基于唾液特异糖蛋白糖链结构的早期乳腺癌相关筛查/评估的产品及应用制造技术

本发明专利技术提出了一种基于唾液特异糖蛋白糖链结构的早期乳腺癌相关筛查/评估的产品及应用，明确了凝集素BS‑I所识别的α‑Gal,α‑GalNAc,Galα‑1,3Gal,Galα‑1,6Glc糖链结构在HV、BB、BC‑I、BC‑II患者唾液中均存在差异，其中：两种半乳糖基化N‑糖链、两种半乳糖基化O‑糖链仅存在于BB组患者唾液中，一种半乳糖基化N‑糖链、七种半乳糖基化O‑糖链仅存在于BC‑I组患者唾液中，三种半乳糖基化N‑糖链仅存在于BC‑II组患者唾液中。从而本发明专利技术基于唾液样本能够无创、准确地实现早期乳腺癌(BB、BC‑I、BC‑II)筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估。

Product and application of saliva-specific glycoprotein glycoconjugated structure-based screening/evaluation for early breast cancer

The present invention presents a saliva-specific glycoprotein sugar chain structure-based screening/evaluation product for early breast cancer and its application. It clarifies the differences in saliva structures of alpha Gal, alpha GalNAc, Gal alpha 1, 3Gal, Gal alpha 1, 6Glc in patients with HV, BB, BC I, BC II, and two galactosylated N, two galactosylated O_II. Sugar chains only existed in saliva of BB group, one galactosylated N_sugar chains, seven galactosylated O_sugar chains only existed in saliva of BC_I group, and three galactosylated N_sugar chains only existed in saliva of BC_II group. Thus, the saliva sample based on the invention can noninvasively and accurately realize the screening, early diagnosis, risk assessment, drug screening and/or curative effect evaluation of early breast cancer (BB, BC_I, BC_II).

【技术实现步骤摘要】
基于唾液特异糖蛋白糖链结构的早期乳腺癌相关筛查/评估的产品及应用
本专利技术涉及一种基于唾液特异糖蛋白的早期乳腺癌标志物的确定及其相关产品、应用。
技术介绍
乳腺癌(BreastCancer，BC)是世界范围内女性发病率最高的一类恶性肿瘤，在中国的发病率呈现明显的上升趋势。目前，、乳腺肿瘤的早期诊断主要依赖于乳腺钼靶X线摄影技术，但此技术需要相应的仪器设备、配套空间、专业操作人员，是一种较为昂贵且复杂的早筛手段，且有大约11％的患者无法被检出，尤其是高乳腺密度的癌症患者。近年来大量研究表明：随着肿瘤的发生发展，患者的肿瘤组织、血清和唾液等体液中发生了糖蛋白糖基化异常改变。专利文献ZL201610315822.8公开了一种基于唾液蛋白鉴别乳腺癌的凝集素芯片和试剂盒及其应用的方案。其中：基于唾液检测时，当凝集素PNA、PHA-E+L、UEA-I、PWM、MAL-I、NPA、BS-I、PTL-II、PHA-E所识别的糖链结构的表达都较健康女性志愿者上调或下调，同时需满足已构建的早期乳腺癌患者诊断模型，进而可以确定唾液样本对应的人群患有早期乳腺癌(BB、BC-I或BC-II)。上述方案在检测样本时所需凝集素较多，且需作组合统计，因此对于早期乳腺癌(BB、BC-I、BC-II)的筛查、诊断以及评估仍不够简便、有效。
技术实现思路
关于早期乳腺癌(BB、BC-I、BC-II)的筛查、诊断以及评估等，专利技术人通过大量实验和分析，确定了以下结论：凝集素BS-I所识别的α-Gal,α-GalNAc,Galα-1,3Gal,Galα-1,6Glc糖链结构在HV、BB、BC-I、BC-II患者唾液中均存在差异。具体如下，2种半乳糖基化N-糖链、2种半乳糖基化O-糖链(m/z3065.073(NeuAc)2(Fuc)2(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2,m/z3539.281(NeuAc)1(Gal)6(GlcNAc)6+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1；m/z734.265(Fuc)2(Gal)1(GalNAc)1,m/z896.318(Fuc)2(Gal)2(GalNAc)1))仅存在于BB组患者唾液中，而未见于HV、BC-I、BC-II组的唾液中；1种半乳糖基化N-糖链、7种半乳糖基化O-糖链(m/z2773.977(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1；m/z868.295(Fuc)1(GlcNAc)1(GalNAc)2,m/z882.243(Acetyl-NeuAc)1(Gal)1(Clucose)1,m/z884.270(NeuAc)2)(GalNAc)1,m/z915.285(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)1(GalNAc)1,m/z942.265(Gal)1(Sulf-GalNAc)1(GlcNAc)1(GalNAc)1,m/z1030.348(Fuc)1(Gal)1(GlcNAc)2(GalNAc)1,m/z1351.418(NeuAc)3(Gal)1(GalNAc)1)仅存在于BC-I组患者唾液中，而未见于HV、BB、BC-II组的唾液中；3种半乳糖基化N-糖链(m/z2101.755(Fuc)2(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z2246.792(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z2392.850(NeuAc)1(Fuc)3(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2)仅存在于BC-II组患者唾液中，而未见于HV、BB、BC-I组的唾液中。根据以上结论，可得出以下应用方案：凝集素BS-I单独作为唾液特异糖蛋白糖链结构识别的试剂，通过识别具体糖链结构可实现早期乳腺癌(良性乳腺肿瘤/囊肿患者(BB)、I期乳腺癌患者(BC-I)、II期乳腺癌患者(BC-II))筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估。特定糖链的识别单元在构建用于基于唾液样本作早期乳腺癌(BB、BC-I、BC-II)筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估的产品方面的用途，所述识别单元识别以下半乳糖基化N-糖链、O-糖链之任一或任意组合(通过判断“有”、“无”即可得出结论)：A、仅存在于BB组患者唾液中，而未见于HV、BC-I、BC-II组唾液中的两种半乳糖基化N-糖链、两种半乳糖基化O-糖链之任一或任意组合：m/z3065.073(NeuAc)2(Fuc)2(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2,m/z3539.281(NeuAc)1(Gal)6(GlcNAc)6+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z734.265(Fuc)2(Gal)1(GalNAc)1,m/z896.318(Fuc)2(Gal)2(GalNAc)1)B、仅存在于BC-I组患者唾液中，而未见于HV、BB、BC-II组唾液中的一种半乳糖基化N-糖链、七种半乳糖基化O-糖链之任一或任意组合：m/z2773.977(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z868.295(Fuc)1(GlcNAc)1(GalNAc)2,m/z882.243(Acetyl-NeuAc)1(Gal)1(Clucose)1,m/z884.270(NeuAc)2)(GalNAc)1,m/z915.285(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)1(GalNAc)1,m/z942.265(Gal)1(Sulf-GalNAc)1(GlcNAc)1(GalNAc)1,m/z1030.348(Fuc)1(Gal)1(GlcNAc)2(GalNAc)1,m/z1351.418(NeuAc)3(Gal)1(GalNAc)1C、仅存在于BC-II组患者唾液中，而未见于HV、BB、BC-I组的唾液中的三种半乳糖基化N-糖链之任一或任意组合：m/z2101.755(Fuc)2(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z2246.792(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z2392.850(NeuAc)1(Fuc)3(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2一种用于早期乳腺癌(BB、BC-I、BC-II)筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估的产品，针对唾液样本，该产品包括：A、凝集素BS-I；B、用于耦联凝集素BS-I的亲和层析固相载体；C、用于从含有α-Gal,α-GalNAc,Galα-1,3Gal,Galα-1,6Glc糖链结构的糖蛋白中分离出N-糖链、O-糖链的试剂和装置；D、用于解析各种N-糖链、O-糖链的m/z信息或化学组成式的装置；E、用于判别所解析的各种N-糖链、O-糖链中是否含有前述半乳糖基化N-糖链、O-糖链之任一或任意组合的标识、模块或处理器。上述用于耦联凝集素BS-I的亲和层析固相载体可以选择Fe3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种凝集素单独作为唾液特异糖蛋白糖链结构识别的试剂以制备相关产品的用途，其特征在于：所述凝集素为BS‑I；所述相关产品为试剂盒、设备、可操作系统和/或它们的组合，产品用途为通过识别具体糖链结构实现早期乳腺癌筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估。

