一种大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的构建方法，包括步骤：(1)取大鼠禁食过夜，麻醉后经18G留置针行经口腔气管插管，外套管连接呼吸机，四肢连接心电图机导联；(2)自胸骨左侧纵向切开皮肤，轻挑撕开心包，在肺动脉圆锥根部进针，于左心耳下2～3mm处出针过线；(3)放置自制的橡皮PE段于结扎处心脏表面，在橡皮PE段上打结，心梗组给予持续结扎缺血时间为1～6h；(4)再次开胸暴露结扎点，复灌后15～20秒观察前壁心肌颜色；4‑0外科缝线缝合关胸术后继续辅助通气及布洛芬镇痛，即得。本发明专利技术使用天然橡皮PE段作为模型中压迫LAD的介质，具有快速复灌、可视结扎力度等优点；本发明专利技术发现缺血4hrs后可得可重复率高的再灌注损伤模型。

Establishment of a rat model of delayed myocardial ischemia-reperfusion injury

The invention discloses a method for constructing a rat model of delayed ischemia-reperfusion injury of myocardium, which comprises the following steps: (1) taking rats for overnight fasting, inserting an 18G indwelling needle through oral and tracheal intubation after anesthesia, connecting an external cannula with a ventilator, and connecting limbs with an electrocardiograph lead; (2) cutting the skin longitudinally from the left sternum, slightly picking and tearing the pericardium, inserting the needle at the conical root of pulmonary Arte (3) Place the self-made rubber PE segment on the surface of the ligated heart and tie it on the rubber PE segment. The ischemic time of the myocardial infarction group is 1-6 hours; (4) expose the ligation point again and observe the color of the anterior myocardium 15-20 seconds after reperfusion; and (4) continue to assist ventilation and ibuprofen analgesia after suture closure of the chest. The invention uses the natural rubber PE segment as the medium of compressing LAD in the model, has the advantages of rapid reperfusion, visual ligation strength, etc. The invention discovers that a reperfusion injury model with high repeatability can be obtained after ischemia for 4 hrs.

【技术实现步骤摘要】
一种大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的构建方法
本专利技术涉及动物模型构建
，尤其是一种大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的构建方法。
技术介绍
随着人口老龄化加重，心肌梗塞(myocardialinfarction，MI)的发病率也在逐年升高。急性闭塞导致的持续缺血不仅对心肌造成永久性损伤、心室收缩功能受损，还会导致慢性心力衰竭的发生。随着介入技术到不断发展，尽早开通血管复灌受损心肌是目前主要的治疗方案。而心脏作为持续泵血器官，对于缺血缺氧尤为敏感，即使完成有效复灌，心肌细胞也存在明显的坏死和凋亡，即缺血再灌注损伤(ischemiareperfusioninjury,IRI)。目前条件下，急性心肌梗塞的及时复灌还有待于进一步提高。但对于未能及时复灌或复灌后存在明显的慢血流、持续泵衰竭或休克时，特别是复灌后心肌酶学持续升高的患者，如何有效的降低再灌注损伤呢？近期研究发现针对心梗后24-48小时才行PCI的患者，旨在评估延迟经皮冠脉介入术(percutaneouscoronaryintervention,PCI)开通闭塞血管对患者预后的影响。结果提示接受延迟急诊PCI治疗组的院内死亡率本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取大鼠，经适应期后禁食过夜，术前称重，麻醉至下肢收缩反射消失，大鼠温度维持在37℃，剃去大鼠颈部及胸前区毛发，消毒、铺巾，用弯镊适当拉出舌头暴露气管开口，灯光照射颈部指引18G留置针行经口腔气管插管，外套管连接呼吸机，四肢连接心电图机导联；(2)取步骤(1)所得大鼠仰卧位，自胸骨左侧旁0.5cm处，第3至5肋间纵向切开皮肤，长度为2～3cm，钝性分离皮下组织、肌肉，如果发生出血，棉球压迫止血；弯镊突破胸壁后，将固定器固定并撑开肋间隙，轻拉以打开使其宽度为8～10毫米，同时小心避免损伤肺部，此时部分心脏暴露，仍有肺...

【技术特征摘要】
1.一种大鼠心肌延迟缺血再灌注损伤模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取大鼠，经适应期后禁食过夜，术前称重，麻醉至下肢收缩反射消失，大鼠温度维持在37℃，剃去大鼠颈部及胸前区毛发，消毒、铺巾，用弯镊适当拉出舌头暴露气管开口，灯光照射颈部指引18G留置针行经口腔气管插管，外套管连接呼吸机，四肢连接心电图机导联；(2)取步骤(1)所得大鼠仰卧位，自胸骨左侧旁0.5cm处，第3至5肋间纵向切开皮肤，长度为2～3cm，钝性分离皮下组织、肌肉，如果发生出血，棉球压迫止血；弯镊突破胸壁后，将固定器固定并撑开肋间隙，轻拉以打开使其宽度为8～10毫米，同时小心避免损伤肺部，此时部分心脏暴露，仍有肺叶覆盖，用弯曲镊轻轻挑撕开心包；以6-0带针眼科无损缝线在肺动脉圆锥根部进针，于左心耳下2～3mm处出针过线，针宽2～3mm，深0.5～1mm，轻提缝线见前壁心肌颜色变淡，初步判断有效结扎；放置自制的橡皮PE段于结扎处心脏表面，在橡皮PE段上打结，第一结做外科结，以有效防止缝结松脱；第二结做环可拉松脱，结扎左前降支，前壁心肌呈苍白色及心电图II导联ST段弓背抬高大于0.1mv，提示缺血成功；其中，假手术组仅穿线不结扎，心梗组给予持续结扎缺血时间为1～6h；(3)如复灌前，步骤(2)所得大鼠已苏醒，则重复前麻醉过程，连接呼吸机及心电图机，开胸后沿原手术路径暴露结扎点，确认结节无滑脱后，两端离心拉扯取出橡皮PE段达到复灌；复灌后15～20秒，通过观察大鼠前壁心肌颜色恢复、心电图ST段回落及再灌注心律失常，判断再灌注是否成功；(4...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔同涛，唐咏文，罗碧辉，王涛，陆东风，谭宁，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东,44