抗C5抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了结合补体因子5(C5)蛋白的单克隆抗体，及其使用方法。在本发明专利技术的不同实施方案中，抗体是结合C5蛋白的完全人抗体。在一些实施方案中，本发明专利技术的抗体可用于抑制或中和C5活性，由此提供治疗或预防人类的C5相关疾病或疾患的方法。在一些实施方案中，本发明专利技术提供了具有提高的药物动力学和药效学特性的抗C5抗体，例如，超过10天的半衰期。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗C5抗体及其用途本申请于2017年6月13日作为PCT国际专利申请提交并且要求2016年6月14日提交的美国临时申请No.62/349,705；2016年10月7日提交的62/405,561；和2016年11月15日提交的62/422,107的优先权的权益，将每篇的公开内容全部按引用并入本文中。专利
本专利技术涉及特异性地结合补体因子C5的抗体和抗体的抗原结合片段，以及使用那些抗体的治疗和诊断方法。专利技术背景补体系统是一组激活时导致靶细胞裂解并促进通过调理作用(opsonization)的吞噬作用的血浆蛋白。通过三个主要途径，经由一系列蛋白水解步骤，激活补体：经典途径，其通常通过免疫复合物激活，可以通过未受保护的细胞表面诱导的旁路途径，和甘露糖结合凝集素途径。所有这三个补体级联的途径集中于补体组分5(C5)蛋白的蛋白水解裂解。补体组分5(C5)的裂解导致片段C5a和C5b的产生，这是补体级联激活期间的关键过程。C5a可以通过结合其受体产生多向性生理反应(Monk等2007，Br.J.Pharmacol.152:429-448)。C5a是有效的促炎性介质，其诱导趋化移动、增强细胞粘附、刺激突发性氧化作用并诱导各种炎性介质(如组胺或细胞因子)的释放。C5b介导膜-攻击复合物(MAC，或C5b-9)的形成，导致补体依赖性细胞毒性(CDC)后期的细胞裂解。此外，在对C5b-9的细胞溶解具有抵抗力的有核细胞中，亚裂解(sublytic)量的C5b-9可以引起细胞激活，这导致细胞增殖，促炎性介质的产生和胞外基质的产生。C5的单克隆抗体是本领域已知的并且已经描述于例如美国专利/公开No.9206251、9107861、9079949、9051365、8999340、8883158、8241628、7999081、7432356、7361339、7279158、6534058、6355245、6074642、20160299305、20160051673、20160031975、20150158936、20140056888、20130022615、20120308559，以及WO2015198243、WO2015134894、WO2015120130、EP2563813B1、EP2328616B1和EP2061810B1中。以高亲和性特异性地结合C5蛋白并且具有提高的药物动力学特性的完全人抗体在多种C5-相关疾病(非典型溶血性尿毒症综合征)的预防和治疗中是重要的。专利技术简述本专利技术提供了特异性地结合补体因子5(C5)蛋白的抗体及其抗原结合片段。本专利技术的抗体对于抑制或中和C5蛋白的活性特别有用。在某些实施方案中，抗体在预防、治疗或缓解受试者中的C5-相关疾病或疾患的至少一种症状或指征中是有用的。在某些实施方案中，可以预防性地或治疗性地将抗体给药于患有C5-相关疾病或疾患或具有C5-相关疾病或疾患风险的受试者。在某些实施方案中，抗C5抗体是以高亲和性结合C5并且具有提高的药物动力学(PK)和药效学(PD)特性的完全人抗体。这样具有提高的PK/PD的高亲和性抗体可以用于给患有C5-相关疾病或疾患的受试者提供较好的效力，以及较低频率的给药。本专利技术的抗体可以是全长的(例如，IgG1或IgG4抗体)或可以只包含抗原结合部分(例如，Fab、F(ab’)2，或scFv片段)，并且可以修饰以实现功能性，例如，提高在宿主中的持久性或消除残余的效应子功能(Reddy等，2000，J.Immunol.164:1925-1933)。在某些实施方案中，抗体可以是双特异性的。在第一个方面中，本专利技术提供了分离的特异性地结合C5蛋白的重组单克隆抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，抗体是完全人的单克隆抗体。本专利技术的示例性抗C5抗体列于本文的表1和2中。表1列出了示例性抗C5抗体的重链可变区(HCVR)、轻链可变区(LCVR)、重链互补决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和轻链互补决定区(LCDR1、LCDR2和LCDR3)的氨基酸序列识别号。表2列出了示例性抗C5抗体的HCVR、LCVR、HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的核酸序列识别号。