3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮及其提取方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种名称为3,4,3’‑三羟基‑2,2’,5’‑三甲氧基查尔酮的化合物及其提取方法和应用，属于植物提取物领域。本发明专利技术提供的3,4,3’‑三羟基‑2,2’,5’‑三甲氧基查尔酮是一种新型化合物，具有优异的抗肿瘤活性，在制备抗癌药物方面具有广阔的应用前景。本发明专利技术提供了3,4,3’‑三羟基‑2,2’,5’‑三甲氧基查尔酮的提取方法，以长序荆树叶为原料，经过乙醇提取、石油醚和氯仿萃取以及两次硅胶柱层析分离即可得到本发明专利技术所述的3,4,3’‑三羟基‑2,2’,5’‑三甲氧基查尔酮。本发明专利技术提供的提取方法步骤简单，成本低，且原料来源广泛，容易进行产业化生产。

【技术实现步骤摘要】
3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮及其提取方法和应用
本专利技术涉及植物提取物的
，特别涉及3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮及其提取方法和应用。
技术介绍
恶性肿瘤是一种严重危害人类健康和生命的疾病，也是世界医学界的重大难题。2008年，全球恶性肿瘤患者1270万人，死亡人数高达760万。世界范围内因恶性肿瘤死亡的人数，比艾滋病、疟疾和结核病加起来还要多。如果不采取有效措施，预计到2030年，每年将出现2600万新增恶性肿瘤病例，死亡人数将达到1700万。我国每年恶性肿瘤的发病人数约为200万，死亡人数超过140万，并有逐年上升的趋势。攻克恶性肿瘤难关已成为医药工作者和化学工作者当务之急的任务。近年来中药及其有效成分抗肿瘤研究工作取得了一系列的成果，从植物中得到的抗肿瘤成分主要包括生物碱类、萜类、黄酮类、植物多糖类、多酚类、有机酸类和木脂素类等化合物。当今国际上常用的抗肿瘤植物药和辅助化疗的中药主要包括紫杉醇、喜树碱、长春花碱、白藜芦醇、鬼臼毒素等。这些植物药基本上已用于所有种类的癌症的治疗或辅助治疗，如紫杉醇已用于喉癌、卵巢癌，黄芪等用于肝癌，五加多糖用于胃癌，魔芋用于腹水肿瘤，山豆根等用于治疗消化道癌等。目前，世界上对抗肿瘤药用植物的研究工作已经涉及300余科植物，从植物中筛选出的抗癌活性成分已达617万种。美国国立癌症研究所自1957年以来，每年筛选出1500～5000种植物提取物的抗癌活性成分。中国的中医药具有2500多年的历史，它们在治疗各种疑难杂症中显现出了神奇的疗效。但我国对植物有效成分的提取分离工作开展较晚，目前约对3000余种(占我国植物总数的10％左右)植物进行了有效成分的研究工作，发现不足300种植物有效成分具有抗癌活性，研究较多的有200余种。因此，我们必须加大对中医药的研究力度和深度，力争从植物中获得毒性低而抗肿瘤作用显著的新衍生物。牡荆属植物是马鞭草科乔木或灌木，全世界约250种，主要分布于热带和温带地区。我国有14种，7变种，3变型，主要分布在长江以南地区，少数种类在西北、东北、华北等地也有分布。本属的许多种植物为传统的药用植物，在我国有7种药用，其中，黄荆被收入中国药典。牡荆属植物含有多种化学成分，迄今从该属植物中获得的天然产物类型有黄酮类、二帖类、甾类、环烯醚萜类、三萜类、苯丙素类、倍半萜类等。现代药理研究表明，本属植物所含成分具有多种药理活性，如抗肿瘤、调节内分泌、解热镇痛、抗炎作用、保肝作用、抗氧化作用、抗菌作用、杀虫作用以及呼吸系统活性等。自从1993年Sliutz等报道淡花牡荆提取物抑制鼠垂体细胞泌乳素分泌以后，国内外许多研究机构对牡荆属的抗肿瘤作用产生了浓厚的兴趣，抗肿瘤活性成为该属植物目前研究的热点之一。该属植物提取物可以通过多种途径抑制肿瘤增殖和诱导肿瘤细胞的凋亡，发挥抗肿瘤活性。长序荆(Vitexrotundifolia)为牡荆属植物，具有抗炎、疏散风热等功效。目前，国内外尚没有对长序荆的化学成分和抗肿瘤活性的研究报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术目的在于提供3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮及其提取方法和应用。本专利技术从长序荆树叶中提取得到一种新化合物，名称为3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮，该化合物具有优异的抗癌活性，具有广阔应用的前景。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮，具有式I所示结构：本专利技术提供了上述方案所述3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对长序荆树叶粉碎物进行乙醇提取，得到流浸膏；(2)将流浸膏分散于水中后依次使用石油醚和氯仿进行萃取，将得到的氯仿萃取液浓缩，得到氯仿部位浸膏；(3)将所述氯仿部位浸膏进行第一硅胶柱层析分离；所述第一硅胶柱层析分离的洗脱剂为石油醚-丙酮体系；所述第一硅胶柱层析分离的洗脱方式为梯度洗脱；所述各梯度洗脱剂中石油醚和丙酮的体积比依次为10:0、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0:1，每一梯度洗脱剂的体积为与氯仿部位浸膏的质量之比为3000mL：45～55g；以每一梯度洗脱剂体积的1/3为一流份，将第11到第15流份浓缩后合并，得到粗提取物；(4)将所述粗提取物进行第二硅胶柱层析分离；所述第二硅胶柱层析分离的洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯体系；所述第二硅胶柱层析分离的洗脱方式为梯度洗脱；所述各梯度洗脱剂中石油醚和乙酸乙酯的体积比依次为10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0:1，每一梯度洗脱剂的体积与粗提取物的质量之比为2000mL：3～3.5g；以每一梯度洗脱剂体积的1/2为一流份，将第10到第11流份浓缩后合并，将溶剂挥干后得到3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮。优选的，所述长序荆树叶粉碎物的粒度≤100目。优选的，所述乙醇提取为回流提取。优选的，所述乙醇提取包括依次进行的第一提取、第二提取和第三提取；所述第一提取用乙醇的体积和所述长序荆树叶粉碎物的质量之比为10～12mL:1g，第一提取的时间为2～2.5h；所述第二提取用乙醇的体积和所述长序荆树叶粉碎物的质量之比为8～9mL:1g，第二提取的时间为1.5～1.8h；所述第三提取用乙醇的体积和所述长序荆树叶粉碎物的质量之比为6～6.5mL:1g，第三提取的时间为1～1.2h。优选的，所述第一硅胶柱层析分离用硅胶柱的规格为1500g，100～200mesh，ф75mm×L1100mm。优选的，所述第二硅胶柱层析分离用硅胶柱的规格为300g，100～200mesh，ф45mm×L900mm。本专利技术提供了上述方案所述的3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮或上述方案所述方法提取到的3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮在制备抗宫颈癌药物和抗肝癌药物中的应用。本专利技术提供了一种名称为3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮的化合物，该化合物是一种新型化合物，具有优异的抗肿瘤活性，在制备抗癌药物方面具有广阔的应用前景。实施例结果表明，3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮浓度为0.10μg/mL时，对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌HepG2细胞生长抑制率分别为89％和72％。本专利技术提供了3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮的提取方法。本专利技术以长序荆树叶为原料，经过乙醇提取、石油醚和氯仿萃取以及两次硅胶柱层析分离即可得到本专利技术所述的3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮。本专利技术提供的提取方法步骤简单，成本低，且原料来源广泛，容易进行产业化生产。具体实施方式本专利技术提供了一种名称为3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮的化合物，结构式如式I所示：本专利技术提供了3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮的提取方法，包括以下步骤：(1)对长序荆树叶粉碎物进行乙醇提取，得到流浸膏；(2)将流浸膏分散于水中后依次使用石油醚和氯仿进行萃取，将得到的氯仿萃取液浓缩，得到氯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.3,4,3’‑三羟基‑2,2’,5’‑三甲氧基查尔酮，具有式I所示结构：

