快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒，包括包被有NGAL的单克隆抗体的磁微粒混悬液，标记有NGAL酶标单克隆抗体的酶结合物及NGAL校准品、浓缩洗液、底物。本发明专利技术的优点在于采用磁微粒化学发光的方法定量检测样品中NGAL的含量，对样品的前处理要求不高，样品前处理过程简单，能同时快速检测大批量的样本；使用的主要试剂是以工作液的形式提供，检验方法易行，灵敏度高，特异性强，操作简便，可在15min内出结果，省时省力。且本发明专利技术试剂盒的结构简单，使用方便，检测方法准确、快速、省时高效，能更快的适用于大批样品的检测。

【技术实现步骤摘要】
快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒
本专利技术涉及生物检测技术，尤其是涉及一种利用磁微粒化学发光法快速检测尿或血液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的试剂盒。
技术介绍
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）是由上皮组织合成的分子量为25kD的小分子分泌型蛋白，由198个氨基酸组成，其中前20个氨基酸为前导序列，容易自身聚合形成相对分子质量为46kD的同源二聚体，也能与基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinase-9，MMP-9）形成相对分子量为135kD的异源二聚体。单体形式的NGAL主要为肾脏上皮细胞所分泌，同源二聚体形式的NGAL则主要由肾脏中性粒细胞所释放，而异源二聚体则常见于癌症患者。生理状态下，NGAL低表达于肾小管、小肠、肝脏和肺组织。肾脏损伤时，NGAL的表达显著增强，血清中的NGAL由肾小球滤过，在近端上皮细胞被重吸收。当近端小管损伤时，对NGAL的重吸收能力变弱，从而导致尿液中的含量增加。当近端小管严重受损时，小管上皮细胞NGAL的合成分泌量增多，导致尿中NGAL的含量增高。尿NGAL可用于急性肾损伤（AKI）的早本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒，其特征在于：包括包被有NGAL的单克隆抗体的磁微粒混悬液，标记有NGAL酶标单克隆抗体的酶结合物及NGAL校准品、浓缩洗液、底物。

【技术特征摘要】
1.一种快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒，其特征在于：包括包被有NGAL的单克隆抗体的磁微粒混悬液，标记有NGAL酶标单克隆抗体的酶结合物及NGAL校准品、浓缩洗液、底物。2.根据权利要求1所述的快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒，其特征在于：所述磁微粒混悬液的制备方法为：将粒径1.2um的磁微粒原液充分混匀、洗涤后，加入活化剂，混匀震荡、洗涤后，加入NGAL的单克隆抗体，混匀震荡，首先用乙醇胺封闭30min，再用封闭液封闭，2-8℃保存待用。3.根据权利要求2所述的快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒，其特征在于：所述的活化剂为EDC和NHS。4.根据权利要求1所述的快速检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试剂盒，其特征在于：所述酶结合物的制备方法为：将含有0.05M、PH7.4Tris的纯化水作为缓冲液，加入牛血清白蛋白混合均匀，再加入标记NGA...

【专利技术属性】
技术研发人员：李奎，于林，李双法，毛宁宇，杨振鹏，刘功成，付光宇，吴学炜，苗拥军，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41