一种乙二胺的检测方法和一种检测磷酸西格列汀中间体XG-SM2中乙二胺的方法技术

本发明专利技术提供一种基于离子色谱法的乙二胺的检测方法，色谱条件为：色谱柱：Thermo Dionex IonPac CS12A阳离子色谱柱，250mm*4mm；检测器：电导检测器；流动相：40mmol/l甲烷磺酸；流速：0.7ml/min‑1.4ml/min；柱温：28℃‑35℃；进样量：25ul。该检测方法的最低线性检出浓度为0.4μg/ml，以信噪比3:1确定方法的最低检出浓度为0.06μg/ml。本发明专利技术还提供上述检测方法在磷酸西格列汀中间体XG‑SM2杂质检测中的应用。

A Method for the Detection of Ethylenediamine and a Method for the Detection of Ethylenediamine in XG-SM2, an Intermediate of Sigliptin Phosphate

The present invention provides a method for the determination of ethylenediamine based on ion chromatography. The chromatographic conditions are as follows: Thermo Dionex IonPac CS12A cation chromatographic column, 250mm*4mm; detector: conductivity detector; mobile phase: 40mmol/l methanesulfonic acid; flow rate: 0.7ml/min 1.4ml/min; column temperature: 28 35; and injection volume: 25ul. The minimum linear detection concentration was 0.4 ug/ml, and the minimum detection concentration was 0.06 ug/ml determined by signal-to-noise ratio of 3:1. The invention also provides the application of the above detection method in impurity detection of XG SM2, an intermediate of Sigliptin phosphate.

