用PD-L1结合多肽进行PET成像制造技术

本文中提供了与PD‑L1特异性地结合的新型

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用PD-L1结合多肽进行PET成像相关申请的交叉引用本申请要求2016年6月1日提交的美国临时申请No.62/344,258的优先权。将上述申请的内容通过提述并入本文。背景程序性死亡配体-1(PD-L1)是PD-1(一种关键的免疫检查点受体，由活化的T和B细胞表达并且介导免疫抑制)的表面糖蛋白配体，其在抗原呈递细胞和人癌症均可发现，通过与PD-1结合下调T细胞活化和细胞因子分泌(Freeman等人，2000；Latchman等人，2001)。抑制PD-L1/PD-1相互作用在临床前模型中可能产生强有力的抗肿瘤活性，破坏这种相互作用的抗体已进入治疗癌症的临床试验(美国专利No.8,008,449和7,943,743；Brahmer等人，2010；Topalian等人，2012b；Brahmer等人，2012；Flies等人，2011；Pardoll，2012；Hamid和Carvajal，2013)。PET，即正电子发射断层摄影术(PositronEmissionTomography)，是一种非侵入性核医学技术，其可生成体内各种分子过程或与疾病病理学相关的蛋白质的位置的三维图像。这种方法学检测由导入体内的发射正电子的放射性核素(示踪剂)在生物活性分子上间接发射的伽马射线对。PET成像工具具有多种广泛的药物开发用途，并且由于同一种工具既可在临床前又可在临床上使用，具有独特的转化医学优势。实例包括直接可视化靶标的体内饱和；监测正常组织中的摄取以预期毒性或患者与患者之间的变化；量化病变组织；肿瘤转移；监测随时间的药物效力、或随时间的抗性等。本文中描述了适合用作诊断剂/成像剂，例如用于正电子发射断层摄影术的新型抗PD-L1Adnectin。概述本专利技术至少部分基于可用作诊断剂/成像剂(例如用于正电子发射断层摄影术)的新型抗人PD-L1Adnectin的发现，及其对受试者的施用方法。这些药剂可用于例如区分PD-L1表达性细胞与非PD-L1表达性细胞，例如肿瘤细胞或肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)，和区分PD-L1表达性组织与非PD-L1表达性组织，例如癌组织。在一个方面，本文中提供了包含纤连蛋白III型第十结构域(10Fn3)的多肽，其中(a)10Fn3结构域包含AB、BC、CD、DE、EF和FG环，(b)10Fn3具有选自BC、DE和FG环的至少一个环，所述至少一个环具有相对于人10Fn3结构域(SEQIDNO:1)的相应环序列的改变的氨基酸序列，并且(c)所述多肽与PD-L1特异性地结合。在某些实施方案中，多肽以500mM或更小，例如100mM或更小的KD与PD-L1结合。在某些实施方案中，10Fn3结构域包含BC、DE和FG环，所述环包含以下氨基酸序列：(1)分别为SEQIDNO:6、7和8；(2)分别为SEQIDNO:21、22和23；(3)分别为SEQIDNO:36、37和38；(4)分别为SEQIDNO:51、52和53；(5)分别为SEQIDNO:66、67和68；(6)分别为SEQIDNO:81、82和83；(7)分别为SEQIDNO:97、98和99；(8)分别为SEQIDNO:113、114和115；(9)分别为SEQIDNO:124、125和126；(10)分别为SEQIDNO:135、136和137；(11)分别为SEQIDNO:146、147和148；(12)分别为SEQIDNO:157、158和159；(13)分别为SEQIDNO:168、169和170；(14)分别为SEQIDNO:179、180和181；(15)分别为SEQIDNO:190、191和192；(16)分别为SEQIDNO:201、202和203；(17)分别为SEQIDNO:212、213和214；(18)分别为SEQIDNO:223、224和225；(19)分别为SEQIDNO:234、235和236；(20)分别为SEQIDNO:245、246和247；(21)分别为SEQIDNO:256、257和258；(22)分别为SEQIDNO:267、268和269；(23)分别为SEQIDNO:278、279和280；(24)分别为SEQIDNO:289、290和291；(25)分别为SEQIDNO:300、301和302；(26)分别为SEQIDNO:311、312和313；(27)分别为SEQIDNO:322、323和324；(28)分别为SEQIDNO:333、334和335；(29)分别为SEQIDNO:344、345和346；(30)分别为SEQIDNO:355、356和357；(31)分别为SEQIDNO:366、367和368；(32)分别为SEQIDNO:377、378和379；(33)分别为SEQIDNO:388、389和390；(34)分别为SEQIDNO:399、400和401；(35)分别为SEQIDNO:410、411和412；(36)分别为SEQIDNO:421、422和423；(37)分别为SEQIDNO:432、433和434；(38)分别为SEQIDNO:443、444和445；(39)分别为SEQIDNO:454、455和456；(40)分别为SEQIDNO:465、466和467；(41)分别为SEQIDNO:476、477和478；(42)分别为SEQIDNO:487、488和489；(43)分别为SEQIDNO:498、499和500；(44)分别为SEQIDNO:509、510和511；(45)分别为SEQIDNO:520、521和522；(46)分别为SEQIDNO:531、530和531；(47)分别为SEQIDNO:542、543和544；(48)分别为SEQIDNO:553、554和555；或(49)分别为SEQIDNO:564、565和566。在某些实施方案中，多肽包含与表3中列出的序列，例如SEQIDNO:5、20、35、50、65、80、96、112、123、134、145、156、167、178、189、200、211、222、233、244、255、266、277、288、299、310、321、332、343、354、365、376、387、398、409、420、431、442、453、464、475、486、497、508、519、530、541、552和563中任一者至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，多肽包含与SEQIDNO:5、20、35、50、65、80、96、112、123、134、145、156、167、178、189、200、211、222、233、244、255、266、277、288、299、310、321、332、343、354、365、376、387、398、409、420、431、442、453、464、475、486、497、508、519、530、541、552或563的非BC、DE和FG环区至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。