本发明专利技术涉及医药领域，具体涉及一种中药制剂在制备抗71型肠道病毒药物中的用途。所述九味羌活制剂包括如下重量份的原料药：羌活20‑40份，防风20‑40份，苍术20‑40份，细辛5‑15份，川芎10‑30份，白芷10‑30份，黄芩10‑30份，甘草10‑30份，地黄10‑30份。本发明专利技术所涉及的九味羌活制剂对71型肠道病毒具有明显的抑制作用，具有毒性小、作用强、安全有效等优点，为由71型肠道病毒引起的疾病的预防和治疗开辟了新的途径，具有重要的社会价值、经济价值。
Application of Jiuweiqianghuo preparation in preparation of anti-enterovirus 71 drugs
The invention relates to the field of medicine, in particular to the use of a Chinese medicine preparation in the preparation of anti-71 enterovirus drugs. The Jiuweiqianghuo preparation includes the following raw materials: Qianghuo 20 820, Fangfeng 20 820, Atractylodes Atractylodes 20 820, Asarum 5 820, Chuanxiong 10 820, Baizhi 10 820, Huangqin 10 820, licorice 10 820, Dihuang 10 820. The Jiuweiqianghuo preparation has obvious inhibitory effect on enterovirus 71, has the advantages of low toxicity, strong effect, safety and effectiveness, opens up a new way for the prevention and treatment of diseases caused by enterovirus 71, and has important social and economic value.
【技术实现步骤摘要】
九味羌活制剂在制备抗71型肠道病毒药物中的用途
本专利技术涉及医药领域，具体涉及一种中药制剂在制备抗71型肠道病毒药物中的用途。
技术介绍
1969年，美国在中枢神经系统疾病婴儿的粪便标本中分离出71型肠道病毒。根据国际病毒分类委员会(ICTV)的最新分类，人肠道病毒被分为A、B、C、D和新肠道病毒(未分型)五类)，其中71型肠道病毒(EV71)被归为人肠道病毒A型。EV71病毒主要引起手足口病，还可引起无菌性脑膜炎、脑干脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹等多种神经系统疾病。手足口病和中枢神经系统感染是EV71感染而引起的两大常见临床症状。EV71是手足口病的主要病原。手足口病病传染性强，患者以4～5岁以下小儿多见，大多数患者症状轻微，以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征，大多数为良性过程，多自愈，但可复发，有时伴发无菌性脑膜炎、心肌炎等，目前缺乏有效治疗药物主要对症治疗。EV71累及神经系统主要表现为无菌性脑膜炎、脑炎及瘫痪性疾病，多发生于5岁以下幼儿，1岁以下婴儿发病率最高。临床表现变化多样，病情轻重不一，一般表现为阵挛、呕吐、共济失调、意向性震颤、眼球震颤及情感淡漠等。头颅MRI及脑电图检查有助于明确疾病的严重性。九味羌活制剂是由羌活、防风、苍术、细辛、川芎、白芷、黄芩、甘草、地黄等九味中药制成的制剂，具有疏风解表，散寒除湿的功效，用于外感风寒挟湿所致的感冒，症见恶寒、发热、无汗、头痛、口干、肢体酸痛等。但目前尚未有九味羌活制剂抗71型肠道病毒的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供九味羌活制剂在制药中的新用途。九味羌活制剂在制药中的新用途是：九味羌活制剂在制备抗71型肠道病毒药物中的用途。所述九味羌活制剂包括如下重量份的原料药：羌活20-40份，防风20-40份，苍术20-40份，细辛5-15份，川芎10-30份，白芷10-30份，黄芩10-30份，甘草10-30份，地黄10-30份。优选的，所述九味羌活制剂包括如下重量份的原料药：羌活30份，防风30份，苍术30份，细辛10份，川芎20份，白芷20份，黄芩20份，甘草20份，地黄20份。所述九味羌活制剂的剂型包括丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液剂、喷雾剂。所述九味羌活制剂的剂型优选为喷雾剂。本专利技术所涉及的九味羌活制剂对71型肠道病毒具有明显的抑制作用，具有毒性小、作用强、安全有效等优点，为由71型肠道病毒引起的疾病的预防和治疗开辟了新的途径，具有重要的社会价值、经济价值。为了公众能更好的理解本专利技术的有益效果，下面将通过实施例和体外细胞实验进一步阐明。附图说明图1是九味羌活喷雾剂对细胞产生毒性作用前后的显微照片对比。图2是药物对EV71病毒体外抑制作用显微照片对比。具体实施方式下面将进一步的详细说明本专利技术。需要指出的是，以下说明仅仅是对本专利技术要求保护的技术方案的举例说明，并非对这些技术方案的任何限制。