【技术实现步骤摘要】
一种乙二胺的检测方法和一种检测磷酸西格列汀中间体XG-SM2中乙二胺的方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种乙二胺的检测方法和一种检测磷酸西格列汀中间体XG-SM2中乙二胺的方法。
技术介绍
糖尿病是一种以糖代谢紊乱为主的慢性综合性疾病，包括胰岛素依赖型糖尿病(Ⅰ型糖尿病)、非胰岛素依赖型糖尿病(Ⅱ型糖尿病，占比90％)及妊娠期糖尿病。国际糖尿病联盟发布的全球糖尿病地图(第8版)显示，2017年全球糖尿病患病率(20～79岁)大约为8.8％，约有4.25亿成人糖尿病患者，到2045年，这一数字可能达到6.29亿。中国是糖尿病患者人数最多的国家，约占世界总数的四分之一。糖尿病作为一种高发慢性病，具有病情不可逆、后期并发症多等特点。血糖若控制不佳，糖尿病慢性化可引发糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变等并发症，造成肾衰、失明等严重后果，给社会和家庭造成巨大负担。同时，糖尿病也是引起众多心血管疾病的危险因素，如心肌梗死、脑卒中等。相关降糖机制研究表明，人体内血糖升高时可促进活性肠促胰岛激素胰高血糖素样肽-1(GLP-l)和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌肽(GIP)的分泌，进而激发胰岛素的合成分泌过程，最终达到控制血糖的效果。体内的GLP-1和GIP容易被二肽基肽酶IV(DPP-IV)降解失活；因此，二肽基肽酶IV成为糖尿病治疗的靶点。磷酸西格列汀是首个获得美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗II型糖尿病的二肽基肽酶-4抑制剂(DPP-4抑制剂)，可有效抑制胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(GIP)的灭活，提高内源性GLP-1和GIP的水平，促进胰岛β细胞释放胰岛素，同时抑制胰岛α细胞分泌胰高血糖素，从而提高胰岛素水平，降低血糖，且不易诱发低血糖和增加体重。磷酸西格列汀，化学名称：7-[(3R)-3-氨基-1-氧-4-(2,4,5-三氟苯基)丁基]-5,6,7,8-四氢-3-(三氟甲基)-1,2,4-三唑酮[4,3-a]吡嗪磷酸盐(1:1)一水合物，化学分子式C16H15F6N5O·H3PO4·H2O，化学结构如式(I)所示。3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐(以下简称“XG-SM2”)，结构式如式(II)所示，是合成磷酸西格列汀过程中的一个重要中间体。乙二胺是该中间体合成的起始物料。如果合成反应不充分容易导致乙二胺杂质的残留。在药品安全性日益得到重视的情况下，药物中残留的极微量杂质的检测也逐步纳入药品质量标准或企业内控标准。因此，有必要建立对3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪盐酸盐中乙二胺的检测方法，以确保临床患者用药的安全。乙二胺分子极性较大，在普通的硅胶吸附柱中保留极差；且结构中没有发色基团，无紫外吸收；因此不能用普通硅胶为固定相的液相色谱仪分离，也不能用紫外检测器。对此，现有技术中出现了多种解决方案。如公开号CN106596795A的中国专利技术专利申请公开了以WatersXBridgeAmide色谱柱(酰胺键合固定相)分离，结合示差折光检测器来测定硫辛酸注射液中乙二胺含量。又如公开号CN106053698A的中国专利技术专利申请公开了先用对苯磺酰氯对乙二胺进行衍生化，然后用硅胶C18柱分离，紫外检测器对衍生物进行测定。离子色谱是以离子交换树脂或化学键合离子交换剂为固定相，利用被分离组分离子交换能力的差别或选择性系数的差别而实现分离的色谱方法，是一类比较特殊的高效液相色谱法。现有技术中已经出现多篇利用离子色谱检测极性胺类化合物的报道。如公开号CN104215723A的中国专利技术专利申请公开了利用离子色谱法测定卷烟测流烟气中一甲胺、一乙胺含量的方法，色谱柱为CS16分离柱和CG16保护柱，流动相为10mmol/L甲烷基磺酸，等度洗脱。再如公开号CN103454367A的中国专利技术专利申请也公开了利用离子色谱法检测一甲胺的方法，色谱柱为IonPacCS12A，流动相为16mmol/L甲烷基磺酸。迄今，尚未见到利用离子色谱检测磷酸西格列汀中间体XG-SM2中乙二胺的报道。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种利用离子色谱检测乙二胺的方法，并将该方法应用于对磷酸西格列汀中间体XG-SM2中乙二胺进行定性和/或定量检测。本专利技术的方法乙二胺出峰时间在10min左右，最低线性检出浓度为0.4μg/ml，以信噪比3:1确定方法的最低检出浓度为0.06μg/ml；且通过加样回收实验表明，供试品溶液中其他成分对乙二胺的检测无干扰。本专利技术可实现在磷酸西格列汀中间体XG-SM2中快速、有效检测乙二胺含量的目的，填补现有技术空白。为了实现上述专利技术目的。本专利技术采用了如下的技术方案：一种乙二胺的检测方法，所述方法基于离子色谱法，包括：色谱条件的建立：色谱柱：ThermoDionexIonPacCS12A阳离子色谱柱，250mm*4mm；保护柱：ThermoDionexIonPacCG12保护柱，4mm*50mm；检测器：电导检测器；流动相：40mmol/l甲烷磺酸；流速：0.7ml/min-1.4ml/min；柱温：28℃-35℃；进样量：25ul。所述流速优选为1.0ml/min。所述柱温优选为32℃。本专利技术的检测方法，还包括对照品溶液的制备，具体步骤包括：精密量取乙二胺适量，用超纯水溶解并稀释成每1ml含2μg乙二胺的溶液，即得。本专利技术的检测方法，供试品溶液的制备也采用超纯水作为溶剂。本专利技术的检测方法，还包括定性检测和/或定量测定，具体步骤包括：定性检测：在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，记录色谱图；与对照品溶液的色谱图比较，观察供试品溶液的色谱图中是否在相应的保留时间出现相应的色谱峰；和/或定量测定：在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，按外标法计算供试品溶液中乙二胺的含量。本专利技术的检测方法，最低线性检出浓度为0.4μg/ml，以信噪比3:1确定的最低检出浓度为0.06μg/ml。本专利技术还有一个目的在于提供上述检测方法在结构式如式(II)所示的磷酸西格列汀中间体XG-SM2杂质检测中的应用，具体的，所述应用为利用本专利技术提供的上述检测方法，对所述磷酸西格列汀中间体XG-SM2中的乙二胺进行定性检测和/或定量测定。本专利技术还提供一种结构式如式(II)所示的磷酸西格列汀中间体XG-SM2中的乙二胺的检测方法，包括色谱条件建立、对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、定性检测和/或定量测定，其中，色谱条件的建立：色谱柱：ThermoDionexIonPacCS12A阳离子色谱柱，250mm*4mm；保护柱：ThermoDionexIonPacCG12保护柱，4mm*50mm；检测器：电导检测器；流动相：40mmol/l甲烷磺酸；流速：0.7ml/min-1.4ml/min；优选为1.0ml/mi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乙二胺的检测方法，所述方法基于离子色谱法，包括：色谱条件的建立：色谱柱：Thermo Dionex IonPac CS12A阳离子色谱柱，250mm*4mm；保护柱：Thermo Dionex IonPac CG12保护柱，4mm*50mm；检测器：电导检测器；流动相：40mmol/l甲烷磺酸；流速：0.7ml/min‑1.4ml/min；柱温：28℃‑35℃；进样量：25ul。

【技术特征摘要】
1.一种乙二胺的检测方法，所述方法基于离子色谱法，包括：色谱条件的建立：色谱柱：ThermoDionexIonPacCS12A阳离子色谱柱，250mm*4mm；保护柱：ThermoDionexIonPacCG12保护柱，4mm*50mm；检测器：电导检测器；流动相：40mmol/l甲烷磺酸；流速：0.7ml/min-1.4ml/min；柱温：28℃-35℃；进样量：25ul。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流速优选为1.0ml/min；优选地，所述柱温为32℃。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括对照品溶液的制备，具体步骤包括：精密量取乙二胺适量，用超纯水溶解并稀释成每1ml含2μg乙二胺的溶液，即得。4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括定性检测和/或定量测定，具体步骤包括：定性检测：在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，记录色谱图；与对照品溶液的色谱图比较，观察供试品溶液的色谱图中是否在相应的保留时间出现相应的色谱峰；和/或定量测定：在所述色谱条件下，精密量取对照品溶液25μl，注入离子色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分的色谱峰高为满量程的10％-20％；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各25μl，分别进样，注入离子色谱仪，按外标法计算供试品溶液中乙二胺的含量。5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，最低线性检出浓度为0.4μg/ml，以信噪比3:1确定的最低检出浓度为0.06μg/ml。6.权利要求1至5中任一项所述的检测方法在结构式如式(II)所示...

【专利技术属性】
技术研发人员：冷春生，王广祁，宁科权，王健，盛永强，
申请(专利权)人：通化东宝药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22