微流控芯片免疫诊断试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术提供了微流控芯片免疫诊断试剂盒及其制备方法，涉及微流控芯片技术领域。该微流控芯片免疫诊断试剂盒包括微流控芯片基板和抗原，微流控芯片基板具有经管状空腔串联的扇形凹陷，扇形凹陷经多巴胺处理和戊二醛处理；扇形凹陷的数目≥4；抗原包被在微流控芯片基板的部分扇形凹陷表面。该微流控芯片免疫诊断试剂盒缓解了现有技术中缺乏一种灵敏度高，准确度高的微流控芯片免疫诊断试剂盒的技术问题；本发明专利技术还提供了该微流控免疫诊断试剂盒的制备方法，该方法抗原包被较为迅速，工艺简单，用时短。

Microfluidic chip immunodiagnostic kit and its preparation method

The invention provides a microfluidic chip immunodiagnosis kit and a preparation method thereof, which relates to the technical field of microfluidic chip. The immunodiagnostic kit for microfluidic chip includes microfluidic chip substrate and antigens. The microfluidic chip substrate has fan-shaped depressions connected in series through tubular cavities, which are treated by dopamine and glutaraldehyde; the number of fan-shaped depressions is more than 4; antigen coating is on some fan-shaped depressions of microfluidic chip substrate. The microfluidic chip immunodiagnostic kit alleviates the technical problem of lacking a microfluidic chip immunodiagnostic kit with high sensitivity and accuracy in the existing technology. The invention also provides a preparation method of the microfluidic chip immunodiagnostic kit, which has the advantages of rapid antigen coating, simple process and short time use.

