一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法及应用技术

本发明专利技术属于中药注射液检测技术领域，尤其涉及一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法和应用，该检测方法为：用盐酸乙醇混合溶液对所述中药注射液进行稀释，用气相色谱法检测所述中药注射液中的乙酸、丙酸和丁酸，所述检测方法为内标法。该检测方法能够快速、准确地同时检测中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的含量，专属性强、重现性好，能够弥补现有标准和其他定量方法的不足。通过该检测方法，能够快速、准确地同时进行疏血通注射液中该三种成分的含量测定，对于提高疏血通注射液的质量标准具有重要意义。

A method for determination of acetic acid, propionic acid and butyric acid in traditional Chinese medicine injection and its application

The invention belongs to the technical field of detection of traditional Chinese medicine injection, in particular to a detection method and application of acetic acid, propionic acid and butyric acid in traditional Chinese medicine injection. The detection method is: diluting the traditional Chinese medicine injection with ethanol hydrochloride mixed solution, and detecting acetic acid, propionic acid and butyric acid in the traditional Chinese medicine injection by gas chromatography. The detection method is an internal standard method. This method can detect the content of acetic acid, propionic acid and butyric acid in traditional Chinese medicine injection simultaneously quickly and accurately. It has strong specificity and good reproducibility, and can make up for the shortcomings of existing standards and other quantitative methods. Through this method, the contents of the three components in Shuxuetong Injection can be determined quickly and accurately simultaneously, which is of great significance for improving the quality standard of Shuxuetong Injection.

