甜菊醇糖苷的结晶制造技术

一种纯化莱鲍迪甙A的方法，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液；(c)从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】甜菊醇糖苷的结晶
本专利技术涉及纯化莱鲍迪甙A(rebaudiosideA)的方法以及包含通过所述方法能够获得的莱鲍迪甙A的组合物。
技术介绍
多年生草本植物甜叶菊(SteviarebaudianaBert.)的叶子积聚大量被称为甜菊醇糖苷(steviolglycosides)的具有强烈甜味的化合物。虽然这些化合物的生物功能尚不清楚，但它们作为替代性高效甜味剂具有商业意义。这些甜的甜菊醇糖苷的功能和感官特性表现为优于许多高效甜味剂的功能和感官特性。此外，研究表明甜菊苷(stevioside)能够降低II型糖尿病患者的血糖水平，并且能够降低轻度高血压患者的血压。甜菊醇糖苷积聚在甜叶菊叶中，其中它们可占叶干重的10％至20％。甜菊苷和莱鲍迪甙A均是热稳定和pH稳定的，并且适用于碳酸饮料和许多其他食物。甜菊苷比蔗糖甜110与270倍之间，莱鲍迪甙A比蔗糖甜150与320倍之间。此外，莱鲍迪甙D也是在甜叶菊叶中积聚的高效二萜糖苷甜味剂。它可比蔗糖甜约200倍。莱鲍迪甙M是另一种高效二萜糖苷甜味剂。它在某些甜叶菊品种叶中以痕量存在，但已表明其具有优异的味道特征。目前的联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO)下的食品添加剂联合专家委员会(JECFA)标准要求将甜菊醇糖苷的总量纯化至95％或更高。用于纯化莱鲍迪甙A的现有方法依赖于重复的纯化步骤，包括色谱，其是昂贵且耗时的操作。先前报道的从莱鲍迪甙A和甜菊苷的混合物中纯化莱鲍迪甙A的工作需要许多重复的纯化步骤。美国专利No.5,962,678公开了使用无水甲醇溶液对莱鲍迪甙A进行重结晶以获得纯度为80％的莱鲍迪甙A。通过多次重复用无水甲醇重结晶，莱鲍迪甙A的纯度可以提高至超过95％。美国专利公开No.2006/0083838公开了通过用包含乙醇和4％-15％水的溶剂重结晶来纯化莱鲍迪甙A。日本专利申请No.55-23756公开了一种通过从乙醇水溶液(>70％)中结晶来纯化莱鲍迪甙A和甜菊苷的方法，以获得纯度为80％的莱鲍迪甙A。美国专利公开No.2007/0082103公开了一种通过从乙醇水溶液中重结晶来纯化莱鲍迪甙A的方法，从粗制莱鲍迪甙(60％)进行两步重结晶导致以97％的产率形成纯度>98％的莱鲍迪甙。WO2007/149672和WO2011/082288公开了使用有机溶剂的单步结晶方法。然而，这些现有技术方法不能仅使用单一重结晶步骤来提供能够满足当前JECFA标准的基本上纯的甜菊醇糖苷组合物或具有足够纯度的莱鲍迪甙A组合物，并且通常需要使用吸附色谱。因此，需要简单、有效且经济的制备基本上纯的甜菊醇糖苷组合物的方法，理想的是所述方法减少对色谱的需要。专利技术概述本专利技术基于以下发现：莱鲍迪甙A(rebA)可以从包含该甜菊醇糖苷的溶液中直接结晶。这种直接结晶允许在单一单元操作中潜在地获得高纯度rebA组合物，例如基本上纯的rebA组合物，通常不需要吸附色谱(也称为“结合洗脱色谱”)。因此，本专利技术满足了以下需要：提供纯化包含rebA的甜菊醇糖苷组合物的方法，以获得具有更高纯度rebA的组合物，优选以高产率获得具有更高纯度rebA的组合物。因此，本专利技术涉及一种纯化莱鲍迪甙A的方法，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液；和(c)从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的基本上纯的组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。本专利技术还提供了：-一种纯化莱鲍迪甙A的方法，所述方法包括在不存在吸附色谱步骤的情况下纯化莱鲍迪甙A，和-一种组合物，所述组合物包含通过前述权利要求中任一项所述的方法能够获得的莱鲍迪甙A。附图简介图1示出了甜菊醇糖苷的直接结晶回收方法。图2示出了导致甜菊醇糖苷生物合成的潜在通路的示意图。专利技术详述在本说明书和所附权利要求书中，词语“包含”、“包括”和“具有”以及变化形式应被解释为包含性的。也就是说，这些词语意图表达在上下文允许的情况下可包含未具体叙述的其他要素或整数。不使用数量词修饰时在本文中用于指代一个或一个以上(即一个或至少一个)的语法对象。举例来说，“要素”可意指一个要素或多于一个要素。甜菊醇糖苷组合物可被用作天然高效甜味剂。rebA是可以以不同的量存在于甜菊醇糖苷组合物中的甜菊醇糖苷之一。通常，在植物来源的提取物中仅发现痕量的rebA，但它可以在发酵来源的甜菊醇糖苷组合物中以较高的量存在。随着甜菊醇糖苷组合物中总rebA的量增加，组合物的成本也进一步提高。因此，需要提供以经济的方式制备包含高纯度rebA的组合物的方法。特别地，需要提供以经济的方式制备具有高纯度rebA的基本上纯的甜菊醇糖苷组合物的方法。本专利技术通过提供下述方法满足了这种需要，所述方法用于将包含较低纯度rebA的组合物纯化为包含较高纯度rebA的组合物，例如包含基本上纯的rebA的组合物。本文中关于给定的莱鲍迪甙例如rebA所使用的纯度表示：以干基计，给定组合物中该莱鲍迪甙的重量百分比。在本专利技术的方法中，提供了较低纯度的rebA溶液，其可以直接结晶以获得更高纯度的甜菊醇糖苷组合物。该方法通常不需要使用吸附色谱。