【技术特征摘要】
1.一种凝集素单独作为唾液特异糖蛋白糖链结构识别的试剂以制备相关产品的用途，其特征在于：所述凝集素为BS-I；所述相关产品为试剂盒、设备、可操作系统和/或它们的组合，产品用途为通过识别具体糖链结构实现早期乳腺癌筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估。2.特定糖链的识别单元在构建用于基于唾液样本作早期乳腺癌筛查、早期诊断、风险评估、药物筛选和/或疗效评估的产品方面的用途，其特征在于，所述识别单元识别以下半乳糖基化N-糖链和半乳糖基化O-糖链之任一或任意组合：m/z3065.073(NeuAc)2(Fuc)2(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2,m/z3539.281(NeuAc)1(Gal)6(GlcNAc)6+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z734.265(Fuc)2(Gal)1(GalNAc)1,m/z896.318(Fuc)2(Gal)2(GalNAc)1),m/z2773.977(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z868.295(Fuc)1(GlcNAc)1(GalNAc)2,m/z882.243(Acetyl-NeuAc)1(Gal)1(Clucose)1,m/z884.270(NeuAc)2(GalNAc)1,m/z915.285(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)1(GalNAc)1,m/z942.265(Gal)1(Sulf-GalNAc)1(GlcNAc)1(GalNAc)1,m/z1030.348(Fuc)1(Gal)1(GlcNAc)2(GalNAc)1,m/z1351.418(NeuAc)3(Gal)1(GalNAc)1,m/z2101.755(Fuc)2(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z2246.792(NeuAc)1(Fuc)1(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z2392.850(NeuAc)1(Fuc)3(Gal)2(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：以下两种半乳糖基化N-糖链和两种半乳糖基化O-糖链之任一或任意组合对应于良性乳腺肿瘤/囊肿患者(BB)；m/z3065.073(NeuAc)2(Fuc)2(Gal)4(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2,m/z3539.281(NeuAc)1(Gal)6(GlcNAc)6+(Man)3(GlcNAc)2(Fuc)1,m/z734.265(Fuc)2(Gal)1(GalNAc)1,m/z896.318(F...

【专利技术属性】
技术研发人员：李铮，阳佳君，刘夏薇，于汉杰，舒健，杜昊骐，张甲戌，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61