中脑星形胶质细胞来源神经营养因子的药用用途制造技术

本发明专利技术公开了中脑星形胶质细胞来源神经营养因子(MANF)的药用用途。该用途可为MANF在制备治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品中的应用。本发明专利技术研究发现MANF在人肺炎患者肺泡灌洗液中的含量增加，MANF在急性肺损伤小鼠和过敏性气道炎症小鼠的肺组织中表达上调，说明MANF在炎症性肺组织中的表达增加。本发明专利技术通过动物实验证明，MANF能缓解急性肺损伤导致的肺水肿，降低急性肺损伤导致的肺组织炎性渗出，降低急性肺损伤导致的肺组织炎症细胞浸润和/或改善急性肺损伤导致的肺泡间隔断裂。MANF可用于治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤。

Medicinal use of neurotrophic factors derived from mesencephalic astrocytes

The present invention discloses the medicinal use of neurotrophic factor (MANF) derived from astrocyte in the midbrain. This application can be used in the preparation of MANF products for the treatment and/or prevention and/or alleviation and/or improvement of acute lung injury. The present study found that the content of MANF in alveolar lavage fluid of patients with pneumonia increased, and the expression of MANF in lung tissue of acute lung injury mice and allergic airway inflammation mice increased, indicating that the expression of MANF in inflammatory lung tissue increased. The invention has been proved by animal experiments that MANF can alleviate pulmonary edema caused by acute lung injury, reduce inflammatory exudation of lung tissue caused by acute lung injury, reduce inflammatory cell infiltration of lung tissue caused by acute lung injury and/or improve alveolar septal rupture caused by acute lung injury. MANF can be used to treat and/or prevent and/or alleviate and/or improve acute lung injury.