本专利技术提供了包含HCVR的抗体，或其抗原结合片段，所述HCVR包含选自表1中所列的任一个HCVR氨基酸序列的氨基酸序列，或与其具有至少90％，至少95％，至少98％或至少99％序列同一性的基本上相似的序列。本专利技术还提供了包含LCVR的抗体，或其抗原结合片段，所述LCVR包含选自表1中所列的任一个LCVR氨基酸序列的氨基酸序列，或与其具有至少90％，至少95％，至少98％或至少99％序列同一性的基本上相似的序列。本专利技术还提供了包含HCVR和LCVR氨基酸序列对(HCVR/LCVR)的抗体，或其抗原结合片段，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含与表1中所列的任一个LCVR氨基酸序列配对的表1中所列的任一个HCVR氨基酸序列。根据某些实施方案中，本专利技术提供了包含表1中所列的任一个示例性抗C5抗体内所含的HCVR/LCVR氨基酸序列对的抗体，或其抗原结合片段。在某些实施方案中，HCVR/LCVR氨基酸序列对选自SEQIDNO:2/10、18/26、34/42、50/58、66/74、82/90、98/106、98/114、122/106、98/130、138/106、146/106、122/130、146/114、146/130、138/130、154/162、170/178、186/194、202/210、218/226、234/242、250/258、266/258、274/282、290/298、306/314、322/330和338/346。在某些实施方案中，HCVR/LCVR氨基酸序列对选自SEQIDNO:50/58(例如，H4H12161P)、98/106(例如，H4H12166P)、138/106(例如，H4H12166P5)，或202/210(例如，H4H12170P)。在某些实施方案中，本专利技术提供了包含HCVR和LCVR的抗C5抗体或其抗原结合片段，所述HCVR包含表1中所列的具有不超过五个氨基酸置换的氨基酸序列，并且所述LCVR包含表1中所列的具有不超过两个氨基酸置换的氨基酸序列。例如，本专利技术提供了包含HCVR和LCVR的抗C5抗体或其抗原结合片段，所述HCVR包含具有不超过五个氨基酸置换的SEQIDNO:98的氨基酸序列，并且所述LCVR包含具有不超过两个氨基酸置换的SEQIDNO:106的氨基酸序列。在另一个实施方案中，本专利技术提供了包含HCVR和LCVR的抗C5抗体或其抗原结合片段，所述HCVR包含具有一个氨基酸置换的SEQIDNO:98的氨基酸序列，并且所述LCVR包含具有一个氨基酸置换的SEQIDNO:106的氨基酸序列。本专利技术还提供了包含重链CDR1(HCDR1)的抗体，或其抗原结合片段，所述重链CDR1包含选自表1中所列的任一个HCDR1氨基酸序列的氨基酸序列或具有至少90％，至少95％，至少98％或至少99％序列同一性的基本上相似的序列。本专利技术还提供了包含重链CDR2(HCDR2)的抗体，或其抗原结合片段，所述重链CDR2包含选本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性地结合补体因子5(C5)蛋白的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段与SEQ ID NO:360或SEQ ID NO:361内所含的一个或多个氨基酸相互作用，如通过氢/氘交换测定的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.14 US 62/349,705;2016.10.07 US 62/405,561;1.一种特异性地结合补体因子5(C5)蛋白的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段与SEQIDNO:360或SEQIDNO:361内所含的一个或多个氨基酸相互作用，如通过氢/氘交换测定的。2.权利要求1的抗原结合片段的抗体，其中抗体或其抗原结合片段与C5的α链和/或β链内所含的一个或多个氨基酸相互作用，如通过氢/氘交换测定的。3.权利要求1或2的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段没有与C5的C5a过敏毒素区域的氨基酸相互作用，如通过氢/氘交换测定的。4.权利要求1-3任一项的抗体或抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段与选自(a)SEQIDNO:359的氨基酸591至599；(b)SEQIDNO:359的氨基酸593至599；(c)SEQIDNO:359的氨基酸775至787；(d)SEQIDNO:359的氨基酸775至794；和(e)SEQIDNO:359的氨基酸779至787的氨基酸序列相互作用。5.权利要求1-4任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段与选自SEQIDNO:360和361的氨基酸序列所含的至少五个氨基酸相互作用。