℃。优选地，所述干燥条件为温度50℃。作为第二种可选择的实施方式，步骤S1中所述干燥的方法为热泵干燥法，干燥条件为温度35～75℃，湿度10％～40％。优选地，干燥条件为温度50℃，湿度20％。作为第三种可选择的实施方式，步骤S1中所述干燥的方法为真空冷冻干燥法，处理条件为预冻温度-60～-80℃，预冻10～12h，真空度为15～45Pa，冷肼温度为-52～-50℃。优选地，处理条件为预冻温-80℃，预冻10h，真空度为30Pa，冷肼温度为-50℃。本专利技术可采用溶剂提取法对高良姜茎叶功能性成分进行提取，只需要较少的溶剂，提取效率高，通过探究溶剂提取法的处理条件对高良姜茎叶功能性成分提取量的影响，得到最佳工艺条件。优选地，步骤S2中所述溶剂提取法所使用的溶剂为乙醇、水、碱性水、碱性稀醇、甲醇、乙酸乙酯中的至少一种。优选地，步骤S2中所述溶剂提取法的处理条件为：按料液比1g:40～60mL加入水或体积分数为30～80％的乙醇溶液或体积分数为20～70％的甲醇溶液，混合均匀，提取温度为30～60℃，提取时间为0.5～3h。更优选地，步骤S2中所述溶剂提取法的处理条件为：按料液比1g:56mL加入体积分数为42％的乙醇，混合均匀，提取温度为40℃，提取时间为1.8h。本专利技术还可采用酶法对高良姜茎叶功能性成分进行提取，通过选用适当的酶，可通过酶反应较温和地将植物组织分解，加速有效成分的释放提取，来提高有效成分的收率；同时，选用相应的酶可将影响液体制剂的杂质如果胶、淀粉、蛋白质等分解去除，也可促进某些极性低的脂溶性成分转化为糖苷类易溶于水的成分而有利于提取。优选地，步骤S2中所述酶法的处理条件为：按料液比1:(15～20)加入质量浓度为0.8～1％的酶液，调节pH至5.5～6.5，于30～40℃条件下酶解1～4h。优选地，步骤S2中所述酶液为纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶中的至少一种。作为一种可选择的实施方式，步骤S2中所述酶法的处理条件为：按料液比1:15加入质量浓度为0.9％的纤维素酶，调节pH至5.5，于30℃条件下酶解2h。作为第二种可选择的实施方式，步骤S2中所述酶法的处理条件为：按料液比1:20加入质量浓度为0.8％的果胶酶，调节pH至6.0，于35℃条件下酶解1h。作为第三种可选择的实施方式，步骤S2中所述酶法的处理条件为：按料液比1:18加入质量浓度为1％的半纤维素酶，调节pH至6.5，于40℃条件下酶解1.5h。本专利技术采用柱层析法对步骤S2所得粗提液进行进一步的分离纯化，柱层析法具有理化性质稳定，选择吸附性强，解吸条件温和。易于再生，使用寿命长等优点。但是由于柱层析法中的树脂种类繁多，层析分离的机理各不相同，因此需要针对分离对象选择最合适的树脂，才能达到有效分离的目的。本专利技术人针对高良姜茎叶提取物，选择了对其具有一定吸附选择性、吸附过程易于进行、吸附容量大且易于解吸的树脂，并摸索得到了最优的柱层析法的处理条件，使得最终制备得到的高良姜茎叶提取物的纯度高，无明显杂质。优选地，所述柱层析法采用大孔树脂、聚酰胺树脂、离子交换树脂中的至少一类。更优选地，所述大孔树脂为AB-8、XDA-6、XAD-2、HPD-600、D101、LSA-12、LX-213、S-8中的至少一种；所述聚酰胺树脂为30～100目的聚酰胺树脂；所述柱层析法使用的洗脱液为甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的至少一种。优选地，所述柱层析法包括以下步骤：将树脂按径高比1:(9～15)的比例湿法上柱，上样流速为1～4BV/h，上样浓度为2～6mg/mL；采用质量分数为40～75％的乙醇溶液或35～50％的甲醇溶液或20～60％的乙酸乙酯溶液进行洗脱，洗脱流速为1～6mL/min，收集洗脱液，即得纯化后的高良姜茎叶提取物。更优选地，所述柱层析法包括以下步骤：采用AB-8树脂，按径高比1:15的比例湿法上柱，上样流速为1.5BV/h，上样浓度为3mg/mL；采用质量分数为55％的乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为2.5mL/min。由上述分离纯化方法制备得到的高良姜茎叶提取物具有很强的降血糖活性，未经纯化的粗提液对α-淀粉酶活性的抑制率为51.93％，纯化后的功能性成分溶液对α-淀粉酶活性的抑制率可达90.11％。因此，由上述分离纯化方法制备得到的高良姜茎叶提取物在制备降血糖药物或保健品中的应用亦在本专利技术保护范围之内。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：(1)通过本专利技术方法制备得到的高良姜茎叶提取物得率高，纯度高，具有很好的降血糖效果，对α-淀粉酶的抑制率可达90.11％，可用于制备降血糖药物或保健品。(2)本专利技术提供的方法制备工艺简便，工艺参数容易控制，有效利用了被忽视浪费的高良姜茎叶，生产原料来源广泛，有效填补了高良姜茎叶开发利用的空白，具有很高的社会价值和经济价值。附图说明图1为料液比对高良姜茎叶功能性成分提取量的影响。图2为乙醇体积分数对高良姜茎叶功能性成分提取量的影响。图3为提取时间对高良姜茎叶功能性成分提取量的影响。图4为提取温度对高良姜茎本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.选择新鲜、无病虫害的高良姜茎叶为原料，挑选除杂后干燥至含水量为10%以下，粉碎备用；S2.取步骤S1所得高良姜茎叶粉末为原料，采用溶剂提取法或酶法进行提取，得粗提液；S3.将步骤S2所得粗提液浓缩后离心，取上清液，对上清液中的功能性成分进行分离纯化，得到纯化后的高良姜茎叶提取物。

【技术特征摘要】
1.一种高良姜茎叶提取物的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.选择新鲜、无病虫害的高良姜茎叶为原料，挑选除杂后干燥至含水量为10%以下，粉碎备用；S2.取步骤S1所得高良姜茎叶粉末为原料，采用溶剂提取法或酶法进行提取，得粗提液；S3.将步骤S2所得粗提液浓缩后离心，取上清液，对上清液中的功能性成分进行分离纯化，得到纯化后的高良姜茎叶提取物。2.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤S1中所述干燥的方法为热风干燥法，干燥条件为温度35～85℃；或者采用热泵干燥法，干燥条件为温度35～75℃，湿度10%～40%；或者采用真空冷冻干燥法，处理条件为预冻温度-60～-80℃，预冻10～12h，真空度为15～45Pa，冷肼温度为-52～-50℃。3.根据权利要求1所述分离纯化方法，其特征在于，步骤S2中所述溶剂提取法所使用的溶剂为乙醇、水、碱性水、碱性稀醇、甲醇、乙酸乙酯中的至少一种。4.根据权利要求3所述分离纯化方法，其特征在于，步骤S2中所述溶剂提取法的处理条件为：按料液比1g:40～60mL加入水或体积分数为30～80%的乙醇溶液或体积分数为20～70%的甲醇溶液，混合均匀，提取温度为30～60℃，提取时间为0.5～3h。5.根据权利要求1所述分离纯化方...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴雪辉，章文，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东,44