【技术实现步骤摘要】
微流控芯片免疫诊断试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及微流控芯片
，具体而言，涉及一种微流控芯片免疫诊断试剂盒及其制备方法。
技术介绍
微流控芯片是一种以在微米尺度空间对流体进行操控为主要特征的技术产品，主要通过微机电加工技术，在一块若干平方厘米以硅、石英、玻璃或高分子聚合物等材料的芯片上构建出微管道网络结构，把采样、稀释、加试剂、反应、分离、检测等功能集中到一块芯片上，利用可控流体在芯片中流动，实现常规化学或生物实验室的多功能的技术平台。微流控芯片技术目前虽然具有节省样品、可一次性检测多种抗原或抗体等诸多优势，但是技术尚不成熟。首先，微流控芯片的微型和便携化限制了芯片微通道的尺寸，导致了芯片中流体仅能靠分子扩散进行混合，混合效果不好，进而影响反应的灵敏性和充分性，并导致检测结果的准确性降低；第二，现有的用于免疫诊断的微流控芯片往往存在抗原或抗体固定效果差的现象，其主要表现在不同批次芯片之间以及同一芯片上各点的固定均一度差，以及非特异性吸附导致的检测结果准确率降低，固定后抗原或抗体对靶蛋白捕捉效率低的进而影响检测结果的现象；此外，现有用于免疫诊断的微流控芯片抗原包被耗时长，间接影响了抗原或抗体固定后的活性和捕捉靶蛋白的效率，从而影响了检测结果的灵敏性和准确性。因此，开发一种检测灵敏性高、准确性高的微流控免疫诊断试剂盒，具有重要的实用价值。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种微流控芯片免疫诊断试剂盒，该试剂盒具有灵敏度高、准确度高的优点。本专利技术目的之二在于提供上述微流控芯片免疫诊断试剂盒的制备方法，该方法抗原包被较为迅速，工艺简单，用时短。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：第一方面，一种微流控芯片免疫诊断试剂盒，微流控芯片免疫诊断试剂盒包括微流控芯片基板和抗原，微流控芯片基板具有经管状空腔串联的扇形凹陷，扇形凹陷经多巴胺处理和戊二醛处理；扇形凹陷的数目≥4；抗原包被在微流控芯片基板的部分扇形凹陷表面。优选地，在本专利技术方案基础上，扇形凹陷数目为5-50个，扇形凹陷包括未经抗原包被的扇形凹陷和经抗原包被的扇形凹陷，经抗原包被的扇形凹陷中，每个扇形凹陷中仅包被1种抗原；优选地，微流控芯片基板上还设有加样孔，加样孔与扇形凹陷经管状空腔连通，加样孔的容积是扇形凹陷容积的5-40倍，加样孔的数目为3-20个。优选地，在本专利技术方案基础上，微流控芯片免疫诊断试剂盒还包括连有标签的二抗，标签包括催化底物产生显色反应的酶或颜色标签。优选地，在本专利技术方案基础上，微流控芯片免疫诊断试剂盒还包括包被液、稀释液、清洗液、缓冲液、封闭液、显色液或终止液中的一种或几种。优选地，在本专利技术方案基础上，抗原包括牛口蹄疫A型病毒、牛口蹄疫O型病毒、牛口蹄疫亚洲Ⅰ型病毒、牛传染性鼻炎菌、牛病毒性腹泻病毒、布氏杆菌或牛型结核分枝杆菌中的一种或几种。第二方面，一种微流控芯片免疫诊断试剂盒的制备方法，包括如下步骤：将依次经多巴胺处理和戊二醛处理的具有经管状空腔串联的扇形凹陷的微流控芯片本体进行抗原包被，得到微流控芯片。优选地，在本专利技术方案基础上，包括如下步骤：将经多巴胺处理的具有经管状空腔串联的扇形凹陷的微流控芯片本体进行戊二醛处理，得到微流控芯片基板，然后包被抗原，得到微流控芯片。优选地，在本专利技术方案基础上，戊二醛处理包括如下步骤：将多巴胺处理过的具有经管状空腔串联的扇形凹陷的微流控芯片本体放入体积分数为8-20％的戊二醛的无水乙醇溶液，温度为10-30℃条件下，保温60-120min，然后清洗2-3次并干燥，得到微流控芯片基板。优选地，在本专利技术方案基础上，多巴胺处理包括如下步骤：用12-15mM的Tris-HCl多巴胺溶液浸泡微流控芯片本体，浸泡时间为8-10h，浸泡过程中向盐酸多巴胺溶液中通入空气，浸泡后清洗1-3次并干燥。优选地，在本专利技术方案基础上，包被抗原包括如下步骤：将抗原溶液分别加入扇形凹陷中，15-30℃保温30-120min，然后清洗1-3次，再用封闭液封闭5-12h，重复清洗2-4次，在温度为10-30℃下干燥。与已有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：(1)本专利技术的微流控芯片免疫诊断试剂盒包括微流控芯片基板和抗原，微流控芯片基板具有经管状空腔串联的扇形凹陷，由于扇形凹陷的结构特点，可以使其内部的液体混合更迅速均匀，经管状空腔进行串联，能够保证液体集中向一个方向流动，有利于微力泵对液体的泵入和排出，不易造成液体残留，避免分支过多导致的液体排出不充分进而影响检测结果的现象，有利于提高检测结果的准确性。扇形凹陷经多巴胺处理和戊二醛处理过；多巴胺处理能够使微流控芯片表面形成聚多巴胺涂层，然后经戊二醛处理能够在聚多巴胺涂层上形成一层醛基基团，有利于抗原的与其进行供价连接，连接更牢固更迅速，均一性更好，从而有效屏蔽后续加样过程中的非特异性结合，进一步提高检测结果的准确性；扇形凹陷的数目≥4，其中至少包括阴性对照、阳性对照和特定抗原包被的扇形凹陷，抗原包被在微流控芯片基板的部分扇形凹陷表面，用于与待测样品和连有标签的二抗的复合物进行结合，从而产生信号，对信号进行读取能够对检测结果进行定性或定量分析；综上，本专利技术的微流控免疫诊断试剂盒灵敏度高，检测准确度高。(2)本专利技术的微流控芯片免疫诊断试剂盒的制备方法抗原包被较为迅速，工艺简单，用时短。附图说明图1为具有经管状空腔串联的扇形凹陷的微流控芯片基板简示图；图标：1-扇形凹陷；2-管状空腔。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。根据本专利技术的第一个方面，提供了一种微流控芯片免疫诊断试剂盒，微流控芯片免疫诊断试剂盒包括微流控芯片基板和抗原，微流控芯片基板具有经管状空腔串联的扇形凹陷，扇形凹陷经多巴胺处理和戊二醛处理；扇形凹陷的数目≥4；抗原包被在微流控芯片基板的部分扇形凹陷表面。微流控芯片基板，该装置的主要特征是其容纳流体的有效结构(通道、反应室和其他某些功能部件)至少在一个维度上为微米级尺度，操控微小体积的流体在微小空间中活动，在微小的芯片上构建化学或生物实验室。本专利技术中，微流控免疫诊断试剂盒中的微流控芯片是微流控芯片本体经过多巴胺处理和戊二醛处理，并经过包被抗原以后得到，微流控芯片本体的材质为市场常用的玻璃或高分子聚合物。典型但非限制性的高分子聚合物包括：热塑性聚合物、固化型聚合物和溶剂挥发型聚合物。典型但非限制性的热塑性聚合物例如为：聚酰胺、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯等；典型但非限制性的固化型聚合物例如为：聚二甲基硅氧烷、环氧树脂或聚氨酯等；将它们与固化剂混合后，经过一段时间固化变硬后得到微流控芯片本体。典型但非限制性的溶剂挥发型聚合物例如为：丙烯酸、橡胶或氟塑料等；将它们溶于适当的溶剂后，经过缓慢的挥发溶剂得到芯片。上述多种材料中，以聚二甲基硅氧烷(PDMS)在微流控芯片的综合性能较好，研究和应用的较为广泛。微流控芯片免疫诊断试剂盒，即基于微流控芯片的免疫诊断试剂盒，该微流控芯片上的凹陷处包被有抗原物质可以进行抗体检测。需要说明的是，本专利技术中所提及的抗原或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微流控芯片免疫诊断试剂盒，其特征在于，所述微流控芯片免疫诊断试剂盒包括微流控芯片基板和抗原，所述微流控芯片基板具有经管状空腔串联的扇形凹陷，所述扇形凹陷经多巴胺处理和戊二醛处理；所述扇形凹陷的数目≥4；所述抗原包被在所述微流控芯片基板的部分扇形凹陷表面。