实施例1九味羌活喷雾剂制备受试药物：九味羌活喷雾剂(江西普正制药有限公司，批号：170701)。所述受试药物的具体制备方法由以下步骤组成：羌活300g、防风300g、苍术300g、细辛100g、川芎200g、白芷200g提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集。药渣与黄芩200g、甘草200g、地黄200g加水煎煮二次，每次1小时；合并上述煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度为1.08～1.13，加乙醇使含醇量达50％，静置，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至约900ml，加入上述挥发油和药用辅料，混匀，加水调整总量至1000ml,即得。实施例2九味羌活喷雾剂体外抗病毒实验RD细胞冻存管从液氮罐取出，立即投入37℃～42℃温水中融化，超净工作台内将冻存管中液体移入离心管中，800r/min，5min，弃冻存液，加入5mL浓度10％的1640细胞培养液轻轻将下层沉淀细胞吹打混匀，用移液管转移到培养瓶内，在37℃、5％CO2恒温培养箱中培养。待细胞长成单层后进行传代。将EV71病毒接种于己经长成单层的RD细胞上，加1640维持液5mL置37℃、5％CO2病毒培养箱中培养，并设细胞对照，逐日观察。待细胞出现90％以上的病变时，反复冻融3次，用吸管轻轻吹打，1000r/min，5min，离心，取上清液定量分装于EP管中，封口膜封口，放于-80℃冰箱冻存备用。病毒毒力的测定：将病毒用1640维持液做10倍比系列稀释不同浓度，纵向重复4孔，依次接种于己长成单层的RD细胞的96孔板中，同时设细胞对照。37℃、5％CO2病毒培养箱中培养，倒置显微镜下观察24h，加5mg/ml的MTT10μl，37℃、5％CO2培养箱中4小时，吸弃染液，加DMSO100μl，室温脱色l0min，用酶标仪在490nm波长测定OD值。根据Reed-Muench公式计算病毒液的半数感染浓度TCID50。细胞存活率＝各组OD值/正常细胞OD值×100％细胞病变率＝1－细胞存活率细胞比距＝(高于50％病变率－50％)/(高于50％病变率－低于50％病变率)×100％TCID50＝Antilg(Ig高于50％CPE百分率病毒稀释度+比距×稀释对数间的差)测定结果显示EV71病毒TCID50为10-4.31。实验时用100个TCID50作为病毒液浓度，因此需将病毒原液稀释200倍用于实验。药物对细胞毒性测定：九味羌活喷雾剂用1640维持液按二倍比稀释10个浓度梯度，依次接种于己经长成单层RD细胞的96孔板中，并设3个复孔及细胞对照孔；37℃、5％CO2培养箱中培养，逐日观察细胞病变，连续观察3d，计算药物的最大无毒浓度。细胞出现病变者判为药物毒性，MTT染色，用酶标仪在490nm波长测定OD值，应用Reed-Muench公式计算药物半数中毒浓度(TC50)，并确定最小无毒浓度(TC50)。TC50＝[Antilog(log高于50％CPE百分率病毒稀释度+比距)]×C抗EV71病毒实验：九味羌活喷雾剂从无毒浓度起用1640二倍比系列稀释10个浓度，每孔100μl，接种于已长成单层RD细胞的96孔板中，每孔再加入100μl的EV71病毒液，同时设利巴韦林阳性对照组、病毒对照组及空白细胞对照组，每组3个复孔。5％CO2培养箱中培养，逐日观察细胞病变，待病毒对照出现90％以上的病变时，MTT染色，用酶标仪在490nm波长测定OD值，应用Reed-Muench公式计算药物半数有效浓度(EC50)和治疗指数(TI)。EC50＝[Antilog(log高于50％CPE百分率药物稀释度的值-比距)]×CTI＝半数毒性浓度(TC50)/半数有效浓度(EC50)具体结果如下：病毒感染24小时后病毒组开始出现病变，药物组也开始显现病变，细胞在无毒浓度范围内随着药物浓度的降低，EV71感染细胞表现明显，细胞间变圆、破碎、脱落，24小时病毒对照组90％病变，药物组几个浓度梯度孔被完全保护，细胞生长良好。各组药物的治疗指数如下：九味羌活喷雾剂利巴韦林TI指数44.776.6实施例3实验动物采用SPE级1日龄ICR乳鼠，环境温度控制为23±2℃，相对湿度为75±10％，照明时间12h/d(7:00-19:00)。实验动物随机分为正常组、病毒组、九味羌活喷雾剂低剂量组(病毒+九味羌活喷雾剂，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.九味羌活制剂在制备抗71型肠道病毒药物中的用途。
【技术特征摘要】
1.九味羌活制剂在制备抗71型肠道病毒药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述九味羌活制剂包括如下重量份的原料药：羌活20-40份，防风20-40份，苍术20-40份，细辛5-15份，川芎10-30份，白芷10-30份，黄芩10-30份，甘草10-30份，地黄10-30份。3.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：康兴东，刘厚权，张金良，周朝忠，李小锋，董艳凯，胡吉忠，
申请(专利权)人：江西普正制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江西,36
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