一种检测样液中加替沙星含量的方法技术

本方案公开了化学技术领域的一种检测样液中加替沙星含量的方法，检测时，移取一定量的加替沙星标准液或样液于15mL离心管中，依次加入2.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，5.0％(m/v)的Triton X‑114溶液0.1～1.0mL，30.0％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL，混匀。此时溶液出现浑浊现象，加入少量1mol/L的盐酸溶液，用pH计调节至体系pH＝1～14，用二次蒸馏水定容至10mL，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min。4000rpm离心5min以加快两相分离，离心后冰浴冷却5min以增加富集相粘性。反转试管弃去上层水相，为降低富集相的粘性用无水乙醇稀释富集相并定容至3mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，检测的激发和发射波长分别为295nm和480nm。本方案中的检测方法能够实现对水样中残留加替沙星的快速、准确、高重现性、高回收率的测定。

【技术实现步骤摘要】
一种检测样液中加替沙星含量的方法
本专利技术属于化学
，特别涉及一种检测样液中加替沙星含量的方法。
技术介绍
加替沙星化学名为1-环丙基-6-氟-1,4-二氢-8-甲氧基-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-4-氧代-3-喹啉羧酸，分子式为C19H22FN3O4，是第四代新型合成氟喹诺酮类抗菌剂，通过抑制细菌的DNA旋转酶和拓扑异构酶IV，从而抑制细菌DNA合成，起到快速杀菌的作用。在临床上主要应用于泌尿道感染、呼吸道感染、细菌性胃肠炎和革兰氏阴性菌引起的软组织感染。虽然加替沙星具有良好的杀菌作用，但过量的加替沙星也会对人体造成危害，因此在日常生活中了解药物或饮用水等物品中加替沙星的含量很有必要。当前对加替沙星含量的测定主要采用结晶法、动力学方法等；但该类方法均存在操作繁琐、分离时间较长和适用性窄等问题。而且目前对加替沙星含量的检测对象主要集中在加替沙星片等药物中，针对水样的检测方法鲜有报道。
技术实现思路
本专利技术意在提供一种检测样液中加替沙星含量的方法，以实现对水样中加替沙星的含量进行准确测定。本方案中的一种检测样液中加替沙星含量的方法，包括以下步骤：步骤一、加替沙星标准液的配制：将加替沙星标准品用碱性溶液溶解，并使用二次蒸馏水定容得到加替沙星标准液，冷藏备用；步骤二、原料准备：选取3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液、1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液和20％～50％(m/v)的氯化钠溶液冷藏备用；步骤三、样液处理：去除样液中的悬浮颗粒，然后将样液在避光条件下冷藏备用；步骤四、制定加替沙星标准溶液的浊点萃取标准曲线:移取0.05～5ml的加替沙星标准溶液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线；步骤五、加替沙星样液中加替沙星的测定：移取0.05～5ml的加替沙星样液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星样液的荧光强度，结合加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线，得到加替沙星样液中加替沙星的含量。本方案的有益效果：本方案采用混合胶束—浊点萃取对加替沙星样液中残留的加替沙星进行富集，避免了传统液液萃取中有机溶剂的大量使用，方法安全、绿色、环保。另外，此方法还有很多优点：使用荧光分光光度法进行检测，仪器的检测限较低，灵敏度较高，适用于痕量物质的分析检测，能够实现对水样中残留加替沙星的快速、准确、高重现性、高回收率的测定，并且仪器价格相对低廉，操作简便快捷，对操作人员的技术素质要求较低，方法容易进行推广。加替沙星标准品是一般在98～100％含量的单品，在专门的药品备案的机构可直接购买。进一步，步骤一中，所述碱性溶液为0.1～1.0mol/L的氢氧化钠溶液。采用0.1～1.0mol/L的氢氧化钠溶液作为溶剂，能更加快速的将加替沙星溶解，引入的溶剂量少且取材方便。进一步，步骤四和步骤五中，混合液冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相时，采用冰浴冷却5～10min。采用冰浴的方式进行冷却，有利于使混合液快速分层，减少冷却时间并提高取出上层水相的效率，保证检测精度。进一步，步骤四和步骤五中，混合液的pH值调节时采用0.1～1.0mol/L的盐酸溶液。采用0.1～1.0mol/L的盐酸溶液调节pH值，能更加快速的调节混合液的pH值并使避免引入的酸性溶液破坏混合液中物质的结构。进一步，步骤二中所述TritonX-114溶液的配制：取TritonX-114用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液。采用二次蒸馏水配置TritonX-114溶液，可以尽可能的减少杂质的引入，有利于减少变量，确保加替沙星的检测精度。TritonX-114为聚氧乙烯单叔辛基苯基醚。进一步，步骤二中所述SDS溶液的制备：取SDS用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液。采用二次蒸馏水配置SDS(十二烷基硫酸钠)溶液，可以尽可能的减少杂质的引入，有利于减少变量，确保加替沙星的检测精度。进一步，步骤二中所述氯化钠溶液的制备：取氯化钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为20％～50％(m/v)的氯化钠溶液。采用二次蒸馏水配置氯化钠溶液，可以尽可能的减少杂质的引入，有利于减少变量，确保加替沙星的检测精度。附图说明图1为本专利技术实施例中不同表面活性剂对加替沙星浊点萃取的影响柱状图；图2为本专利技术实施例中加替沙星浊点萃取前后的激发光谱图；图3为本专利技术实施例中加替沙星浊点萃取前后的发射光谱图；图4为本专利技术实施例中pH在1～14范围内对加替沙星浊点萃取的影响曲线图；图5为本专利技术实施例中pH在1～4范围内对加替沙星浊点萃取的影响曲线图；图6为本专利技术实施例中SDS浓度对加替沙星浊点萃取的影响曲线图；图7为本专利技术实施例中TritonX-114浓度对加替沙星浊点萃取的影响；图8为本专利技术实施例中氯化钠浓度对加替沙星浊点萃取的影响曲线图；图9为本专利技术实施例中平衡温度对加替沙星浊点萃取的影响曲线图；图10为本专利技术实施例中平衡时间对加替沙星浊点萃取的影响曲线图；图11为本专利技术实施例中加替沙星标准液浊点萃取后的标准曲线。具体实施方式下面通过具体实施方式进一步详细说明：图2中a为加替沙星浊点萃取前的激发光谱图、b为加替沙星浊点萃取后的激发光谱图；图3中a为加替沙星浊点萃取前的发射光谱图、b为加替沙星浊点萃取后的发射光谱图。实施例：本专利技术中用于检测加替沙星的方法可用于检测各种含加替沙星的溶液，尤其适用于对水体中的加替沙星含量进行检测，实施例选取水样作为加替沙星样液。一种检测样液中加替沙星含量的方法，包括以下步骤：步骤一、加替沙星标准液的配制：精密称取加替沙星标准品5.0mg于烧杯中，用少量0.1mol/L氢氧化钠溶液完全溶解后，用二次蒸馏水定容至50L的容量瓶中，浓度为100μg/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、加替沙星标准液的配制：将加替沙星标准品用碱性溶液溶解，并使用二次蒸馏水定容得到加替沙星标准液，冷藏备用；步骤二、原料准备：选取3.0％～5.0％(m/v)的Triton X‑114溶液、1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液和20％～50％(m/v)的氯化钠溶液冷藏备用；步骤三、样液处理：去除样液中的悬浮颗粒，然后将样液在避光条件下冷藏备用；步骤四、制定加替沙星标准溶液的浊点萃取标准曲线:移取0.05～5ml的加替沙星标准溶液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的Triton X‑114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线；步骤五、加替沙星样液中加替沙星的测定：移取0.05～5ml的加替沙星样液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的Triton X‑114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星样液的荧光强度，结合加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线，得到加替沙星样液中加替沙星的含量。...