【技术实现步骤摘要】
一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法及应用
本专利技术属于中药注射液检测
，尤其涉及一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法及应用。
技术介绍
疏血通注射液具有活血化瘀、通经活络的功效，常用于淤血阻络所导致的缺血性中风病中经络急性期，症见半身不随，口舌歪斜，语言蹇涩。疏血通注射液原料药为水蛭与地龙，《中华人民共和国药典》2015年版一部规定：水蛭药材“含量测定”项下，以抗凝血酶活性评价水蛭药材的质量；地龙药材目前尚无明确的质量评价指标。本研究发现水蛭和地龙中均含有乙酸、丙酸和丁酸，而此三种成分具有抗炎、降低胆固醇、提高免疫力、改善肠道功能的生物活性。但目前尚无检测中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸含量的分析方法。因此，建立中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的含量分析方法对于完善中药注射液中有效成分的质量控制、更全面地控制和反映中药的内在质量具有重要意义，对于类似于疏血通注射液的中药注射液，则能够通过更好地控制其内在质量来保证疏血通注射液临床用药的安全性和有效性。
技术实现思路
针对现有技术尚无检测中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸含量的问题，本专利技术提供了一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法。以及，本专利技术还提供了上述方法在分析疏血通注射液中乙酸、丙酸和丁酸含量中的应用。为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如下的技术方案：一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法，用盐酸乙醇混合溶液对所述中药注射液进行稀释，用气相色谱法检测所述中药注射液中的乙酸、丙酸和丁酸，所述检测方法为内标法；所述气相色谱法的色谱条件为：色谱柱：弹性石英毛细管柱；升温程序：初始温度45～55℃保持0.8～1.2min，以14～16℃/min的升温速度升至115～125℃后保持5～7min，以6～8℃/min的升温速度升至130～140℃保持0.8～1.2min，以95～105℃/min的升温速度升至220～240℃后保持6～8min；进样口温度：230～250℃；检测器温度：230～250℃；进样体积：2.5～3.5μL；分流比：9～11∶1；载气：氮气，所述氮气纯度＞99.999％，流速0.8～1.2mL/min；尾吹气：氮气，流速23～28mL/min，纯度＞99.999％；氢气流速25～35mL/min，空气流速350～450mL/min。相对于现有技术而言，本专利技术通过盐酸乙醇混合溶液的稀释，将乙酸、丙酸和丁酸溶解于稀释液中，配合气相色谱法，能够快速、准确地同时检测中药注射液中的乙酸、丙酸和丁酸的含量，专属性强、重现性好，能够弥补现有标准和其他定量方法的不足。本专利技术优选的色谱条件使该气相检测方法具有较高的灵敏度、准确性和重现性。中药注射液中成分复杂，弹性石英毛细管柱对于成分复杂的混合物具有良好的分离效果，能够将待测成分与其他成分完全分离。乙酸、丙酸和丁酸以及其他各成分的沸点不同，优选的升温程序使不同沸点的成分在色谱柱中都有适宜的保留，并使色谱峰分布均匀、峰形对称、分离改进、峰形变窄、检测限下降、检测时间缩短。优选地，所述升温程序为：初始温度50℃保持1min，以15℃/min的升温速度升至120℃后保持6min，以7℃/min的升温速度升至135℃保持1min，以100℃/min的升温速度升至230℃后保持7min。优选地，所述进样口温度为240℃；所述检测器温度为240℃；所述进样体积为3μL；所述分流比为10∶1；所述载气的流速为1.0mL/min；所述尾吹气的氮气流速为25mL/min，氢气流速为30mL/min，空气流速为400mL/min。优选地，在所述盐酸乙醇混合溶液中，所述盐酸为12N的盐酸，所述乙醇为无水乙醇，所述盐酸在所述乙醇溶液中的体积百分浓度为1.0～1.5vol％。优选地，所述内标法采用的内标化合物为2-乙基丁酸。该内标化合物的分子结构、保留值与检测响应与三种待测化合物接近，并且在中药注射液中不存在、不与待测的化合物发生化学反应、与待测的三种化合物能够良好分离，不会对检测结果造成干扰。优选地，所述检测方法包括如下步骤：步骤a、配制含有乙酸、丙酸、丁酸和内标化合物的对照品溶液；步骤b、用所述色谱条件对所述对照品溶液进行气相色谱检测，根据所得对照品峰面积与内标化合物峰面积的比值绘制乙酸、丙酸和丁酸的对照品标准曲线，得出乙酸、丙酸和丁酸的浓度-对照品峰面积与内标化合物峰面积比值的线性回归方程；步骤c、配制待测样品溶液，用所述色谱条件对所述待测样品溶液进行检测，将得到的所述待测样品中的化合物峰面积与内标化合物峰面积比值代入所述线性回归方程，计算所述待测样品溶液中乙酸、丙酸和丁酸的含量。优选地，步骤a中所述对照品溶液至少为5份，其中所述乙酸的浓度范围为8.31～1063.3μg/mL，所述丙酸的浓度范围为1.88～240.0μg/mL，所述丁酸的浓度范围为1.17～150.0μg/mL，所述内标化合物的浓度范围为20～30μg/mL，配制对照品溶液的溶剂为含有盐酸的乙醇溶液，所述盐酸为12N的盐酸，所述盐酸在所述乙醇溶液中的体积百分浓度为1.0～1.5vol％，所述乙醇溶液中乙醇的体积百分浓度为75vol％。以及，本专利技术实施例还提供了上述方法在分析疏血通注射液中乙酸、丙酸和丁酸含量中的应用。疏血通注射液的主要成分水蛭和地龙中均含有乙酸、丙酸和丁酸，通过上述方法，能够快速、准确地同时进行该三种成分的含量测定，对于提高疏血通注射液的质量标准具有重要意义。附图说明图1为空白溶剂色谱图；图2为疏血通样品溶液色谱图；图3为对照品溶液色谱图。附图说明：1：乙酸；2：丙酸；3：丁酸；4：2-乙基丁酸。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1本专利技术实施例提供了一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法，具体如下：气相色谱仪为美国Agilent公司的GC-7890B气相色谱仪，弹性石英毛细管柱为美国Agilent公司的DB-FFAP毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，盐酸为12N的盐酸。1)色谱条件：色谱柱：DB-FFAP弹性石英毛细管柱；升温程序：初始温度50℃保持1min，以15℃/min升至120℃后保持6min，以7℃/min升至135℃保持1min，以100℃/min升至230℃后保持7min；进样口温度：240℃；检测器(FID)温度：240℃；进样体积：3μL；分流比10:1；载气：高纯氮气，纯度＞99.999％，流速1.0mL/min；尾吹气：高纯氮气，纯度＞99.999％，流速25mL/min；氢气流速30mL/min，空气流速400mL/min。2)对照品溶液的制备方法：取乙酸、丙酸和丁酸对照品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加75vol％乙醇溶液定容，得到对照品储备液，浓度分别为乙酸10.63mg/mL、丙酸3.192mg/mL、丁酸1.739mg/mL；取2-乙基丁酸对照品适量，精密称定，置于100mL容量瓶中，以75vol％乙醇定容，得浓度为628.7μg/mL的内标储备液。取各对照品储备液及内标储备液适量，置于10mL容量瓶中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法，其特征在于，用盐酸乙醇混合溶液对所述中药注射液进行稀释，用气相色谱法检测所述中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸，所述检测方法为内标法；所述气相色谱法的色谱条件为：色谱柱：弹性石英毛细管柱；升温程序：初始温度45～55℃保持0.8～1.2min，以14～16℃/min的升温速度升至115～125℃后保持5～7min，以6～8℃/min的升温速度升至130～140℃保持0.8～1.2min，以95～105℃/min的升温速度升至220～240℃后保持6～8min；进样口温度：230～250℃；检测器温度：230～250℃；进样体积：2.5～3.5μL；分流比：9～11∶1；载气：氮气，所述氮气纯度＞99.999％，流速0.8～1.2mL/min；尾吹气：氮气，流速23～28mL/min，纯度＞99.999％；氢气流速25～35mL/min，空气流速350～450mL/min。