【技术特征摘要】
1.一种微流控芯片免疫诊断试剂盒，其特征在于，所述微流控芯片免疫诊断试剂盒包括微流控芯片基板和抗原，所述微流控芯片基板具有经管状空腔串联的扇形凹陷，所述扇形凹陷经多巴胺处理和戊二醛处理；所述扇形凹陷的数目≥4；所述抗原包被在所述微流控芯片基板的部分扇形凹陷表面。2.按照权利要求1所述的微流控芯片免疫诊断试剂盒，其特征在于，所述扇形凹陷数目为5-50个，所述扇形凹陷包括未经抗原包被的扇形凹陷和经抗原包被的扇形凹陷，所述经抗原包被的扇形凹陷中，每个扇形凹陷中仅包被1种抗原；优选地，所述微流控芯片基板上还设有加样孔，所述加样孔与所述扇形凹陷经管状空腔连通，所述加样孔的容积是所述扇形凹陷容积的5-40倍，所述加样孔的数目为3-20个。3.按照权利要求1或2所述的微流控芯片免疫诊断试剂盒，其特征在于，所述微流控芯片免疫诊断试剂盒还包括连有标签的二抗，所述标签包括催化底物产生显色反应的酶或颜色标签。4.按照权利要求1或2所述的微流控芯片免疫诊断试剂盒，其特征在于，所述微流控芯片免疫诊断试剂盒还包括包被液、稀释液、清洗液、缓冲液、封闭液、显色液或终止液中的一种或几种。5.按照权利要求1或2所述的微流控芯片免疫诊断试剂盒，其特征在于，所述抗原包括牛口蹄疫A型病毒、牛口蹄疫O型病毒、牛口蹄疫亚洲Ⅰ型病毒、牛传染性鼻炎菌、牛病毒性腹泻病毒、布氏杆菌或牛型结核分枝杆菌中的一种或几种。6.一种微流控...

【专利技术属性】
技术研发人员：李守军，付旭彬，鲍恩东，刘海霞，蔡天宁，王艳晓，吕传忠，
申请(专利权)人：天津瑞普生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12