【技术特征摘要】
1.一种检测样液中加替沙星含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、加替沙星标准液的配制：将加替沙星标准品用碱性溶液溶解，并使用二次蒸馏水定容得到加替沙星标准液，冷藏备用；步骤二、原料准备：选取3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液、1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液和20％～50％(m/v)的氯化钠溶液冷藏备用；步骤三、样液处理：去除样液中的悬浮颗粒，然后将样液在避光条件下冷藏备用；步骤四、制定加替沙星标准溶液的浊点萃取标准曲线:移取0.05～5ml的加替沙星标准溶液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的pH值调节为1～6，用二次蒸馏水定容，摇匀，于室温下静置5.0～30.0min；然后以2000～8000rpm的转速离心5～10min，冷却使其自然分层，得到上层的水相和下层的富集相；冷却后反转离心管弃去上层水相，再用无水乙醇稀释下层富集相并定容至0.5～5mL，联用荧光分光光度计对其进行测定，确定加替沙星的激发波长和发射波长分别为295nm和480nm，得到加替沙星标准液的浊点萃取标准曲线；步骤五、加替沙星样液中加替沙星的测定：移取0.05～5ml的加替沙星样液于15mL离心管中，依次加入1.0％～3.0％(m/v)的SDS溶液0.5～5.0mL，3.0％～5.0％(m/v)的TritonX-114溶液0.1～1.0mL，20％～50％(m/v)的氯化钠溶液1.0～4.0mL得到混合液，混匀；待混合液中出现浑浊时，将混合液的...

【专利技术属性】
技术研发人员：余兰，姜坤妤，
申请(专利权)人：遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52