【技术特征摘要】
1.一种中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法，其特征在于，用盐酸乙醇混合溶液对所述中药注射液进行稀释，用气相色谱法检测所述中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸，所述检测方法为内标法；所述气相色谱法的色谱条件为：色谱柱：弹性石英毛细管柱；升温程序：初始温度45～55℃保持0.8～1.2min，以14～16℃/min的升温速度升至115～125℃后保持5～7min，以6～8℃/min的升温速度升至130～140℃保持0.8～1.2min，以95～105℃/min的升温速度升至220～240℃后保持6～8min；进样口温度：230～250℃；检测器温度：230～250℃；进样体积：2.5～3.5μL；分流比：9～11∶1；载气：氮气，所述氮气纯度＞99.999％，流速0.8～1.2mL/min；尾吹气：氮气，流速23～28mL/min，纯度＞99.999％；氢气流速25～35mL/min，空气流速350～450mL/min。2.根据权利要求1所述的中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法，其特征在于，所述升温程序为：初始温度50℃保持1min，以15℃/min的升温速度升至120℃后保持6min，以7℃/min的升温速度升至135℃保持1min，以100℃/min的升温速度升至230℃后保持7min。3.根据权利要求1所述的中药注射液中乙酸、丙酸和丁酸的检测方法，其特征在于，所述进样口温度为240℃；和/或所述检测器温度为240℃；和/或所述进样体积为3μL；和/或所述分流比为10∶1；和/或所述载气的流速为1.0mL/min；和/或所述尾吹气的氮气流速为25mL/min，氢气流速为30mL/min，空气流速为400mL/min。4.根据权利要求1所述的中药注射...

【专利技术属性】
技术研发人员：李灵云，李振国，王跃飞，杜宇生，倪开岭，郝明，王丹丹，何子龙，贾力夫，
申请(专利权)人：天津中医药大学，牡丹江友搏药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：天津,12