变态反应的分子起源制造技术

本发明专利技术涉及用于调控或检测对象变态反应的组合物和方法。本发明专利技术可用于降低组合物、例如食品的变应原性，或刺激产品、例如疫苗的免疫原性。本发明专利技术可用于任何哺乳动物，例如人类。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】变态反应的分子起源本专利技术涉及用于调控或检测对象变态反应的组合物和方法。本专利技术源于专利技术人发现哺乳动物变态反应的分子起源，并在例如医疗、营养、美容或农业产业中具有广泛的用途。本专利技术可用于降低组合物、例如食品的变应原性，或刺激产品、例如疫苗的免疫原性。本专利技术可用于任何哺乳动物，例如人类。
技术介绍
变态反应的临床表现高度多样化，几乎影响所有能够与外界环境接触的器官，即呼吸、皮肤、消化和泌尿生殖器官，并且能够导致全身性过敏性休克，或多或少伴有严重的血液动力学后果。IgE抗体是导致诸如哮喘、枯草热、湿疹、荨麻疹、食物变态反应和过敏反应的疾病的I型超敏反应的基石。IgE循环且锚定于在肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和郎格罕氏细胞(Langerhanscells)表面表达的FcεRI。变应原诱导的锚定于组织肥大细胞上的FcεRI的IgE的交联引起释放组胺和多种细胞因子的级联事件，该级联事件通过募集也带有锚定于FcεRI的IgE的循环嗜碱性粒细胞而造成这两种反应的放大。虽然这些事件已被非常详细地表征，但关于为什么对大多数个体无害的任何给定蛋白质对其他个体则变成可能致命的变应原这个简单问题仍然没有答案。在此介绍的工作解释了IgE产生的最初触发不是源于已知的变应原，而是源于从带有因转录错误而引起的移码的mRNA所翻译的微量变体。
技术实现思路
本专利技术源于专利技术人发现哺乳动物变态反应的分子起源。本专利技术由此提供了用于检测、控制或调控哺乳动物的免疫应答或变态反应的新型组合物和方法。本专利技术特别源于专利技术人发现变态反应在哺乳动物中是由转录失真(“TI”)产生的蛋白质(或其表位)引发的。特别地，如专利技术人先前所证明的，TI产生具有修饰的C末端的异常蛋白质。继续他们的研究，专利技术人现在意外地发现TI缺口生成的蛋白质获得在哺乳动物中的免疫原性并引发体内变态反应。专利技术人还发现，由TI缺口产生的这样的蛋白质本质上是阳离子性的，并且从食物或其他组合物中去除这样的蛋白质产生低变应原性的组合物。本专利技术由此提供了用于检测、监测和调控哺乳动物的免疫原性和变态反应的新型组合物和方法。本专利技术的目的更具体地在于一种降低组合物的变应原性或免疫原性的方法，所述方法包括处理所述组合物以去除阳离子蛋白质。本专利技术的目的在于一种降低组合物的变应原性或免疫原性的方法，所述方法包括处理所述组合物以去除由转录失真产生的蛋白质，更特别是具有由转录失真缺口(transcriptioninfidelitygap)产生的序列的蛋白质。所述组合物可以是任何组合物，例如食物、饲料、药品、兽医产品、美容品等。在一个具体实施方式中，本专利技术提供了一种制备食品的方法，所述方法包括(i)提供食品制备物，(ii)处理所述食品制备物以从中去除阳离子蛋白质，和(iii)任选地用一种或多种合适的赋形剂配制所述经处理的食品。本专利技术的另一个具体实施方式涉及一种制备药品的方法，所述方法包括(i)提供药品制备物，(ii)处理所述药品制备物以从中去除阳离子蛋白质，和(iii)任选地用一种或多种合适的赋形剂配制所述经处理的药品。本专利技术还提供了包含食品和合适赋形剂的食物组合物，其中所述食品含有少于1重量％的阳离子蛋白质，更优选少于0.5％、少于0.3％、少于0.2％或少于0.1％。本专利技术还提供了包含药品/兽医产品和合适的赋形剂的药物组合物，其中所述药品/兽医产品已经过处理以含有少于1重量％的阳离子蛋白质，更优选少于0.5％、少于0.3％少于0.2％或少于0.1％。本专利技术还涉及一种治疗对象的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的如上定义的药品或兽医产品。本专利技术还提供了一种用于检测有变态反应倾向的对象的方法，所述方法包括测量来自所述对象的样品中针对具有由转录失真产生的序列的蛋白质的IgE水平，其中所述水平与对照值相比的差异指示有变态反应倾向的对象。本专利技术的另一个目的是一种具有由转录失真产生的序列的阳离子蛋白质或肽，其用作佐剂(例如，以刺激哺乳动物中的抗体产生)。本专利技术还提供了一种诱导或刺激哺乳动物中抗体产生的方法，所述方法包括向哺乳动物施用具有由转录失真产生的序列的阳离子蛋白质或肽。本专利技术还提供了一种产生IgE的方法，所述方法包括(i)在允许诱导IgE产生的条件下向非人哺乳动物施用由转录失真产生的阳离子蛋白质或肽，和(ii)收集所产生的IgE。本专利技术还提供了一种产生IgE的方法，所述方法包括：(i)在允许诱导IgE产生的条件下向非人哺乳动物施用由转录失真产生的阳离子蛋白质或肽，(ii)收集产生IgE的细胞，和(iii)从所述收集的细胞获取单克隆和/或人源化IgE。步骤(iii)通常包括产生杂交瘤、杂交瘤的克隆选择和单克隆抗体的产生。