一株嗜冷菌及其应用制造技术

一株嗜冷菌及其应用，本发明专利技术涉及一株嗜冷菌及其应用。本发明专利技术一株嗜冷菌为Psychrobacter cryohalolentis F5‑6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年10月29日，保藏编号为CGMCC No.16653。本发明专利技术菌株可去除4～10℃低温地下水中的硝酸盐，在C/N比为0.5时，温度8℃，pH值7.2，180rpm下，硝酸盐还原速率可达83.73mg/L·h，本发明专利技术应用于环境微生物技术领域。

【技术实现步骤摘要】
一株嗜冷菌及其应用
本专利技术涉及一株嗜冷菌及其应用。
技术介绍
根据《2017中国生态环境状况公报》，我国共计7245个地下水监测点中，水质呈较差级别的监测点3947个，占54.5％，水质呈极差级别的监测点1068个，其中硝酸盐氮(NO3--N)是主要污染指标之一。而我国、尤其是北方地区，有50％以上以地下水为饮用水源。饮用水中的硝酸盐含量过高容易引起高铁血红蛋白症，甚至会诱发癌症，对人体造成危害。因此，有效去除地下水中的硝酸盐对于保障居民供水安全至关重用。我国从2007年7月起实施的生活饮用水卫生标准(GB5749-2006)也将硝酸盐氮的最高允许浓度限制在10mg/L。离子交换、反渗透等物理方法处理地下水中的硝酸盐成本较高、产生的再生液和浓缩水必须妥善处理。化学方法处理地下水中硝酸盐需要额外投加还原剂，易产生二次污染。生物处理法具有成本低、不添加新的化学药剂、不易产生二次污染等优点而备受广泛关注。但是地下水水温偏低，尤其是北方地区，地下水温一般为6～10℃。通常情况下，当温度低于15℃时，微生物的生物活性和代谢速率降低，低于10℃时，有些微生物的代谢活动会终止，6～10℃的低温严重影响了微生物对地下水中硝酸盐的去除效率。尽管在1996年，就发现了嗜冷菌Psychrobactercryohalolentis，但目前在嗜冷菌属中未发现有可进行硝酸盐还原的菌株，或可用于去除低温地下水中硝酸盐的菌株。
技术实现思路
本专利技术提供了一株嗜冷菌及其应用。本专利技术一株嗜冷菌为PsychrobactercryohalolentisF5-6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年10月29日，保藏编号为CGMCCNo.16653。本专利技术嗜冷菌PsychrobactercryohalolentisF5-6用于去除水中污染物。本专利技术嗜冷菌为PsychrobactercryohalolentisF5-6的筛选方法为：取受硝酸盐污染(硝酸盐浓度140mg/L)的低温地下水(水温4℃)100ml，在2～10℃、150rpm/min下富集12～20d，期间不断补充NaNO3和C2H5OH，待菌液的OD600值达到0.5以上后，梯度稀释并接种于固体培养基上，在2～10℃下培养5～7d，选取典型的单一菌落进行纯化培养。将最终获得的纯培养菌株进行硝酸盐还原试验，选取30min内对硝酸盐还原率达到50％以上的菌株。提取嗜冷菌基因组DNA后进行16SrDNA序列扩增，将获得片段用于测序，与嗜冷菌模式菌株PsychrobactercryohalolentisK5T的相似性为99.71％，鉴定为嗜冷菌Psychrobactercryohalolentis，最终命名为PsychrobactercryohalolentisF5-6。本专利技术PsychrobactercryohalolentisF5-6可去除4～10℃低温地下水中的硝酸盐，在C/N比为0.5时，温度8℃，pH值7.2，180rpm(溶解氧约为9.0mg/L)下，硝酸盐还原速率可达83.73mg/L·h。本专利技术的PsychrobactercryohalolentisF5-6保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年10月29日，保藏编号为CGMCCNo.16653。附图说明图1为本专利技术PsychrobactercryohalolentisF5-6的革兰氏染色结果示意图；图2为本专利技术PsychrobactercryohalolentisF5-6的菌落示意图。具体实施方式具体实施方式一：本实施方式一株嗜冷菌为PsychrobactercryohalolentisF5-6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年10月29日，保藏编号为CGMCCNo.16653。