一种清洁分解蜡质固定动物组织的方法技术

本发明专利技术公开了一种清洁分解蜡质固定动物组织的方法，包含对盛装于离心管内石蜡包埋组织切片的处理，操作过程包含以下步骤：加脱蜡液后立即高速离心；在中高温下孵育；从中高温孵育取出后立即高速离心；向离心管内液体中注入蛋白酶K溶液，在中温下孵育；再次高速离心，吸取组织分解液。本发明专利技术不用二甲苯，无需煮沸水浴，无需耗时去除蜡质，组织分解能力强，对于多量组织仍然可彻底将其分解并释放核酸，实验操作简单，基本无组织损耗，对核酸破坏少，适用范围广，极少量至大量的石蜡组织切片均可处理。

【技术实现步骤摘要】
一种清洁分解蜡质固定动物组织的方法
本专利技术涉及生物
，具体是一种清洁分解蜡质固定动物组织的方法，特别适用于石蜡固定组织切片中核酸物质的提取和纯化。
技术介绍
蜡质包埋组织是保存动物组织细胞核酸物质的常用方法，特别在医院保存人体组织时，一般采用石蜡包埋。当需要对保存组织进行核酸分子检测时，通常切取石蜡组织切片进行核酸的提取和纯化。从石蜡组织中提取核酸物质的关键步骤是将组织从石蜡中分离，将其彻底分解并释放细胞内核酸物质进入溶液中，方可成功提取和纯化核酸。目前石蜡切片组织的分解最常用方法是用二甲苯溶解包埋组织中的石蜡，再用无水乙醇清洗残余的二甲苯。二甲苯和无水乙醇的方法溶解石蜡最彻底，但二甲苯易挥发、气味重、毒性大、对组织破坏力强，并不是一种完美的方法。有人用DMSO作为石蜡溶解剂，DMSO气味小、不易挥发、毒性很低，但DMSO溶解石蜡的能力极为有限，仅能处理1-3张5微米的小薄片，对于较大量的石蜡切片效果很差。2000年上海医学检验杂志上发表的一篇《一种石蜡包埋组织DNA提取方法》论文第一次提出用TES溶液（10mmolTris-HCL，1mmolEDTA，0.5%SDS）脱蜡本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种清洁分解蜡质固定动物组织的方法，包含对盛装于离心管（01）内石蜡包埋组织切片（02）的处理，其特征在于，操作过程包含以下五个步骤：步骤一，加脱蜡液（04）后立即高速离心；步骤二，在中高温下孵育；步骤三，从中高温孵育取出后立即高速离心；步骤四，向离心管（01）内液体中注入蛋白酶K溶液，在中温下孵育；步骤五，再次高速离心，吸取组织分解液（08）。

【技术特征摘要】
1.一种清洁分解蜡质固定动物组织的方法，包含对盛装于离心管（01）内石蜡包埋组织切片（02）的处理，其特征在于，操作过程包含以下五个步骤：步骤一，加脱蜡液（04）后立即高速离心；步骤二，在中高温下孵育；步骤三，从中高温孵育取出后立即高速离心；步骤四，向离心管（01）内液体中注入蛋白酶K溶液，在中温下孵育；步骤五，再次高速离心，吸取组织分解液（08）。2.根据权利要求1所述的清洁分解蜡质固定动物组织的方法，其特征在于，在步骤一中，所述的脱蜡液（04）至少由十二烷基硫酸钠、三羟甲基氨基甲烷和乙二胺四乙酸三种化合物成份组成，且脱蜡液（04）中十二烷基硫酸钠的质量百分比浓度为0.2%-10%。3.根据权利要求1或2所述的清洁分解蜡质固定动物组织的方法，其特征在于，在步骤一中，采用三羟甲基氨基甲烷溶液来调整整体溶液pH值于7.0-8.5之间。4.根据权利要求3所述的清洁分解蜡质固定动物组织的方法，其特征在于，在步骤二中，所述的孵育温度为60℃-90℃，孵育时间为15分钟-60分钟。5.根据权利要求4所述的清洁分解...

【专利技术属性】
技术研发人员：文中伟，
申请(专利权)人：杭州倍强医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33