【技术实现步骤摘要】
中脑星形胶质细胞来源神经营养因子的药用用途
本专利技术涉及生物医药领域中的中脑星形胶质细胞来源神经营养因子的药用用途。
技术介绍
急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)是过度激活的炎症反应导致的肺泡实质急性弥漫性损伤，是多种炎症介质及效应细胞共同参与的呈现级联放大炎性反应的结果。ALI是临床上常见的呼吸系统急、危重症，发病机制错综复杂，致病因素较多，其病死率一直居高不下。多种肺内外因素，包括感染、创伤、休克等，均可导致ALI。其中，革兰阴性细菌感染是临床上引起ALI最主要的原因。炎性反应是机体应对感染、创伤等各种组织损伤时产生的生理性反应，而过度的、失控的炎性反应可导致ALI的发生。因此，抑制过度的炎症反应是缓解急性肺损伤的关键。中脑星形胶质细胞来源神经营养因子(Mesencephalicastrocyte-derivedneurotrophicFactor,MANF)，在早期又被称为ARMET，是一个可被内质网应激所诱导的，分子量约为20KD的分泌性蛋白。MANF基因是沈玉先等通过微阵列技术从30000个基因中筛选出来的对内质网应激最敏感的基因。该基因最初发现时被认为与肿瘤的发生有关，但后来的研究发现，MANF基因的这种突变属于正常基因的多态性，而非肿瘤所特有。研究发现MANF蛋白广泛存在于哺乳动物组织内，正常情况下组织细胞内MANF含量很低，当细胞遭受应激刺激时，细胞内MANF表达显著升高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的一个技术问题是如何治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了MANF在制备治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品(如药物、疫苗、保健品和/或食品)中的应用。上述应用中，所述MANF可为人MANF。所述人MANF可为重组人MANF。上述应用中，所述重组人MANF可为R1)、R2)或R3)的蛋白质：R1)氨基酸序列是SEQIDNo.2的蛋白质，R2)氨基酸序列是SEQIDNo.2的第3-160位的蛋白质，R3)将R1)或R2)所示的蛋白质经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与R1)或R2)所示的蛋白质具有90％以上的同一性且具有缓解急性肺损伤活性的蛋白质。上述应用中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gapexistencecost，Perresiduegapcost和Lambdaratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。上述应用中，所述90％以上的同一性可为至少91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。上述应用中，SEQIDNo.2由168个氨基酸残基组成，SEQIDNo.2的第3-160位为人MANF片段。上述应用中，所述治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品可含有所述MANF。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了与MANF相关的生物材料在制备治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品(如药物、疫苗、保健品和/或食品)中的应用；所述生物材料可为下述任一种：B1)编码所述MANF的核酸分子，B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒，B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体，B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物，B5)含有B1)所述核酸分子的转基因动物细胞系、含有B2)所述表达盒的转基因动物细胞系或含有B3)所述重组载体的转基因动物细胞系，B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系或含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系。上述应用中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。上述应用中，B2)所述的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达所述MANF的DNA，该DNA不但可包括启动所述MANF基因转录的启动子，还可包括终止所述MANF基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。上述应用中，所述载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。上述应用中，所述微生物可为细菌、酵母、藻或真菌。上述应用中，所述细菌可为大肠杆菌，如BL21(DE3)。上述应用中，B1)所述核酸分子可为B11)或B12)：B11)编码序列为SEQIDNo.1所示的DNA分子。B12)核苷酸序列是SEQIDNo.1第9-482位所示的DNA分子。其中，SEQIDNo.1由509个核苷酸组成，其编码序列是SEQIDNo.1的第3-509位核苷酸，编码SEQIDNo.2所示的蛋白质。上述应用中，所述治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品可含有所述生物材料。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的药物。本专利技术所提供的治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的药物由所述MANF和药用辅料组成。上述药物中，所述药用辅料可为水、乙醇、聚乙二醇、1,3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、氯化钠、葡萄糖或甘油、助溶剂、缓冲剂或pH调节剂。上述药物中，所述药物的剂型可为注射给药剂型、呼吸道给药剂型、粘膜给药剂型、皮肤给药剂型、粘膜给药剂型或腔道给药剂型。上述药物中，所述注射给药剂型可包括静脉注射注射剂、肌内注射注射剂、皮下注射注射剂、皮内注射注射剂或腔内注射注射剂。所述呼吸道给药剂型可包括喷雾剂、气雾剂或粉雾剂等。所述皮肤给药剂型可包括外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂或贴剂等。所述粘膜给药剂型可包括滴眼剂、滴鼻剂、眼用软膏剂、含漱剂、舌下片剂、粘贴片或贴膜剂等。所述腔道给药剂型可包括栓剂、气雾剂、泡腾片、滴剂或滴丸剂等。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的方法。本专利技术所提供的治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的方法，包括给受体动物施用所述MANF或/和所述生物材料，进行治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤。上文中，所述治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤可体现为缓解肺水肿，降低肺组织炎性渗出，降低肺组织炎症细胞浸润和/或改善肺泡间隔断裂。上文中，所述动物可为哺乳动物，如小鼠。上述重组人MANF或与所述重组人MANF相关的生物材料也属于本专利技术的保护范围。本专利技术研究发现MANF在人肺炎患者肺泡灌洗液中的含量增加，MANF在急性肺损伤小鼠和过敏性气道炎症小鼠的肺组织中表达上调，说明MANF在炎症性肺组织中的表达增加。本专利技术通过动物实验证明，MANF能缓解急性肺损伤导致的肺水肿，降低急性肺损伤导致的肺组织炎性渗出，降低急性肺损伤导致的肺组织炎症细胞浸润和/或改善急性肺损伤导致的肺泡间隔断裂。MAN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.MANF在制备治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.MANF在制备治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述MANF为重组人MANF。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述重组人MANF为R1)、R2)或R3)的蛋白质：R1)氨基酸序列是SEQIDNo.2的蛋白质，R2)氨基酸序列是SEQIDNo.2的第3-160位的蛋白质，R3)将R1)或R2)所示的蛋白质经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与R1)或R2)所示的蛋白质具有90％以上的同一性且具有缓解急性肺损伤活性的蛋白质。4.与MANF相关的生物材料在制备治疗和/或预防和/或缓解和/或改善急性肺损伤的产品中的应用；所述生物材料为下述任一种：B1)编码权利要求1-3中任一权利要求中所述的MANF的核酸分子，B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒，B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体，B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物，B5)含有B1)所述核酸分子的转基因动物细胞系、含有B2)所述表达盒的转基因动物细胞系或含有B3)所述重组载体的转基因动物细胞系，B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系或含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：B1)所述核酸分子为B11)或B12)：B11)编码序列为SEQIDNo.1所示的DNA分子，B12)核苷酸序列是SEQIDNo.1第9-482位所示的D...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈玉先，沈启英，韦传胜，耿鹏程，
申请(专利权)人：安徽医科大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34