本实施方式嗜冷菌为PsychrobactercryohalolentisF5-6的筛选方法为：取受硝酸盐污染(硝酸盐浓度140mg/L)的低温地下水(水温4℃)100ml，在2～10℃、150rpm/min下富集12～20d，期间不断补充NaNO3和C2H5OH，待菌液的OD600值达到0.5以上后，梯度稀释并接种于固体培养基上，在2～610℃下培养5～7d，选取典型的单一菌落进行纯化培养。将最终获得的纯培养菌株进行硝酸盐还原试验，选取30min内对硝酸盐还原率达到50％以上的菌株。提取嗜冷菌基因组DNA后进行16SrDNA序列扩增，将获得片段用于测序，与嗜冷菌模式菌株PsychrobactercryohalolentisK5T的相似性为99.71％，鉴定为嗜冷菌Psychrobactercryohalolentis，最终命名为PsychrobactercryohalolentisF5-6。本实施方式PsychrobactercryohalolentisF5-6可去除4～10℃低温地下水中的硝酸盐，在C/N比为0.5时，温度8℃，pH值7.2，180rpm(溶解氧约为9.0mg/L)下，硝酸盐还原速率可达83.73mg/L·h。具体实施方式二：本实施方式嗜冷菌在筛选过程中使用的培养基配方为：NaNO30.1～0.5g/L，MnSO40.01～0.05g/L，(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O0.01～0.10g/L，CaCl20.01～0.05g/L，C2H5OH0.1～2.0mL/L，Na2HPO40.3～0.9g/L，MgSO4·7H2O0.01～0.05g/L，NaCl0.3～0.9g/L，pH值7.0～7.4。其他与具体实施方式一相同。若是固体培养基，则上述配方中加入1.8g/L的琼脂。具体实施方式三：本实施方式嗜冷菌PsychrobactercryohalolentisF5-6用于去除水中污染物。具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式三不同的是：水为低温地下水。其他与具体实施方式三相同。具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式三或四不同的是：所述低温地下水的温度为4～10℃。其他与具体实施方式三或四相同。具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式三至五之一不同的是：所述污染物为硝酸盐。其他与具体实施方式三至五之一相同。具体实施方式七：本实施方式嗜冷菌为PsychrobactercryohalolentisF5-6的筛选方法为：取受硝酸盐污染(硝酸盐浓度140mg/L)的低温地下水(水温4℃)100ml，在2～10℃、150rpm/min下富集12～20d，期间不断补充NaNO3和C2H5OH，待菌液的OD600值达到0.5以上后，梯度稀释并接种于固体培养基上，在2～10℃下培养5～7d，选取典型的单一菌落进行纯化培养。将最终获得的纯培养菌株进行硝酸盐还原试验，选取30min内对硝酸盐还原率达到50％以上的菌株。上述过程所使用的培养基为：NaNO30.1～0.5g/L，MnSO40.01～0.05g/L，(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O0.01～0.10g/L，CaCl20.01～0.05g/L，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株嗜冷菌，其特征在于它为Psychrobacter cryohalolentis F5‑6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年10月29日，保藏编号为CGMCC No.16653。

【技术特征摘要】
1.一株嗜冷菌，其特征在于它为PsychrobactercryohalolentisF5-6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年10月29日，保藏编号为CGMCCNo.16653。2.根据权利要求1所述的一株嗜冷菌，其特征在于嗜冷菌在筛选过程中使用的培养基配方为：NaNO30.1～0.5g/L，MnSO40.01～0.05g/L，(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O0.01～0...

【专利技术属性】
技术研发人员：张多英，张彦龙，白也，曾伟民，赵丹丹，雷虹，宫海楠，
申请(专利权)人：黑龙江大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23