一种植物体内源肽的提取方法技术

本发明专利技术属于植物体肽提取技术领域，特别涉及一种植物体内源肽的提取方法，包括如下步骤：先利用液氮将植物冷冻，然后研磨成粉末，并将粉末置于离心管中；再置于水浴中加热；再加入TCA和丙酮的混合溶液，沉淀后，离心，收集沉淀物；洗涤沉淀物至无色后，将沉淀物复溶于溶解有蛋白酶抑制剂的TFA水溶液中；然后孵育；低温下超声裂解后，离心，得到上清液；再将上清液过超滤管后脱盐处理，真空干燥，得到肽段。本发明专利技术方法操作简便，并且有效的保留植物体内天然长链肽，因此本发明专利技术的提取方法产率高，获得的肽段数目多，且肽段长度长。

A Method for Extracting Endogenous Peptides from Plants

The invention belongs to the field of plant somatic peptide extraction technology, in particular relates to a method for extracting plant endogenous peptide, which includes the following steps: freezing plants by liquid nitrogen, grinding them into powder and putting them in centrifugal tube; heating them in water bath; adding a mixture of TCA and acetone, precipitating, centrifuging and collecting sediments; washing sediments to colorless ones; The precipitates were dissolved in TFA aqueous solution with protease inhibitors, incubated, centrifuged at low temperature after ultrasonic cracking, and then desalinated after ultrafiltration, and then dried in vacuum to obtain the peptide segments. The method has the advantages of simple operation and effective retention of natural long chain peptides in plants. Therefore, the extraction method of the present invention has high yield, a large number of obtained peptide segments and a long length of peptide segments.

【技术实现步骤摘要】
一种植物体内源肽的提取方法
本专利技术属于植物体肽提取
，特别涉及一种植物体内源肽的提取方法。
技术介绍
肽是由天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，通常由2到100个氨基酸组成。肽是通过肽键的不可逆水解从较大的(蛋白质)前体中产生的。与蛋白质相比，肽不仅比蛋白质更易消化吸收，还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能。陆地植物种类繁多，充分利用廉价的植物肽资源开发具有高附加值的肽产品，可产生巨大的经济效益和社会效益。肽组学是近年来发展起来的蛋白质组学的一个分支，主要研究动物的神经肽和蛋白酶的降解，但是肽组学在植物科学中还是一个相对较新的领域，在未来几年它可能有助于阐述多肽组。植物肽是小于10kDa的蛋白质分子，本质上可分为两类：一类是由肽酶在较大前体蛋白上的选择性作用中产生的生物活性肽，另一类是蛋白水解酶在蛋白周转过程中产生的降解肽。鉴于生物系统中多肽的高度多样性及其在关键调控过程中的参与，改进多肽发现的需求已经出现，因此，开发了针对样品制备、质谱分析检测、序列测定和通过比较不同实验装置的肽谱进行鉴别分析的特异本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物体内源肽的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：利用液氮将植物组织冰冻后，研磨成粉末，并将粉末装入离心管中，待用；将装有粉末的离心管置于94.5℃～95.5℃的水浴中加热4min～5min后，待用；再向粉末中加入TCA和丙酮的混合溶液，所述粉末与混合溶液的比例为1g：5mL～7mL；沉淀4.5h～5.5h后，3℃～5℃且9000r/min～11000r/min下离心18min～22min，收集沉淀物，待用；将沉淀物用预冷的丙酮洗涤至无色后，再将沉淀物复溶于溶解有蛋白酶抑制剂的TFA水溶液，且所述TFA水溶液中TFA的体积分数为1％；所述沉淀物与所述TFA水溶液的比例为1g：4mL～6...

【技术特征摘要】
1.一种植物体内源肽的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：利用液氮将植物组织冰冻后，研磨成粉末，并将粉末装入离心管中，待用；将装有粉末的离心管置于94.5℃～95.5℃的水浴中加热4min～5min后，待用；再向粉末中加入TCA和丙酮的混合溶液，所述粉末与混合溶液的比例为1g：5mL～7mL；沉淀4.5h～5.5h后，3℃～5℃且9000r/min～11000r/min下离心18min～22min，收集沉淀物，待用；将沉淀物用预冷的丙酮洗涤至无色后，再将沉淀物复溶于溶解有蛋白酶抑制剂的TFA水溶液，且所述TFA水溶液中TFA的体积分数为1％；所述沉淀物与所述TFA水溶液的比例为1g：4mL～6mL，所述TFA水溶液与蛋白酶抑制剂的比例为1mL：4μL～6μL；然后于3℃～5℃下孵育0.8h～1.2h，得到第一混合溶液，待用；再将第一混合溶液在低温下超声裂解4min～...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴刘记，陈雪艳，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：河南,41