6.权利要求1-5任一项的抗原结合片段的抗体，其中抗体或其抗原结合片段与SEQIDNO:360和SEQIDNO:361内所含的一个或多个氨基酸相互作用，如通过氢/氘交换测定的。7.权利要求1-6任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段与SEQIDNO:360和361的氨基酸序列相互作用，如通过氢/氘交换测定的。8.权利要求1-7任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段包括重链可变区(HCVR)内所含的三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)和轻链可变区(LCVR)内所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，其中HCVR包括：(i)SEQIDNO:98的氨基酸序列，(ii)与SEQIDNO:98具有至少90％同一性的氨基酸序列，(iii)与SEQIDNO:98具有至少95％同一性的氨基酸序列；或(iv)具有不超过5个氨基酸置换的SEQIDNO:98的氨基酸序列；和LCVR包括：(i)SEQIDNO:106的氨基酸序列，(ii)与SEQIDNO:106具有至少90％同一性的氨基酸序列，(iii)与SEQIDNO:106具有至少95％同一性的氨基酸序列；或(iv)具有不超过5个氨基酸置换的SEQIDNO:106的氨基酸序列。9.权利要求1-8任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体具有一个或多个以下的特征：(a)在给药于食蟹猴时具有高于10μg/mL的血清浓度直至第70天；(b)在给药于食蟹猴时阻断经典途径(CP)溶血直至第35天，如在离体溶血分析中测量的；(c)在给药于食蟹猴时阻断旁路途径(AP)溶血直至第35天，如在离体溶血分析中测量的；(d)在食蟹猴中具有超过10天的血清半衰期；(e)给药于C5人源化小鼠时，具有超过10μg/mL的血清浓度直至第40天；(f)给药于C5人源化小鼠时，阻断CP溶血直至第30天，如在离体溶血分析中测量的；和(g)在C5人源化小鼠中具有超过10天的血清半衰期。10.权利要求1-9任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体具有选自以下的其他特征：(a)是完全人单克隆抗体；(b)在25℃下以低于0.9nM的解离常数(KD)结合人C5，如在表面等离子体共振分析中测量的；(c)在37℃下以低于0.3nM的KD结合人C5，如在表面等离子体共振分析中测量的；(d)以低于65nM的KD结合猴C5，如在表面等离子体共振分析中测量的；(e)以低于0.5nM的KD结合人C5变体R885H(SEQIDNO:356)，如在表面等离子体共振分析中测量的；(f)以低于0.5nM的KD结合人C5变体R885C(SEQIDNO:357)，如在表面等离子体共振分析中测量的；(g)阻断超过95％的人C5介导的经典途径(CP)溶血并且具有低于6nM的IC50，如在CP溶血分析中测量的；(h)阻断超过70％的人C5介导的旁路途径(AP)溶血并且具有低于165nM的IC50，如在AP溶血分析中测量的；(i)以低于185nM的IC50抑制非洲绿猴C5介导的CP溶血，如在CP溶血分析中测量的；(j)以低于235nM的IC50抑制非洲绿猴C5介导的AP溶血，如在AP溶血分析中测量的；(k)以低于145nM的IC50抑制食蟹猴C5介导的CP溶血，如在CP溶血分析中测量的；和(l)以低于30nM的IC50抑制食蟹猴C5介导的AP溶血，如在AP溶血分析中测量的。11.权利要求8-10任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段包括HCVR，所述HCVR包括具有不超过5个氨基酸置换的SEQIDNO:98的氨基酸序列。12.权利要求8-11任一项的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段包括LCVR，所述LCVR包括具有不超过5个氨基酸置换的SEQIDNO:106的氨基酸序列。13.权利要求11或12的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或其抗原结合片段包括HCVR和LCVR，所述HCVR包括具有不超过5个氨基酸置换的SEQIDNO:98的氨基酸序列，所述LCVR包括具有不超过5个氨基酸置换的SEQIDNO:106的氨基酸序列。14.权利要求8-13任一项的抗体或其抗原结合片段，包括包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：呼莹，A·拉图兹克，C·罗马诺，W·奥尔森，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US