【技术特征摘要】
1.3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮，具有式I所示结构：2.权利要求1所述3,4,3’-三羟基-2,2’,5’-三甲氧基查尔酮的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对长序荆树叶粉碎物进行乙醇提取，得到流浸膏；(2)将流浸膏分散于水中后依次使用石油醚和氯仿进行萃取，将得到的氯仿萃取液浓缩，得到氯仿部位浸膏；(3)将所述氯仿部位浸膏进行第一硅胶柱层析分离；所述第一硅胶柱层析分离的洗脱剂为石油醚-丙酮体系；所述第一硅胶柱层析分离的洗脱方式为梯度洗脱；所述各梯度洗脱剂中石油醚和丙酮的体积比依次为10:0、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0:1，每一梯度洗脱剂的体积为与氯仿部位浸膏的质量之比为3000mL：45～55g；以每一梯度洗脱剂体积的1/3为一流份，将第11到第15流份浓缩后合并，得到粗提取物；(4)将所述粗提取物进行第二硅胶柱层析分离；所述第二硅胶柱层析分离的洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯体系；所述第二硅胶柱层析分离的洗脱方式为梯度洗脱；所述各梯度洗脱剂中石油醚和乙酸乙酯的体积比依次为10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0:1，每一梯度洗脱剂的体积与粗提取物的质量之比为2000mL：3～3.5g；以每一梯度洗脱剂体积的1/2为一流份，将第10...

【专利技术属性】
技术研发人员：代现平，刘明，李孟顺，耿枫，
申请(专利权)人：滨州医学院，
类型：发明
国别省市：山东,37