在某些实施方案中，多肽包含与选自下组的氨基酸序列至少80％、85％、90％、95％、98％本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可视化受试者中的PD‑L1蛋白的方法，其包括：(a)以约3‑10mCi(100‑333MBq)的剂量对受试者施用PD‑L1成像剂；和(b)在步骤(a)之后约30‑120分钟对受试者进行PET扫描。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.01 US 62/344,2581.一种可视化受试者中的PD-L1蛋白的方法，其包括：(a)以约3-10mCi(100-333MBq)的剂量对受试者施用PD-L1成像剂；和(b)在步骤(a)之后约30-120分钟对受试者进行PET扫描。2.权利要求1的方法，其中PD-L1成像剂的剂量为约6mCi(±10％)。3.权利要求1或2的方法，其中在步骤(a)之后约60-100分钟时进行步骤(b)的PET扫描。4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述受试者是患有癌症的受试者。5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述受试者患有至少一种肿瘤。6.权利要求4-5中任一项的方法，其用于测定受试者肿瘤中PD-L1蛋白的水平。7.权利要求1-6中任一项的方法，其用于确定受试者是否可能对用免疫肿瘤学药剂治疗有反应。8.权利要求7的方法，其用于确定受试者是否可能对用PD-1或PD-L1拮抗剂(例如，纳武单抗、派姆单抗或阿特珠单抗)治疗有反应，其中，如果在一个或多个肿瘤中的PD-L1水平等于或高于需要用PD-1或PD-L1拮抗剂(例如，纳武单抗、派姆单抗或阿特珠单抗)治疗的PD-L1水平，例如，如果超过5％、25％、50％或更多的肿瘤细胞表达PD-L1，那么受试者可能对用PD-1或PD-L1拮抗剂治疗有反应。9.权利要求1-6中任一项的方法，其中，如果在一个或多个肿瘤中的PD-L1水平等于或高于需要用PD-1或PD-L1拮抗剂(例如，纳武单抗、派姆单抗或阿特珠单抗)治疗的PD-L1水平，例如，如果超过5％、25％、50％或更多的肿瘤细胞表达PD-L1，那么用PD-1或PD-L1拮抗剂治疗所述受试者。10.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述受试者正在接受治疗剂治疗。11.权利要求10的方法，其中所述治疗剂是免疫治疗剂。12.权利要求11的方法，其中所述免疫治疗剂是PD-1拮抗剂。13.权利要求12的方法，其中所述PD-1拮抗剂是抗PD-1抗体。14.权利要求13的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗或派姆单抗或阿特珠单抗。15.权利要求1-14中任一项的方法，其中所述PD-L1成像剂是与人PD-L1特异性结合的蛋白质，其中所述蛋白质与可检测试剂连接。16.权利要求15的方法，其中所述PD-L1成像剂是抗PD-L1Adnectin。17.权利要求15-16中任一项的方法，其中所述可检测试剂是放射性PET示踪剂。18.权利要求17的方法，其中所述放射性PET示踪剂是18F。19.权利要求1-18中任一项的方法，其中所述PD-L1成像剂是用18F标记的抗人PD-L1Adnectin。20.权利要求10-19中任一项的方法，其中在第一次施用所述治疗剂之前将所述成像剂施用于受试者。21.权利要求10-19中任一项的方法，其中在施用第一个剂量的所述治疗剂之后将所述成像剂施用于受试者。22.权利要求21中任一项的方法，其中在施用第一个剂量的所述治疗剂之后1-7天将所述成像剂施用于受试者。23.权利要求10-22中任一项的方法，其中在施用第一个剂量的治疗剂之前以及在施用第一个剂量的治疗剂之后1-7天将成像剂施用于受试者。24.权利要求16-23中任一项的方法，其中所述抗人PD-L1Adnectin包含纤连蛋白III型第十结构域(10Fn3)，其中(a)该10Fn3结构域包含AB、BC、CD、DE、EF和FG环；(b)该10Fn3的选自BC、DE和FG环的至少一个环具有相对于人10Fn3结构域(SEQIDNO:1)的相应环序列改变的氨基酸序列；并且(c)该多肽与人PD-L1特异性结合。25.权利要求24的方法，其中所述多肽以小于500nM、100nM、10nM、1nM、500pM、200pM或100pM的KD与人PD-L1结合。26.权利要求25的方法，其中所述多肽以1nM或更小的KD与人PD-L1结合。27.权利要求24-26中任一项的方法，其中所述BC、DE和FG环包含以下氨基酸序列：(a)分别为SEQIDNO:6、7和8；(b)分别为SEQIDNO:21、22和23；(c)分别为SEQIDNO:36、37和38；(d)分别为SEQIDNO:51、52和53；(e)分别为SEQIDNO:66、67和68；(f)分别为SEQIDNO:81、82和83；或(g)分别为SEQIDNO:97、98和99。28.权利要求24-27中任一项的方法，其中所述多肽包含与SEQIDNO:5、20、35、50、65、80或96至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。29.权利要求28的方法，其中所述多肽包含与SEQIDNO:80至少80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。30.权利要求28的方法，其中所述多肽包含与SEQIDNO:96至少80％、85％、...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·E·莫林，D·唐纳利，D·利普夫斯基，J·高科梅杰，M·尤雷孔克尔，D·法布里奇奥，M·C·莱特，D·迪斯奇诺，S·J·博纳克斯，R·A·史密斯，V·拉丰特，D·科恩，D·K·梁，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：美国,US