也就是说，本专利技术的方法通常是这样的方法，其中通过直接结晶rebA从包含低纯度rebA的组合物获得包含高纯度rebA的组合物。因此，本专利技术涉及一种纯化莱鲍迪甙A的方法，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液；和(c)从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的基本上纯的组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。所述方法可包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液，以干基计，莱鲍迪甙A的纯度为至少约20重量％；(b)浓缩所述溶液；(c)和从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的基本上纯的组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。所述方法可包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液以获得包含浓度为至少约80g/L的莱鲍迪甙A的溶液；(c)和从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的基本上纯的组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。也就是说，本专利技术的方法允许纯化包含低纯度rebA(例如以干基计纯度为至少约20重量％的rebA)的甜菊醇糖苷组合物(本文中的“低纯度组合物”或“低纯度溶液”)，使得所产生的甜菊醇糖苷组合物包含高纯度的rebA(本文中的“高纯度组合物”)，例如以干基计至少约60％重量的rebA。图1说明了可以实施本专利技术方法的一种方式。所述方法包括浓缩步骤。低纯度溶液中rebA的浓度可以为至少约5g/L，例如至少约10g/L，例如至少约15g/L，例如至少约30g/L。将步骤(a)中的溶液浓缩，使得溶液中的rebA浓度至少提高至约50g/L、至少约100g/L、至少约150g/L、至少约200g/L、至少约250g/L或至少约300g/L或更高。步骤(a)中的溶液的rebA纯度可以为以干基计至少约20重量％，例如以干基计至少约30重量％，例如以干基计至少约40重量％，例如以干基计至少约50重量％。步骤(a)中的溶液可以是从甜叶菊植物中提取的原始形式的粗制甜菊醇糖苷组合物。但优选地，这种溶液是发酵产生的甜菊醇糖苷组合物。也就是说，溶液可以是包含通过发酵产生的甜菊醇糖苷的组合物。因此，包含rebA的步骤(a)中的溶液可以是从Steviarebaudiana植物获得的溶液。然而，优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纯化莱鲍迪甙A的方法，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液；和(c)从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.09 US 62/372,7371.一种纯化莱鲍迪甙A的方法，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液；和(c)从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。2.根据权利要求1所述的方法，其用于纯化期望的甜菊醇糖苷，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液，以干基计，莱鲍迪甙A的纯度为至少约20重量％；(b)浓缩所述溶液；(c)和从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。3.根据权利要求1或2所述的方法，其用于纯化期望的甜菊醇糖苷，所述方法包括：(a)提供包含莱鲍迪甙A的溶液；(b)浓缩所述溶液以获得包含浓度为至少约80g/L的莱鲍迪甙A的溶液；(c)和从所述溶液中结晶出包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物，从而纯化莱鲍迪甙A。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中以干基计，所述包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物包含纯度高于约60重量％的莱鲍迪甙A。5.根据权利要求4所述的方法，其中以干基计，所述包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物包含纯度高于约90重量％的莱鲍迪甙A。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中以干基计，所述包含莱鲍迪甙A的高纯度组合物包含至少约98重量％的总甜菊醇糖苷。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中以干基计，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾格·加拉伊弗，玛纳斯·兰詹·萨霍，
申请(专利权)人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰,NL