本专利技术还涉及一种制备抗IgE抗体的方法，所述方法包括：(i)在允许诱导抗体的条件下向非人哺乳动物施用由转录失真产生的阳离子蛋白质或肽，(ii)收集所产生的抗体，和(iii)选择结合Fc受体的抗体。本专利技术的另一个目的是一种药物组合物，其包含结合Fc受体的抗体。本专利技术还提供了一种疫苗组合物，其包含免疫原和具有由转录失真产生的序列的蛋白质或肽。附图说明图1.在胃内施用TI和非TI肽后的IgE产生。上图部分指出了施用所述肽和从小鼠收集血液的天数。通过ELISA技术进行血液中IgE的测定，结果表示为光密度。两种肽之间的差异是显著的(p<10–6)。图2.在腹膜内施用TI和非TI肽后的IgE产生。上图部分指出了施用所述肽和从小鼠收集血液的天数。通过ELISA技术进行血液中IgE的测定，结果表示为光密度。两种肽之间的差异是显著的(p<10–3)。图3.RNA上的TI缺口(红色)导致蛋白质阅读框的移位。由所述缺口引起的蛋白质序列与正常蛋白质非常不同。图4.向小鼠施用富含阳离子蛋白质和贫阳离子蛋白质的级分(6只小鼠/组)。从血液样品中，通过ELISA技术进行IgE的测定，结果表示为光密度。误差棒指示整个组的测量值的可变性。图5：缺失主要位于变应原的ORF内。已确定了变应原(黑色)和非变应原(白色)的缺失数量。然后将缺失的位置限定为ORFIN(位于编码序列内)或ORFOUT(位于非翻译区内)。图6：对于影响A、T、C和G重复的缺失而言，变应原(黑色)和非变应原(白色)位于ORF内和UTR内的缺失数之间的比率。ND：未确定(没有影响变应原中G重复的缺失)。图7：在第33天(A)和第49天(B)对花生的IgE抗体应答。小鼠(n＝10只/处理组，每个实验)在第0、7、14和36天通过腹膜内注射接受有或没有LewisX佐剂的花生提取物(400μg蛋白质)或重组AraH2(400μg)。通过ELISA分析血清样品(第33天和第49天)的特异性IgE抗体。数据显示为平均值(±SEM)。进行非参数Wilcoxon检验(*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001).图8：影响Arah2的缺失位置以及TI蛋白质和肽的预测。显示了两种同种型。来自每个同种型的表位以灰色表示，优势免疫表位以黑色表示。竖条指示暗含相同终止密码子的缺失组的位置。对于某些组，显示了序列。转录失真(TI)序列是粗体；表位带有下划线。图表11、12和13还含有这些TI变体的生化和生物信息学特征。参考本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种降低组合物的免疫原性或变应原性的方法，所述方法包括处理所述组合物以去除阳离子蛋白质。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.18 EP 16305297.01.一种降低组合物的免疫原性或变应原性的方法，所述方法包括处理所述组合物以去除阳离子蛋白质。2.根据权利要求1所述的方法，其包括去除所述组合物的至少50重量％的等电点高于7.4的阳离子蛋白质，优选所述组合物的至少60％、70％、80％或90％的所述阳离子蛋白质。3.根据权利要求1所述的方法，其中经处理的组合物含有小于2重量％的等电点高于8的阳离子蛋白质，更优选小于1％，更加优选小于0.5％、小于0.2％或小于0.1％。4.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其中所述阳离子蛋白质包括由转录失真产生的阳离子蛋白质。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述阳离子蛋白质包含由转录失真缺口产生的肽序列。6.根据前述权利要求任一项所述的方法，其中将所述组合物通过阳离子交换和/或亲和色谱进行处理。7.根据权利要求6所述的方法，其包含(i)提供所述组合物的溶液，(ii)如有必要，将所述组合物的溶液调节到具有包含于7和9之间的pH，(iii)将所述溶液进行阳离子交换色谱，使所述溶液中等电点高于所调节的pH的组分结合，和(iv)回收洗脱液。8.根据权利要求6或7所述的方法，其包括利用转录失真抗体对所述组合物进行亲和色谱的(进一步)步骤。9.根据权利要求2至6任一项所述的方法，其中所述组合物是或包含食物成分、饲料成分或药物。10.根据权利要求1至9任一项所述的方法，其中所述组合物包含纯化的和/或重组的蛋白质。11.根据权利要求1至10任一项所述的方法，其中所述组合物包含乳汁或乳制品并且所述方法包括去除至少一种包含选自SEQIDNO：1至5的TI缺口肽序列的蛋白质。12.根据权利要求1至10任一项所述的方法，其中所述组合物包含花生制品并且所述方法包括去除至少一种包含选自SEQIDNO：110至120的TI缺口肽序列的蛋白质。13.一种制备食品的方法，所述方法包括(i)提供食品制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：伯纳德·毕海因，维尔日妮·欧希尔，玛丽·布鲁利亚德，桑德林·雅克坤内特，贝诺伊特·图弗诺特，奥利弗·鲁瓦泰尔，
申请(专利权)人：真克里斯公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR